1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 代替 进出口食品中敌百虫残留量检测方法液相色谱质谱 质谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 狉 犻 犮 犺 犾 狅 狉 犳 狅 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犿 犲 犪 狋 犪 狀 犱犿 犲 犪 狋狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊 犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准代替 出口肉及肉制品中敌百虫残留量的检验方法。本标准与 相比，主要技术变
2、化如下：使用范围、指标包括原标准的内容；采用气相色谱质谱法；增加阳性确证内容；整合前处理条件。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本标准主要起草人：李爱军、王明泰、马旭、牟峻、卢利军、马书民、周晓。本标准所代替标准历次版本发布情况为：、。犛 犖犜 进出口食品中敌百虫残留量检测方法液相色谱质谱 质谱法范围本标准规定了出口农产品中敌百虫残留量的液相色谱质谱质谱检测和确证方法。本标准适用于出口清蒸猪肉罐头、猪肉、鸡肉、牛肉、鱼
3、肉、香肠、糙米、玉米、洋葱、核桃中敌百虫残留量的测定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法方法提要试样用环己烷乙酸乙酯（，体积比）提取，经凝胶色谱净化，用甲醇水（，体积比）定容，供液相色谱质谱质谱仪测定，外标法定量。试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。环己烷：高效液相色谱级。甲醇：高效液相色谱级。乙酸乙酯：残留级。无水硫酸钠：灼烧，储于密封容器中备用。环己烷乙酸乙酯：（，体积比）：量取 环己烷和 正己烷，混
4、匀。乙酸铵：优级纯。乙酸铵溶液：称取 乙酸铵溶于 水中。敌百虫标准品（，编号：，分子式：）：纯度大于等于 。敌百虫标准储备溶液：准确称取适量的敌百虫标准品，用甲醇配制成浓度为 的标准储备溶液。该溶液在冰箱中保存。敌百虫标准工作溶液：根据需要将敌百虫标准储备溶液（）用甲醇稀释成适用浓度的标准工作溶液。该溶液在冰箱中保存。有机微孔滤膜：，。仪器与设备 液相色谱质谱质谱仪：配有电喷雾离子源（）。犛 犖犜 电子天平：感量：。凝胶色谱仪：配有单元泵、馏分收集器。均质器。旋转蒸发器。浓缩瓶：。离心机：以上。离心管：四氟乙烯，。涡旋混匀器。试样制备与保存 试样制备 肉：将所取全部样品，缩分出有代表性样品不少
5、于 ，经捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净容器，密封，标明标记。罐头：将所取全部样品正罐倒出，缩分出有代表性样品不少于 ，经捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净容器，密封，标明标记。糙米、玉米、洋葱、核桃：取代表性样品约 ，用粉碎机粉碎，混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。试样保存肉类试样于 以下冷冻保存；粮谷类、坚果类及其他类试样于保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取称取解冻试样（精确到 ）于 离心管（）中，加无水硫酸钠（）和 环己烷乙酸乙酯（），均质 ，在 离心 ，吸出环己烷乙酸乙酯层通过装有无水硫酸钠的桶形漏斗，收集于 浓缩瓶中，残渣分别用 环己烷乙酸乙酯
6、提取两次，提取液合并于 浓缩瓶中，于 下浓缩至约，将 提取液转移至试管中，并用 环己烷乙酸乙酯（）分三次洗涤浓缩瓶，合并洗涤液于试管中，在室温下，氮吹浓缩近干，用环己烷乙酸乙酯（）定容，过 滤膜，待凝胶色谱（）净化。净化 凝胶色谱（犌 犘 犆）净化 凝胶色谱条件凝胶色谱条件如下：）凝胶净化柱：，（内径），或相当者；）流动相：乙酸乙酯环己烷（，体积比）；）流速：；）样品定量环：；犛 犖犜 ）预淋洗时间：；）凝胶色谱平衡时间：；）收集时间：。凝胶色谱净化步骤将 待净化液（）按 规定的条件进行净化，收集组分于室温下氮吹浓缩近干，用甲醇水（，体积比）溶解并定容至 ，过 滤膜，供液相色谱质谱质谱仪测定。
7、测定 液相色谱质谱质谱条件液相色谱质谱质谱条件如下：）色谱柱：色谱柱，（内径），粒径或相当者；）流动相：甲醇（）乙酸胺溶液（），梯度洗脱程序见表：表流动相梯度洗脱程序时间 甲醇 乙酸胺溶液 ）流速：；）柱温：；）进样量：；）离子源：电喷雾离子源；）扫描方式：正离子；）检测方式：多反应检测（）；）质谱条件参见附录。色谱测定根据试样中被测样液的含量情况，选取响应值相近的标准工作液进行色谱分析。标准工作液和样液中待测物的响应值均应在仪器线性响应范围内。在上述色谱条件下敌百虫的参考保留时间约为：，敌百虫标准品多反应检测（）色谱图参见附录中；外标法定量。定性测定按照液相色谱质谱质谱条件测定样品和标准工作
8、溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准品一致，定量测定时采用标准曲线法。定性时应当与浓度相当标准溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表规定的范围，则可判定样品中存在对应的被测物。犛 犖犜 表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。结果计算和表述用色谱数据处理机或用标准曲线按式（）计算试样中敌百虫的残留量，计算结果需扣除空白值：犡犮犞狀犿 （）式中：犡 试样中敌百虫残留量，单位为毫克每千克（）；犮 从标准曲线上得到的待测液中敌百虫的浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 样液最终定容体积，单位为毫升（）；狀 稀释倍数；犿 最终
