1、场中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 1 9 6 4 8-2 0 0 5水果和蔬菜中4 4 6 种农药多残留测定方法 气相色谱一 质谱和液相色谱一 串联质谱法Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f 4 4 6 p e s t i c i d e s r e s i d u e s i n f r u i t s a n d v e g e t a b l e s-GC-M S a nd LC-M S-M S2 0 0 5-0 2-0 4 发布2 0 0 5-0 8-0 1实施中 华人民 共和国 国 家质 量监督 检验 检疫
2、总局.*中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 a,JjGB/T 1 9 6 4 8-2 0 0 5目次1111122245620胜36前言1范围、2 规 范性 引用文件3 原理 4 试剂和材 料 5 仪 器 6 试样 的制备与保存7 测定步 骤 8 结果计算 9 精 密度 附录 A(资料性附 录)附录 B(资料性 附录)附录 C(资料性附录)附录 D(资料性附录)附录 E(资料性附录)4 4 6 种农药中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表 ，G C-MS 测定的3 8 3种农药和内标化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的比值 ，G C MS
3、测定的 A,B,C,D四组农药选择离子监测分组表，-“，标准物质在苹果基质中选择离子监测GC-MS图 ，一L C-MS-MS测定的 E组农药监测离子对、碰撞能量、去簇电压和保留时间一一附录 F(资料性附录)标准物质 I,C-MS-MS总离子流图附录 G(资料性附录)4 4 6 种农药精密度数据表，-附录 H(资料性附录)4 4 6 种农药英文中文名称对照索引 GB/T 1 9 6 4 8-2 0 0 5前言本标准的附录 A、附录B、附录C、附录D、附录 E、附录 F,附录G和附录 H为资料性附录。本标准由中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局提出。本标准由中华人民共和国河北出人境检验检疫局归口。
4、本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。本标准主要起草人:庞国芳、范春林、张进杰、刘永明、曹彦忠、李学民、吴艳萍、郭彤彤。本标准系首次发布的国家标准。GB/T 1 9 6 4 8-2 0 0 5水果和蔬菜中 4 4 6 种农药多残留测定方法 气相色谱一 质谱和液相色谱一 串联质谱法范 围 本标准规定了水果和蔬菜中4 4 6 种农药(参见附录 A)残留量气相色谱一 质谱和液相色谱一 串联质谱的测定方法 本标准适用于苹果、梨、柑橘、香蕉、葡萄、菠萝、琳猴桃、甘蓝、西红柿、黄瓜、青椒、菠菜、菜花、芹菜、豆角、胡萝 卜、土豆、菜笋等水果和蔬菜中4 4 6 种农药残留量的测定。本标准的方法
5、检出限为。.0 0 0.2 mg/k g-v 0.6 0 0 0 m g/k g(参见附录 A).2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注 日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。G B/T 6 3 7 9 测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性(GB/T 6 3 7 9-1 9 8 6,n e q I S O 5 7 2 5:1 9 8 1)G B/T 6 6 8 2 分析实
