1、中华 人 民 共 和 国 国家 标 准大 豆 制 品 甲酚 红 指 数 的 测 定G B/T 1 5 4 0 3 一9 4De t e r mi n a t i o n o f c r e s o l r e d i n d e x f o r s o y a b e a n p r o d u c t s 本标准等同采用国际标准I S O 5 5 1 4-1 9 7 9 大豆制品一 甲酚红指数的测定。1 主题内容与适用范围 本标准规定了 大豆制品中甲 酚红指数的测定方法。甲 酚红指数大小，可以确定大豆制品的热处理程度。用甲 酚红指数尤其可以 评估是否烧煮烹制过度。本标准适用于大豆制品，对非纯
2、大豆制品 有一定局限性。2 引用标准 G B 2 9 0 5 谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法3 术语 甲 酚红指数:在规定的操作条件下，含有5 0 0 m g 粗蛋白 质的大豆制品所结合的甲酚红毫克数。4 原理 甲 酚红可与蛋白质分子特别是大豆蛋白质分子中的阳离子基团结合，大豆制品受热致使蛋白质变性时，阳离子基团增多，因此一定量的大豆制品可结合的甲酚红的量，即甲酚红指数可以评价大豆制品的热处理程度，特别是可以说明它是否已加热过度。取定量磨好的试样与甲 酚红标准溶液混合。经过规定的 反应时间后，用分光光度法测定溶液中 残存甲酚红的浓度，再与甲酚红标准溶液的初始浓度相比，即可测得该试样的甲酚红指
3、数。5 试荆 本标准所用试剂均为分析纯，水为燕馏水或纯度相当的水。5.1 甲 酚红标准液，。.1 g/L 称取0.1 g 甲 酚红(H G 3-3 0 4 8),准确至1 m g)溶于4 0 m l,0.1 m o l/L的氢氧化钠溶液，定量转移到1 0 0 0 m L容量瓶中，加水至约8 0 0 m L，加入1 0 0 m L 1 m o l/L盐酸，然后加水稀释至刻度，混匀。5.2 氢氧化钠(G B 6 2 9)溶液,0.0 2 m o l/L,5.3 正己烷。6 仪器设备6.1 粉碎机:粉碎中不明显发热(如球磨机);6-2 筛:筛孔0.2 m m(8 0目);6.3 分析天平:感量。.0
4、 0 0 1 g s国家技术监誉局1 9 9 4 一，2 一 3 0 批准1 9 9 5 一 0 7 一 0 1 实施G B/T 1 5 4 0 3 一 9 46.4 移液管:1 m L,2 0 m L;6.5 磁力搅拌器:直径1 2 0 m m;6.6 离心机:3 0 0 0 r/m i n 并备有聚乙烯离心管;6-7 振荡机;6.8 分光光度计，或带干涉滤光片的比色计。对于脂肪含量大于1 0%的样品则需用;6.9 微型磨或研钵;6.1 0 减压蒸除溶剂的装置(如旋转蒸发器)。7 试样的制备 用粉碎机(6.1)粉碎5-1 0 g 试样，使其全部通过(6,2)的筛孔。如样品的脂肪含量超过 1
5、0%，可于微型磨或研钵(6.9)中，加入适量正己烷(5.3)进行粉碎或研磨，然后倾弃大部份溶剂，于6 0 以下减压蒸发(6.1 0)至干。8 分析步骤8.1 粗蛋白质含量的测定 依照G B 2 9 0 5 所规定的方法测定粗蛋白质的含量(氮含量X 6.2 5)08.2 甲酚红指数的测定 称取一定量样品双份(精确到0.1 m g)，使其中蛋白质含量达1 0 0.0 m g，分别置于5 0 m L锥形瓶中。用移液管(6.4)分别加入2 0.0 m L甲酚红标准液(5.1)，于磁力搅拌器(6.5)上搅拌3 0 m i n，然后将混合物移至离心管(6.6)中，离心，直至上清液清澈为止，一般在3 0 0
6、 0 r/m i n 下离心约2 0 m i n。或在振荡机(6.7)上振荡3 0 m i n，过滤，弃去初滤液。用移液管(6.4)吸取 1.0 m L上清液(或滤液)置于另一小锥形瓶中，加人 2 0 m L氢氧化钠溶液(5.2),混合，5 -1 0 m i n 后，在分光光度计或比色计(6-8)上，波长5 7 0 n m处，用光径为1 c m的比色池，以 水做参比，测定溶液吸光度A,，以同法测定同样条件下稀释的标准甲 酚红溶液(4.1)的吸光度A Z,9 分析结果的衰述 甲 酚红指数表示为每5 0 0 m g 粗蛋白 质(氮含量X 6.2 5)所结合的甲 酚红毫克数。_ _、。.A，一 A，_ _ _ _中附?l.摺取-一 一 二-x 1 v J 1 2式中:人 与蛋白 质反应后剩余甲 酚红溶液吸光度。A -稀释后标准甲酚红溶液的吸光度。如所测双样间的结果符合1 0 的要求，取其算术平均值报告结果，最后结果保留一位小数。1 0 互复性 同一分析人员使用相同仪器设备，所测双样或相继测定结果间的相对相差不大子5%=G s/T 1 5 4 0 3 一9 4附加说明:本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国农业分析标准化技术委员会归口。本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。本标准主要起草人常碧影、梁冬生。