1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口植物性产品中吡虫啉残留量的检测方法液相色谱串联质谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犻 犿 犻 犱 犪 犮 犾 狅 狆 狉 犻 犱狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀狆 犾 犪 狀 狋狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊 犳 狅 狉犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布前言本标准的附录和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国浙江出入境检验检疫局负责起草。本标准主
2、要起草人：谢文、丁慧瑛、蒋晓英、奚君阳、钱艳、黄雷芳。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 进出口植物性产品中吡虫啉残留量的检测方法液相色谱串联质谱法范围本标准规定了植物性产品中吡虫啉残留量的制样和液相色谱串联质谱测定方法。本标准适用于毛豆、西兰花、萝卜、板栗、大米、辣椒和茶叶中吡虫啉残留量的检测。方法提要用乙腈提取样品中吡虫啉，提取液再用弗罗里硅土和活性炭混合柱净化，液相色谱串联质谱测定和确证，外标法定量。试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。乙腈：高效液相色谱级。正己烷：高效液相色谱级。丙酮：高效液相色谱级。甲醇：高效液相色谱级。甲酸：高效液相色谱级。氯
3、化钠。活性炭：粒度 （目 目）。无水硫酸钠：灼烧，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。弗罗里硅土：粒度 （目 目）。灼烧，使用前 活化，在干燥器内冷却至室温，加的水脱活，备用。甲酸水溶液：甲酸溶解于 水中。丙酮正己烷（，体积比）。甲醇水（，体积比）。吡虫啉标准品（，）：纯度大于等于 。吡虫啉标准储备溶液：称取适量标准品（），用甲醇溶解，溶液浓度为 。冷藏保存。有效期个月。标准工作曲线工作液：根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成 、的混合标准工作溶液，当样品取样量为时，相当于样品中含有、吡虫啉。无水硫酸钠柱：（内径）筒形漏斗，底部垫脱脂棉，再装 无水硫酸钠。净化柱：（内径）玻璃柱，底部垫
4、约脱脂棉和约 无水硫酸钠，弗罗里硅土和 活性炭混匀装柱，顶端加约 无水硫酸钠，使用前用 正己烷预洗。仪器和设备 高效液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾离子源。旋转蒸发器。犛 犖犜 粉碎机。均质器。旋涡混合器。离心机：。氮吹仪。试样制备与保存 蔬菜、坚果从所取全部样品中取出有代表性样品约 ，取可食部分经捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，装入洁净容器内，一份作为试样，另一份作为留样，密封，标明标记，冰箱存放。茶叶、粮谷将所取全部样品缩分成 ，磨碎，通过孔径为 的筛（目），均分成两份，装入洁净的容器内，一份作为试样，另一份作为留样，密封，标明标记，室温存放。在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含
5、量的变化。测定步骤 提取 蔬菜、坚果、粮谷称取样品（精确到 ）置于 具塞离心管中，脱水蔬菜、粮谷加 水浸泡，加入 乙腈，以 均质，以 离心 ，将上层乙腈置另一个 离心管中，再加入 乙腈，重复上述操作，合并乙腈提取液，加入过量氯化钠振摇，以 离心 ，将上层乙腈提取液过无水硫酸钠柱（），收集于浓缩瓶中，再用 乙腈洗涤无水硫酸钠柱，在 下旋转蒸发至近干。茶叶称取试样（精确到 ）置于 具塞离心管中，加 水浸泡，加入 乙腈，以 均质，按 方法操作。净化用 丙酮分两次将残渣转移至净化柱中（），用 正己烷丙酮（，体积比）洗脱。收集全部洗脱液，在 以下水浴上减压浓缩至干，用甲醇水（，体积比）定容至 ，混匀，将
6、溶液通过 滤膜，供液相色谱串联质谱仪测定。测定 液相色谱串联质谱条件）色谱柱：柱，（内径）或相当者；）流动相见表；表流动相梯度洗脱时间 乙腈 甲酸水溶液 ）流速：；）进样量：；犛 犖犜 ）离子源：电喷雾离子源；）扫描方式：正离子扫描；）检测方式：多反应监测；）雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件参见附录；）监测离子对（）：吡虫啉 （定量离子）、。高效液相色谱串联质谱测定根据试样中被测样液的含量情况，选取待测物的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定，如超出仪器线性响应范围应进行稀释。在上述色谱条件下吡虫啉的参考保留时间约为 ，
7、标准溶液的选择性离子流图参见附录中图。空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。液相色谱串联质谱确证按照液相色谱串联质谱条件测定样品和标准工作溶液，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中待测物质的保留时间偏差在 之内。定量测定时采用标准曲线法。定性时应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 结果计算和表述用色谱数据处理机或按式（）计算试样中吡虫啉残留含量，计算结果需扣除空白值：犡犮犻犞犿（）式中：犡 试样中吡虫啉的残留量，单位为毫克每千克（）；犮犻 从标准曲线
8、上得到的吡虫啉溶液浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 样液最终定容体积，单位为毫升（）；犿 最终样液代表的试样质量，单位为克（）。测定低限（犔 犗 犙）和回收率 测定低限（犔 犗 犙）茶叶测定低限为 ，毛豆、西兰花、萝卜、板栗、大米、辣椒测定低限为 。回收率回收率的实验数据（在不同添加浓度范围内）见表：表吡虫啉在不同基质中回收率范围基质添加浓度（）回收率范围毛豆 犛 犖犜 表（续）基质添加浓度（）回收率范围西兰花 萝卜 板栗 大米 辣椒 茶叶 犛 犖犜 附录犃（资料性附录）犃 犘 犐 犔 犆 犕 犛犕 犛系统电喷雾离子源参考条件）监测离子对及电压参数：）电喷雾电压（）：；）雾化气压力（）：（）；）