6、验室用水规格和试验方法(G B/T 6 6 8 2-1 9 9 2,n e q I S O 3 6 9 6:1 9 8 7)GB/T 8 8 5 5 新鲜水果 和蔬菜的取样方法(GB/T 8 8 5 5-1 9 8 8,e g v I S O 8 7 4:1 9 8 0)原 理 试样用乙睛匀浆提取，盐析离心后，取上清液，经固相萃取柱净化，用乙睛+甲苯(3+1)洗脱农药，根据不同检测要求用气相色谱一 质谱仪和液相色谱一 串联质谱仪检测。4 试剂和材料 除另有说明外，水为 G B/T 6 6 8 2规定的一级水。4.1 乙睛:色谱纯。4.2 氯化钠:优级纯。4.3 无水硫酸钠:分析纯。用前在 6
7、5 0 灼烧 4 h,贮于干燥器中，冷却后备用。4.4 甲苯:优级纯4.5 丙酮:分析纯，重蒸馏。4.6 二氯甲烷:色谱纯。4.7 甲醇:色谱纯。4.8 正己烷:分析纯，重蒸馏。4.9 E n v i-1 8 柱 :1 2 mL,2.0 g或相当者。4.1 0 E n v i-C a r b 活性炭柱:6 m L,0.5 g 或相当者。4.1 1 S e p-P a l o 氨丙基固相萃取柱:3 m l-,0.5 g或相当者。E n v i-1 8柱和 E n v i-C a r b柱是由 S UP E L C O公司提供的产品的商品名.给出这一信息是为了方便本标准的使用者，井不表示对该产品的
8、认可。如果其他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品S e p-P s k氨丙基往是由Wa te r s 公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品。GB/T 1 9 6 4 8-2 0 0 54.1 2 农药标准物质:纯度)9 54.1 3 农药标准溶液4.1 3.1 标准储备溶液 分别称取适量(精确至0.1 m g)各种农药标准物分别于 1 0 m L容量瓶中，根据标准物的溶解度选甲苯、甲苯+丙酮混合液、二氯甲烷或甲醇等溶剂溶解并定容至刻度(溶剂选择参见附录A),4.1 3.2 混合标准溶液(
9、混合标准溶液 A,B,C,D和E)按照农药的性质和保留时间，将4 4 6 种农药分成 A,B,C,D,E五个组，并根据每种农药在仪器上的响应灵敏度，确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准对 4 4 6 种农药的分组及其混合标准溶液的浓度参见附录A 依据每种农药的分组号、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度，移取一定量的单个农药标准储备溶液于1 0 0 mL容量瓶中，A,B,C,D组农药用甲苯，E组农药用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避光 4 保存，可使用一个月。4.1 3.3 内标溶液 准确称取3,5 mg环氧七氯于 1 0 0 m L容量瓶中，用甲苯定容至刻度。4,1 3.4 基质混合标准工作溶
10、液 A,B,C,D组农药基质混合标准工作溶液是将 4 0 V L内标溶液(4.1 3.3)和 5 0 k L的混合标准溶液(4.1 3.2)分别加到 1.0 m L的样品空白基质提取液中，混匀，配成基质混合标准工作溶液 A,B,C,D.E组农药基质混合标准工作溶液是用样品空白溶液配成不同浓度的基质混合标准工作溶液 E，用于绘制标 准工作曲线。基质混合标准工作溶液应现用现配5 仪器5.15.25.35.45.55.65.75.85 _ 9气相色谱一 质谱仪:配有电子轰击源(E I)液相色谱一 串联质谱仪:配有电喷雾离子源(E S D.分析 天平:感量。1 m g 和。.0 1 g 各一台。高速
11、组织捣碎机:转速不低于2 0 0 0 0 r/m i n e旋转蒸发器。离心机:转速不低于 4 0 0 0 r/mi n鸡心瓶:2 0 0 m L,移液器:1 m L氮气吹干仪。6 试样的制备与保存6.飞 试样的制备 按 G B/T 8 8 5 5抽取的水果、蔬菜样品取可食部分切碎，混匀，密封，作为试样，标明标记6.2 试样的保存 将试样于4 冷藏箱保存7测定步骤7.1 提取 称取 2 0 g试样(精确至。.0 1 g)于 8 0 mL离心管中，加人 4 0 ml 一 乙睛，用高速组织捣碎机在1 5 0 0 0 r/m i n，匀浆提取 1 min，加人 5 g氯化钠，再匀浆提取1 m i n