9、样液所代表的试样质量，单位为克（）。注：计算结果应扣除空白值。测定低限（犔 犗 犙）和回收率 测定低限（犔 犗 犙）本方法对出口清蒸猪 肉 罐 头、猪 肉、鸡 肉、牛 肉、鱼 肉、香 肠 中 敌 百 虫 残 留 量 的 测 定 低 限 均 为 （）：糙米、玉米、洋葱、核桃中敌百虫残留量的测定低限均为 （）。回收率回收率的实验数据（在不同添加浓度范围内）见表。表本方法添加浓度及回收率范围样 品 名 称添加浓度 回收率范围测定低限 清蒸猪肉罐头 猪肉 犛 犖犜 表（续）样 品 名 称添加浓度 回收率范围测定低限 鸡肉 牛肉 鱼肉 香肠 糙米 玉米 洋葱 核桃 犛 犖犜 附录犃（资料性附录）犃 犘
10、犐 犔 犆犕 犛犕 犛检测敌百虫色谱条件电喷雾离子源参考条件检测离子对及电压参数：）气帘气（）：；）雾化气（）：；）辅助加热气（）：；）碰撞气（）：；）离子源喷雾电压（）：；）离子源温度（）：；）定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量、碰撞室出口电压见表。表犃 犙、犙、去簇电压、碰撞能量、碰撞室出口电压表名称去簇电压碰撞能量 碰撞室出口电压敌百虫 ）非商业声明：附录所列参考质谱条件是在 液相色谱质谱质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛 犖犜 附录犅（资料性附录）敌百虫标准品多反应检测（犕犚犕）色谱图犪）犫）犮）图犅
11、 敌百虫标准品多反应检测（犕犚犕）色谱图（犵犿 犔）犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犪 犮 犮 狅 狉 犱 犻 狀 犵狋 狅犌 犅犜 犜 犺 犻 狊狊 犲 犮 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲狅 狉 犻 犵 犻 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狊（犛 犖犜 ）狑 犪 狊 狉 犲 狏 犻 狊 犲 犱犪 狀 犱犮 狅 狀 狊 狅 犾 犻 犱 犪 狋 犲 犱 犻 狀 犱 犲 狓，狌 狊 犲 狋 犺 犲狉 犪 狀 犵 犲，犻 狀 犮 犾 狌 犱 犻 狀 犵狋 犺 犲 狅 狉 犻 犵 犻 狀 犪 犾 狉
12、犲 犾 犪 狋 犲 犱狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狊，狌 狊 犻 狀 犵 犵 犪 狊犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔 犿 犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔，犻 狀 犮 狉 犲 犪 狊 犲狆 狅 狊 犻 狋 犻 狏 犲犮 狅 狀 犳 犻 狉 犿 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋，犻 狀 狋 犲 犵 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狆 狉 犲 狋 狉 犲 犪 狋 犿 犲 狀 狋犮 狅 狀 犱 犻 狋 犻 狅 狀 狊 犘 犾 犲 犪 狊 犲狀 狅 狋 犲狋 犺 犪 狋狊 狅 犿 犲狅 犳 狋 犺 犲犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋狅 犳 狋
13、犺 犻 狊犱 狅 犮 狌 犿 犲 狀 狋犿 犪 狔 犻 狀 狏 狅 犾 狏 犲狆 犪 狋 犲 狀 狋 犜 犺 犻 狊 犳 犻 犾 犲 犻 狊狀 狅 狋 狉 犲 狊 狆 狅 狀 狊 犻 犫 犾 犲犳 狅 狉 狋 犺 犲狆 狌 犫 犾 犻 狊 犺 犻 狀 犵狊 犲 犮 狋 狅 狉 狉 犲 犮 狅 犵 狀 犻 狕 犲 狊狋 犺 犲狉 犲 狊 狆 狅 狀 狊 犻 犫 犻 犾 犻 狋 狔狅 犳 狋 犺 犲 狊 犲狆 犪 狋 犲 狀 狋 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱 犻 狊狌 狀 犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳
14、 狋 犺 犲犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀犃 犱 犿 犻 狀 犻 狊 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔狋 犺 犲犑 犻 犾 犻 狀犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻
15、犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪、犜 犻 犪 狀 犼 犻 狀犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊犿 犪 犻 狀犱 狉 犪 犳 狋 犲 狉狅 犳狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犔 犻犃 犻 犼 狌 狀，犠 犪 狀 犵犕 犻 狀 犵 狋 犪 犻，犕 犪犡 狌，犕 狌犑 狌 狀，犔 狌犔 犻 犼 狌 狀，犕 犪犛 犺 狌 犿 犻 狀，犣 犺 狅 狌犡 犻 犪 狅犛 犖犜 犇
16、 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 狉 犻 犮 犺 犾 狅 狉 犳 狅 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犿 犲 犪 狋犪 狀 犱犿 犲 犪 狋狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱狅 犳 狋 犲 狊 狋 犻 狀 犵狋 狉 犻 犮 犺 犾 狅 狉 犳 狅 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀犿 犲 犪 狋犪 狀 犱犿 犲 犪 狋狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊犳 狅 狉犲 狓 狆 狅 狉 狋犫 狔犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋狅 犳 狋 狉 犻 犮 犺 犾 狅 狉 犳 狅 狀 犻 狀犮 犪 狀 狀 犲 犱狊 狋