9、气帘气压力（）：（）；）辅助气流速（）：（）；）离子源温度（）：；）碰撞气（）（）；）离子对、去簇电压（）、碰撞气能量（）及碰撞室出口电压（）见表。表犃 离子对、去簇电压（犇 犘）、碰撞气能量（犆 犈）及碰撞室出口电压（犆 犡 犘）待测物离子对去簇电压（）碰撞气能量（）碰撞室出口电压（）吡虫啉 为定量离子对。）非商业性声明：附录表 所列参数是在 质谱仪完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。犛 犖犜 附录犅（资料性附录）吡虫啉标准品选择性离子流图图犅 吡虫啉（狀 犵犿 犔）标准品的选择性离子流图犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅
10、狉 犱犃 狀 狀 犲 狓犃犪 狀 犱犃 狀 狀 犲 狓犅狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱 犻 狊狌 狀 犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲 犱狅 犳 犮 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犪 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀犪 犱 犿 犻 狀 犻 狊 狋 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻
11、 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犣 犺 犲 犼 犻 犪 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犠犲 狀犡 犻 犲，犎 狌 犻 狔 犻 狀犇 犻 狀 犵，犡 犻 犪 狅 狔 犻 狀犑 犻 犪 狅，犑 狌 狀 狔 犪 狀 犵犡
12、犻，犢 犪 狀犙 犻 犪 狀，犔 犲 犻 犳 犪 狀 犵犎 狌 犪 狀 犵 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪狆 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犳 狅 狉犲 狀 狋 狉 狔 犲 狓 犻 狋 犻 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲狆 狉 狅 犿 狌 犾 犵 犪 狋 犲 犱犳 狅 狉 狋 犺 犲犳 犻 狉 狊 狋 狋 犻 犿 犲 犖 狅 狋 犲：犜 犺 犻 狊犈 狀 犵 犾 犻 狊 犺犞 犲 狉 狊 犻 狅 狀，犪 狋 狉 犪 狀 狊 犾 犪 狋 犻 狅 狀犳 狉 狅 犿狋 犺 犲犆 犺
13、 犻 狀 犲 狊 犲狋 犲 狓 狋，犻 狊狊 狅 犾 犲 犾 狔犳 狅 狉犵 狌 犻 犱 犪 狀 犮 犲 犛 犖犜 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犻 犿 犻 犱 犪 犮 犾 狅 狆 狉 犻 犱狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀狆 犾 犪 狀 狋狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊 狋 犺 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊狅 犳 狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋
14、 犻 狅 狀犪 狀 犱犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犫 狔犔 犆 犕 犛犕 犛狅 犳 犻 犿 犻 犱 犪 犮 犾 狅 狆 狉 犻 犱狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀狆 犾 犪 狀 狋狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犻 犿 犻 犱 犪 犮 犾 狅 狆 狉 犻 犱犻 狀犵 狉 犲 犲 狀狊 狅 狔 犫 犲 犪 狀 狊，犫 狉 狅 犮 犮 狅 犾 犻，狉 犪 犱 犻 狊 犺，犮 犺 犲 狊 狋 狀 狌 狋，狉 犻 犮
15、 犲，狆 犻 犿 犻 犲 狀 狋 狅犪 狀 犱狋 犲 犪 犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲犐 犿 犻 犱 犪 犮 犾 狅 狆 狉 犻 犱犻 狊犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犲 犱 犳 狉 狅 犿狋 犺 犲狊 犪 犿 狆 犾 犲犫 狔犪 犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲 犐 狋 犻 狊 犮 犾 犲 犪 狀 犲 犱狌 狆狑 犻 狋 犺犿 犻 狓 狋 狌 狉 犲 犳 犾 狅 狉 犻 狊 犻 犾 犪 狀 犱犪 犮 狋 犻 狏 犲犮 犺 犪 狉 犮 狅 犪 犾 犮 狅 犾 狌 犿 狀 犉 犻 狀 犪 犾 犾 狔 犻 狋 犻 狊犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犲 犱犪 狀 犱犮 狅 狀 犳 犻
16、狉 犿 犲 犱犫 狔犔 犆 犕 犛犕 犛 犈 狓 狋 犲 狉 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犿 犲 狋 犺 狅 犱犻 狊狌 狊 犲 犱 犚 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狊犪 狀 犱犿 犪 狋 犲 狉 犻 犪 犾 狊犝 狀 犾 犲 狊 狊狅 狋 犺 犲 狉 狑 犻 狊 犲狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 犱，犪 犾 犾 狋 犺 犲 狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狌 狊 犲 犱狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾 犵 狉 犪 犱 犲，“狑 犪 狋 犲 狉”犻 狊犱 狅 狌 犫 犾 犲犱 犻 狊 狋 犻 犾 犾 犲 犱狑 犪 狋 犲 狉 犃 犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲：犎 犘 犔 犆犵 狉 犪 犱 犲 狀 犺 犲 狓 犪 狀 犲：犎 犘 犔 犆犵 狉 犪 犱 犲 犃 犮 犲 狋 狅 狀 犲：犎 犘 犔 犆犵 狉 犪 犱 犲 犕 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾：犎 犘 犔 犆犵 狉 犪 犱 犲 犉 狅 狉 犿 犻 犮犪 犮 犻 犱：犎 犘 犔 犆犵 狉 犪 犱 犲 犛 狅 犱 犻 狌 犿犮 犺 犾 狅 狉 犻 犱 犲 犃 犮 狋 犻 狏 犲犮 犺