1、SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准S N/T 0 0 4 0 一 9 2出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)计数检验方法C o u n t m e t h o d f o r S a l m o n e l l a e(i n c l u d i n g A r i z o n a)i n f o o d f o r e x p o r t1 9 9 2 一 1 1 一 0 5 发布1 9 9 3 一 0 1 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布中华人民共和国进出 口商品检验行业标准出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)计数检验方法S N I T 0 0 4 0 一9
2、2C o u n t me t h o d f o r S a l mo n e l l a e(in c l u d i n g A r i z o n a)i n f o o d f o r e x p o r t主题内容与适用范围本标准规定了出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)定量检验的操作程序和结果判定.本标准适用于出口肉品、蛋品等食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)的定量检验，其他食品可参照使用。2 引用标准 Z B 8 出口 食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法3 设备和材料3.1 试管:2 0 m mX1 5 0 m m,1 3 m mX1 3 0 mm,3.2 三角瓶或广口瓶:
3、2 0 0 mL和 5 0 0 mL,3.3 平皿:直径9 0 m m,3.4 吸管:1 m L和 1 0 mL,3.5 剪子:1 6 c m3.6 镊子:1 6 c m,3.7 试管振荡器。3.8 均质器。3.9 恒a培养箱;3 7 和 4 2 C,3.1 0 玻璃珠:直径 5 mm,3.1 1 天 平:感量。.1 g,4 培养荃和试剂 配制 方法和试验方 法见Z B s 第5 章。4.1 缓冲蛋白陈水(B P),4.2 亚硒酸盐胧氨酸增菌液(S O.4.3 四硫磺酸盐煌绿增菌液(T T B),4.4 亚硫酸钮琼脂(B S),4.5 胆硫乳琼脂(D H L),4.6 亚利桑那菌琼脂(S A)
4、,4.7 三精铁琼脂(T S I),中 华人民 共和国国家进出口 商品检验局1 9 9 2-1 1-0 5 批准1 9 9 3 一 0 1 一 0 1 实施 IS N/T 0 0 4 0 一 9 28 赖氨酸脱狡酶培养基(L D),9 尿素酶琼A o(U).1 0 V-P半固体琼脂(VP),1 1 u 引 噪培养基(1),1 2 氰化钾培养基(K C N),1 3 丙二酸钠培养基(M),1 4 卫矛醇半固体琼脂(D),样 品制备和增菌月月月月Jq月月月 在以下方法中，一个样品为2 5 g，增菌液为2 2 5 m L，如果 将数个样品混合增菌，则相应增加培养基的量，使样品和培养基之比为 1，9,
5、5.1 冻 猪分割肉、冻猪下水、冻兔肉、冻牛肉、冻鸡、冻分割鸡:于4 5 0C 1 5 m i n 内 或2-5 C 1 8 h内 解冻.在表面部位取2 5 g 剪碎后放入均质杯内，加缓冲蛋白 陈水(B P)2 5 m L,8 0 0 0 r/m i n 均质1 m i n，用剩余的2 0 0 m L B P将 全部样品冲 洗到5 0 0 m L 三角瓶中，充分混合后作为1。一 的样品 液，如果均质杯的容量为 5 0 0 m L以上，可将 2 2 5 m L B P一次全部加入，均质后即为1 0 一的样品液，继续稀释成 1 0-,1 0-的样品液。分别取 1 m L 1 0-,1 0-2,1
