1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 甘油含量的测定高效液相色谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 犻 狀犵 犾 狔 犮 犲 狉 犻 狀 犲犎 犻 犵 犺狆 犲 狉 犳 狅 狉 犿 犪 狀 犮 犲 犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准的附录、附录、附录是资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准起草人：孙敦伟、吴晓红、张琳、邵敏。本标准系首次发布
2、的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 甘油含量的测定高效液相色谱法范围本标准规定了甘油含量的液相色谱测定方法。本标准适用于不同含量规格的皂化甘油和合成甘油含量的测定。本标准也适用于定性鉴别掺有乙二醇、二甘醇、三甘醇和山梨醇等为主要原料的甘油替代品。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。分析实验室用水规格和试验方法（：，）方法提要本方法采用氨基键合柱、反相色谱分离法，在备
3、有示差折光检测器（）的高效液相色谱仪上，用外标法进行定量测定。试剂和材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂，实验所用水应符合 中一级水要求。乙腈：级。流动相：乙腈水，（犞犞）。甘油标准品：已知含量。针头式尼龙质过滤器：，直径。尼龙质或再生纤维素质过滤膜：，直径。仪器 高效液相色谱仪。检测器：示差折光检测器，并带有致冷热柱温箱。色谱柱：柱，（），或相当者。超声仪。容量瓶，和 。分析天平，感量 。液体称量瓶，。色谱操作条件 流动相：乙腈水，（犞犞）（），在线脱气或经当天预先脱气；流速：；柱温：；温度：；进样量：，用流动相洗针。犛 犖犜 注：上述液相色谱条件系通用的操作参数，可根据不同仪器的特点，对给定
4、操作参数作适当调整，以期获最佳分离效果。附录提供了“”系统和“”系统的典型色谱条件。有关甘油与甘醇及山梨醇的液相色谱法定性鉴别试验参见附录。测定步骤 标准溶液的配制称取甘油标准品（）约（精确至 ），置于 容量瓶中，用流动相（）稀释至刻度，摇匀后在超声波水浴中超声约 。于存放，有效期半年。试样溶液的配制称取含相当于标准品约 的试样（精确至 ），置于 容量瓶中，用流动相（）稀释至刻度，摇匀后在超声波水浴中超声 。经 针头式尼龙质过滤器（）过滤。测定在上述操作条件下，用流动相平衡系统，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针峰面积响应值的重复性，待相邻两针的峰面积响应值变化小于 时，则可测定样品
5、。丙三醇的液相色谱图参见附录的图。结果计算按式（）计算样品中丙三醇的含量犢，以质量分数计，单位为克每千克（）：犢犃样犿标犘犃标犿样（）式中：犢 样品中丙三醇的含量，以质量分数计，单位为克每千克（）；犃标 两针标样溶液中丙三醇峰面积的平均值；犃样 两针试样溶液中丙三醇峰面积的平均值；犿标 丙三醇标样的质量，单位为克（）；犿样 样品的质量，单位为克（）；犘 丙三醇标样的含量，单位为克每千克（）。精密度在个实验室，对个规格水平的试样进行方法精密度试验，结果见表。表方法精密度单位：甘油规格重复性再现性水平（质量分数）犛狉 犛犚犚 犛 犖犜 附录犃（资料性附录）“犃 犵 犻 犾 犲 狀 狋 犌 犃”系统
6、和“犠 犪 狋 犲 狉 狊 ”系统的典型色谱条件犃“”系统的色谱条件：流动相：乙腈水，（犞犞）预配；当天在负压 下，抽滤脱气遍；然后超声 ，并打开在线脱气装置；流速：；柱温：；温度：；环境温度：（最佳），最好低于（室温变化不超过）；进样量：，用流动相洗针；保留时间：甘油（丙三醇），约 ；总检测时间：约 ：积分模式设定：斜率（）：，峰宽：，最小积分面积（）：；流动相流出口回收瓶放置位置：须高于 位置；检测前系统平衡准备：平衡不少于 第一个 ：下，打开 淋洗装置；第二、三、四个 ：（正常流速）下，关闭 淋洗装置，待 基线稳定呈直线后，连续进数针，至峰面积的 。犃“”系统的色谱条件：流动相：配比不变
7、，仅须预配；不必预脱气，其在线脱气至 （）；流速、柱温、温度、总检测时间：同 中的相应条件；环境温度：不限；进样量：，用流动相洗针；积分模式设定：阈值（）：，峰宽：，禁止积分；流动相流出口高度：无要求；检测前平衡。待 基线稳定呈直线后，连续进数针，至峰面积的 。注：上述液相色谱操作条件系典型操作参数，可根据不同仪器的特点，对给定操作参数作适当调整，以期获最佳效果。丙三醇的液相色谱图参见附录的图。注：“”系统实际应用操作时，温度应高于环境温度，高于柱温。犃 在标准正文部分色谱条件下，当峰底宽大于 时，可能会影响检验精度和结果，应考虑柱净化或换柱。犃 键 合 固 定 相 柱 在 此 反 相 条 件
8、 下 使 用 之 前，最 好 采 用 四 氢 呋 喃（）作 流 动 相、在 下预处理。或采用 柱。犃 参考标准样的来源与制备：采用高含量皂化药用甘油作为标准样品来源，丙三醇含量定值方法可以是：“毛细管气相色谱法（）法 测 水 分（）”相 结 合 的“杂 质 倒 扣 法”，或“密 度 法”（）。犛 犖犜 附录犅（资料性附录）甘油与甘醇及山梨醇的液相色谱法定性鉴别试验犅 方法提要样品用流动相稀释后，用氨基键合柱、反相色谱分离法，在备有示差折光检测器（）的高效液相色谱仪上，采用标准参照样保留时间定位法定性检出。其中，甘油的检测低限为：。注：甘油与甘醇的气相色谱定性鉴别方法（及醇类的系列定性鉴别方法）
9、：可采用 中的附录（定性检出试验 毛细管气 相 色 谱 法）。其 中，乙 二 醇、二 甘 醇、甘 油 和 三 甘 醇 四 者 的 检 测 低 限 分 别 为：、。犅 试剂和材料犅 水；犅 乙腈：同；犅 流动相：同；犅 甘油：分析纯；犅 有关醇类的定性参比样品：乙二醇、二甘醇、三甘醇、山梨醇，分析纯；犅 针头式尼龙质过滤器：同；犅 尼龙质或再生纤维素质过滤膜：同。犅 仪器 ：同 。犅 测定步骤犅 试样溶液制备称取约 的试样（精确至 ），置于 容量瓶中，用流动相（）稀释至刻度，摇匀后在超声波水浴中超声 。使用前通过 针头式尼龙质过滤器（）过滤。犅 测定犅 色谱条件流速：或 ；保留时间：甘油（丙三醇
10、），约 或 ；总检测时间：约 或 ；其余同。犅 测定用定性参比样品定位法确定各组分的保留时间。参考色谱图见附录中图 和图。犛 犖犜 附录犆（资料性附录）典型色谱图 水峰 乙 二 醇二 甘 醇三甘醇 甘油（丙三醇）山梨醇图 犆 犿 犔犿 犻 狀定性分离色谱图 水峰 乙二醇二甘醇三甘醇 甘油（丙三醇）图 犆 犿 犔犿 犻 狀定性分离色谱图 甘油（丙三醇）图 犆 甘油定量色谱图犛 犖犜 书书书犜犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准甘油含量的测定高效液相色谱法 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街 号邮政编码：网址 电话：中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数 千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号：定价 元