12、，将离心管放人离心机，在3 O O O r/mi n离心 5 mi n，取上清液 2 0 mL(相当于 1 0 g试样量)，待净化。GB/T 1 9 6 4 8-2 0 0 57.2净化7.2.1 对 A,B,C,D组农药:将 E n v i-1 8柱放人固定架上，加样前先用 1 0 mL乙睛预洗柱，下接鸡心瓶，移人上述 2 0 m l提取液，并用 1 5 mL乙睛洗脱，将洗脱液在 4 0 水浴中旋转浓缩至约 1 mL，备用。7.2.2 对 E组农药:将上述2 0 mL提取液在 4 0 水浴中旋转浓缩至约1 mL，备用。7.2.3 在 E n v i-C a r b柱中加人约 2 c m高无水
13、硫酸钠，将该柱连接在S e p-P a k 氨丙基柱顶部，并将串联柱放人下接鸡心瓶的固定架上。加样前先用 4 m L乙睛+甲苯(3+1)预洗柱，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将样品浓缩液(7.2.1 或 7.2.2)转移至净化柱上，再每次用 2 mL乙睛+甲苯(3+1)三次洗涤样液瓶，并将洗涤液移人柱中。在串联柱上加上 5 0 ml贮液器，用 2 5 m工乙睛+甲苯(3+1)洗脱农药，合并于鸡心瓶中，并在 4 0 水浴中旋转浓缩至约 0.5 MI,。对 A,B,C,D组农药，每次加人 5 m工正己烷在 4 0 水浴中旋转蒸发，进行溶剂交换两次，最后使样液体积约为1 mL，加人 4 0 p L内
14、标溶液，混匀，用于气相色谱一 质谱测定;对E组农药，将浓缩液置于氮气吹干仪上吹干，并迅速用乙睛+水(3+2)定容 1 ml-,混匀，用于液相色谱一 串联质谱测定。7.3测定7.3.1 气相色谱一 质谱法7.3.1.1 条件 a)色谱柱:D B-1 7 0 1(3 0 mX0.2 5 mm X0.2 5 p m)石英毛细管柱或相当者;b)色谱柱温度程序:4 0 保持 1 mi n，然后以3 0*C/mi n程序升温至 1 3 0 C，再以5 0C/m i n升温至 2 5 0 0C，再以1 0 0C/mi n 升温至3 0 0 0 C，保持 5 mi n;C载气:氦气，纯度)9 9.9 9 9%
15、o，流速为1.2 mL/mi n;d)进样口温度:2 9 0 0 C;e)进样量:1 P I;f)进样方式:无分流进样，1.5 min后打开分 流阀和隔垫吹扫阀;9)电子轰击源,7 0 e V;h)离子源温度:2 3 0 0 C;i)G C-MS接口温度:2 8 0 0C;7)选择离子监测:每种化合物分别选择一个定量离子，2 个一3 个定性离子。每组所有需要检测 的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量 离子与定性离子的丰度比值参见附录 B。每组检测离子的开始时间和住留时间参见附录Ce7.3.1.2定性 测定 进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间
16、与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致，则可判断样品中存在这种农药化合物。如果不能确证，应重新进样，以扫描方式(有足够灵敏度)或采用增加其他确证离子的方式或用其他灵敏度更高的分析仪器来确证。7.3.1.3 定f M 9 定 本方法采用内标法单离子定量测定。内标物为环氧七氯。为减少基质的影响，定量用标准应采用基质混合标准工作溶液标准溶液的浓度应与待测化合物的浓度相近。本方法的 A,B,C,D四组标准物质在苹果基质中选择离子监测 G C-MS图参见附录 D7.3.2 液相色谱一 串联质谱法7.3.2.1 条件 a)色谱柱:A t l a n t i s d C,e,3 p.m,1 5 0 m m X 2.1 mm或相当者;b)流动相及流速见表 1;c)柱温,4 0 0C;d)进样量:2 0 uL;GB/T 1 9 6 4 8-2 0 0 5e)扫描方式:正离子扫描;f)检测方式:多反应监测;8)电喷雾电压:5 5 0 0 V;h)雾化气压力:0.0 7 6 MP a;i)气帘气压力:0.0 8 3 MP a;