6、0-的样品液，分别加人三组试管中，每组三支;3 6 士1 培养4-5 h后，每试管加入 9 mL四硫磺酸盐煌绿增菌液(T T B)，于 4 2 士1 培养 2 2 士2 h,5.2 新鲜肉 品:在 表面部位取2 5 g,剪碎后放入均质杯内，加亚硒酸盐肮氨酸增菌液(S C)2 2 5 m L，均质方法 和稀释方法同5.1 条。分别取 1 mL 1 0-,1 0-2,1 0-的样品液，分别加入三组装有 9 mL S C的试管中，每组三支，3 6 士1 0C培养2 2 士2 h,5.3 全蛋粉、蛋黄粉、干蛋白:取2 5 g，加到2 2 5 m L 缓冲 蛋白 陈水中，放置1 0 m i n 后用 玻
7、璃珠或 其他充分将其混合，也可用均质器均质，作为 1。一的样品液，继续稀释成 1 0-1,1 0 1.的样品液。分别取 1 mL 1 0-,1 0-1,1 0”的样品液，分别加人三组试管中，每组三支，3 6 士1 培养2 2 士2 h后各试管中 分别加入9 m L S C 于4 2 士1 培养2 2 士2 h,5.4 棉籽饼、芝麻饼、花 生饼、豆饼、骨粉、骨粒:取2 5 g，加到2 2 5 m L T T B中，振 荡5 m in，充分混合后作为1 0-，的祥品液，继续稀释成 1 0-1,1 0-1“二 的样品液。三个稀释度的 样品液分别取1 m L，分别加入三组装有9 m L T T B的试
8、管中，每组三支，3 6 士1 培养2 2 士2 h,5.5 如果估计样品中沙门氏菌数量少而需要增大接种量时，可将 5.1-5.4 条中工。一 的样品液分别取1 0 mL，放入三支试管中，再分别取 1 mL放入三支试管中，然后分别取 1。一的样品液 1 mL放人三支试管中，这祥就组成了一个样品量分别为1,0.1,0.0 1 g 的系列。6分离培 养按照 Z B 8 第 2 章进行。鉴定按照 Z B 8 第 3 章进行。报告结果8.1 统计三个稀释度的样品的沙门氏菌阳性管数.8.2 查MP N表 见附录A(补充件)，得到每克样品的沙门氏菌含量。s N/T 0 0 4 0 一 9 28.3 报告阳性
9、结果:MP N三管法测定沙门氏 菌 个/g(m L)，或“M P N三管法测定亚利桑那菌 个/g(m L)”或“M P N三管法测定沙门氏菌和亚利桑那菌 个/g(m L).8.4 如果所有三组管都为阴性，则报告:MP N三管法侧定沙门氏菌少于 个/g(m L)”或“MP N三管法测定亚利桑那菌少于 个/g(m L)”或“M P N三管法测定沙门氏菌和亚利桑那菌少于 个/g(m L),并注明所测定的三种样品液的样品含量。s N/T 0 0 4 0 一9 2 附录A 1 g 样品中沙门氏菌最近似值(MP N)表v.z (补充件)表A 1 1 g 样品中沙门氏菌最近 似数(MP N)表 接种量分别为
10、0.1 1 0.0 1 和0.0 0 1 g阳性管组合M PN阳性管组合M P N0 0 00 0 10 0 20 0 30 1 00 1 10 1 20 1 30 2 002I0 2 20 2 30 300 3 10 3 20 3 3 1 1 0 0注:1)本表采用 3 个稀释度仁。.1 g(mL),0.0 1 g(.1.)和。.0 0 1 州mL)l，每个稀释度接种 3 管2)表F9 所列检样量如改用 1 盯-L),0.1 g(mL)和。.O l(m1)时.表内数字应相应降低 1 0 倍I 如改用0.0 1 g (m L),0.0 0 1 郊mL)和。.0 0 0 1 g(.L)时，则表内数字应相应增加 1 0 倍.其余类推S N/T 00 40一 92 附录B出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)定t检验方法程序 (参考 件)以下按Z B s 标准进行鉴定，根据沙门氏菌阳性管数组合查附录A(MP N)表，报告结果.附加说明:本标准由中华人民 共和国国家进出口 商品检验局提出。本标准由中华人民共和国河南进出口商品检验局起草。本标准主要起草人李志培、沈莉。