1、中华 人 民 共和 国 国 家 标 准食用植物油煎炸过程中的极性组分 (P C)的测定方法G B/r 7 1 0 2.2 一 9 4Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f p o l a r c o mp o u d s i n e d i b l e v e g e t a b l e o i l s u s e d i n f r y i n g f o o d1 主题内容与适用范围 本标准规定了柱层析法测定食用煎炸油中的极性组分。本标准适用于煎炸各种食品的植物油、动物油及精炼油中的极性组分的测定。2 术语 极性组分:极性组分是食用油在煎
2、炸食品的工艺条件下发生劣变，发生了热氧化反应、热聚合反应、热氧化聚合反应、热裂解反应和水解反应，产生了比 正常植物油分子(甘油三酸醋)极性较大的一些成分，是甘油三酸酷的热氧化产物(含有酮基、醛基、翔基、过氧化氢基和梭基的甘油三酸醋)热聚合产物、热氧化聚合产物、水解产物(游离脂肪酸、一酸甘油醋和二酸甘油酷)的总称。3 原理 经过煎炸的油脂通过装有吸附了一定水分的硅胶柱时，在流动相的洗脱下，其中的甘油三酸醋(即经煎炸未改变的油脂)首先被洗脱而流出色谱柱。挥去洗脱剂，称量，即为非极性组分的质量，用上柱样品的质量减去非极性组分的质量就是极性组分的质量(即经煎炸后发生了化学变化的油脂)4 试剂4 门硅胶
3、(柱层析用):粒度范围6 0-1 0 0目，按下面的方法使其含水量约为 5 写;置硅胶于 1 6 0-C 烘箱中干燥2 4 h 后取出，置干燥器中冷却至室温，然后称取1 5 2 g 硅胶和8 g 水，放人5 0 0 m L带有玻璃塞的磨口锥形瓶中，机械震摇 1 h,密封备用。4.2 石油醚(沸程3 0-6 0 C)+乙醚洗脱剂:s 7+1 3(v/v)。4.3 海砂:通过锻烧和酸洗纯化。4.4 i o 0 o 铝磷酸乙醇溶液显色剂。4.5 高效薄层硅胶 G板(无荧光)。5 仪器 采用两种类型的层析柱，当实验室温度在2 5 以下 时，可采用A型(常用)层析柱;超过2 5 C 时，采用带有循环水套
4、的B型柱，见下图。中华人民共和国卫生部 1 9 9 4 一 0 1 一 2 4批准1 9 9 4 一 0 8 一 0 1 实施G B/T 7 1 0 2.2 一 9 4A型B型6 操作步骤6.1 样品制备 缓缓预热煎炸油样，充分混匀。如有杂质和水分可用滤纸过德除去。用一小烧杯精密称取抽样约2.5 g(准确至。.o f g)。定量转移至5 0 m L 容量瓶中，用洗脱液定容后备用。6.2 装柱 为了防止柱内起气泡，当实验室温度低于 2 5 时，采用A型柱，当实验室温度高于 2 5 时，采用B型柱。采用B型柱时冷却水可采用高位瓶法将用冰块调成约2 0 的水导入柱的夹套(如自来水温为2 0 左右也可
5、用自 来水)以保证柱的温度低于2 5 0C,先在柱的底部放少许玻璃棉后，把3 0 m L洗脱液加入柱中，如有气泡用玻璃棒搅拌赶掉气泡。在1 0 0 m L 烧杯中称取3 5 g 硅胶(4.1)和加入8 0 m L洗脱液(4.2)，用玻璃棒不停搅拌，尽量使硅胶悬浮起来，缓缓倒入垂直层析柱中，使均匀沉降，用少许洗脱液清洗漏斗和柱壁，沉降后放出洗脱液至硅胶面1 0 c m处，轻轻震摇，弄平硅胶，随后通过漏斗把4 g 海砂加到柱内，再放出洗脱液使其与海砂表面平齐。6.3 上柱 精确吸取制备油样2 0 m L(6.1),沿柱壁缓缓移到层析柱上(6.2)。打开旋塞使样液与海砂面平齐。6.4 非极性组分的洗
6、脱 把在1 0 3 士2 的烘箱中干燥过的4 0 0 m L烧杯置干燥器内冷却至室温并平衡3 0 m i n，在分析天平上称量其质量为。1，置柱下，加2 5 0 m L洗脱液(4.1)。洗脱速度约为2 m L/m i n，洗至液面与海砂面平齐，然后用少量洗脱液清洗旋塞以下的外壁，收集在质量为二 I 的烧杯中，为非极性组分。6.5 蒸发称重 把上述烧杯中的洗脱液置温度为9 0 的水中蒸发至干，然后精密称量其质量为。:。6.6 计算 x(%)=，一(m,一二，)/m x l o o式中:m上柱油样的质量，9;m,空杯质量，9;。:m,+非极性组分质量，9;X(I)极性组分含量。c B/T 7 1
7、0 2.2 一 9 4 附录A极性组分的洗脱与薄层层析监控 (参考件)极性组分能大部分洗脱，但由于其吸附性较强，所以不能1 0 0%的被洗脱，其与非极性组分的分离情况可用薄层层析监控。A 1 极性组分的洗脱 如果需要洗脱极性组分，在洗下非极性组分后，可再用1 5 0 m l,洗脱剂把极性组分洗入质量为二 3的烧杯中，如5.5 蒸发至干，然后精密称量其质量为m 4。可用下式计算极性组分的含量:X(0 a)=C m一(m;一m X/m X 1 0 0式中:m 3 空杯质量，9;M 4 m 3+极性组分，9;x(Y O极性组分。A 2 薄层色谱监控柱色谱 应用微量注射器把2 p L左右从柱上洗脱下来
8、的溶液轻轻点在离层析板下沿3 c m处，使其点样的直径不大于。.3 c m，等溶剂挥发后，置层析板于有展开剂(石油醚+乙 醚+乙酸，7 0+3 0+2)的层析槽中 展开约1 5 m i n(约离原点1 0 c m左右)取出层析板，挥散掉溶剂后用1 0 0 0 钥磷酸乙醇液均匀喷淋层析板，挥散乙醇，置1 2 0 -1 3 0 0C 烘箱中加热至斑点呈色，根据极性组分和非极性组分的分离程度(即:凡值)判断柱层析分离的好坏，薄层色谱分离图见图A l.:图A I 薄层色谱分离图卜一 煎炸后植物油的油样c 2 一非极性组分;3 一极性组分;4 一未经煎炸的植物油样附加说明:本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由吉林省卫生防病中心分析测试研究所负责起草。本标准主要起草人高斌富、于峰、李槐春、丁家华、张唯。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。