1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口食品中十三吗啉残留量的测定液相色谱 质谱 质谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 狉 犻 犱 犲 犿 狅 狉 狆 犺狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准的附录 和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准负责起草单位：中华人民共和国河北出入境检验检疫局。本标准主要起草人：艾连峰、
2、王凤池、段文仲、郭春海、陈瑞春、李玮。犛 犖犜 进出口食品中十三吗啉残留量的测定液相色谱 质谱 质谱法范围本标准规定了进出口食品中十三吗啉残留量的液相色谱 质谱质谱测定方法。本标准适用于苹果、菠菜、姜、小麦、花生、牛肉、鸡肝、鱼肉、大豆、蜂蜜、奶和茶叶中十三吗啉残留量的检测和确证。方法提要样品中的分析物用乙酸乙酯或乙腈 乙酸乙酯提取，提取液浓缩后经石墨化炭黑氨基固相萃取柱或凝胶色谱净化后，用液相色谱 质谱质谱测定，外标法定量。试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水。乙腈，高效液相色谱级。甲醇，高效液相色谱级。乙酸乙酯。环己烷。甲苯。乙腈 乙酸乙酯（，体积比）：等体积的乙腈和乙酸乙
3、酯互溶。乙腈 甲苯（，体积比）：取 乙腈和 甲苯，混合均匀。乙酸乙酯 环己烷（，体积比）：等体积的乙酸乙酯和环己烷互溶。甲酸水溶液：取 甲酸，用水于定容至，混匀。标准品：十三吗啉（，编号：）纯度大于等于。标准储备液：精确称取适量标准品，用乙腈配制成 的标准储备液。此溶液 冷冻保存。标准工作液：取适量标准储备液（）用乙腈配制成浓度为 的标准工作液，此溶液 冷冻保存。石墨化碳黑柱氨基柱组合柱：，；或 石 墨 化 碳 黑 柱（，）与 氨 基柱（，）按照从上到下串联使用，使用前用 乙腈 甲苯（）活化。有机滤膜。仪器和设备 高效液相色谱质谱质谱仪：配有电喷雾离子源（）。凝胶色谱仪。分析天平：感量为 ，。
4、均质器。离心机。氮吹仪。犛 犖犜 旋转蒸发仪。具塞离心管，。比色管，。样品制备和保存 样品制备 水果、蔬菜、坚果水果、坚果去皮或核，取可食部分约 ，用粉碎机粉碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于 冰箱内保存。粮谷、大豆、茶叶取样品约 ，用粉碎机粉碎至全部通过 目筛，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，室温保存。肉类及水产品取样品中有代表性的可食部分约 ，用粉碎机粉碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于 冰箱内保存。蜂蜜取有代表性样品约 ，未结晶样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出样品可将样品瓶盖塞紧后，置于不超过 的水浴中，待样品全部溶化后搅匀，迅速冷却至室温。制备好的样品装入洁净
5、容器内密封并做好标识，室温保存。奶取代表性样品约 装入洁净容器作为试样，密封置下保存，并标明标记。制样要求制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取 苹果、菠菜、姜和小麦称试样约（精确到 ）于 离心管中，加入 乙酸乙酯，均质提取 ，离心 ，将上清液转移至 比色管中。用 乙酸乙酯重新提取残渣一次，合并提取液于同一比色管中，并用乙酸乙酯定容至 。牛肉、鸡肝、鱼肉、奶、大豆、花生称取试样约（精确到 ）于 离心管中，加 乙腈 乙酸乙酯（），均质提取 ，离心 ，将上清液转移至 比色管中。用 乙腈 乙酸乙酯（）重新提取残渣一次，合并提取液于同一比色管中，并用乙酸乙酯定容至 。蜂
6、蜜称试样约（精确到 ）于 离心管中，加入 水振摇溶解，然后加入 乙酸乙酯，均质提取 ，离心 ，将上清液转移至 比色管中。用 乙酸乙酯重新提取残渣一次，合并提取液于同一比色管中，并用乙酸乙酯定容至 。茶叶称取试样约（精确到 ）于 锥形瓶中，准确加入 甲醇，均质提取 ，静置，取 过膜供液相色谱质谱质谱分析。净化 石墨化炭黑柱氨基柱组合柱净化对于水果、蔬菜、粮谷、蜂蜜样品，准确量取 提取液于 氮吹至干。然后用 乙腈犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m甲苯（）溶解残渣两次，将溶解液转移到预洗过的石墨化炭黑氨基柱上的贮液器中，打开活塞，以约 流速滴下，并接收于鸡心瓶中。然后用 乙腈 甲苯
7、（）淋洗柱子，洗脱液一并接收于鸡心瓶中。将净化后的洗脱液在 下用旋转蒸发仪蒸干，加入 甲醇定容，过膜后供液相色谱 质谱质谱分析。凝胶色谱净化 凝胶色谱仪参考条件）净化柱：填料，（内径），或相当者；）流动相：乙酸乙酯 环己烷（），流速：；）定量环：；）净化程序：弃去洗脱液，收集洗脱液。凝胶色谱净化程序对于畜、禽、水产品、奶、大豆、花生样品采用凝胶色谱净化。取 提取液 氮吹至干，用乙酸乙酯 环己烷（）定容至 的玻璃试管中，按 条件净化。净化后将收集的洗脱液蒸干，用 甲醇溶解，过 滤膜供液相色谱 质谱质谱分析。测定 液相色谱参考条件）色谱柱：（内径），粒度，或相当者；）色谱柱温度：；）进样量：；）流
8、动相：甲酸水溶液（）乙腈（，犞犞）；）流速：。质谱条件）离子化模式：电喷雾正离子模式（）；）质谱扫描方式：多反应监测（）；）其他参考质谱条件参见附录 中的表 。液相色谱 质谱质谱测定 定性测定选择个母离子，个以上子离子，在相同试验条件下，样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准校准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。表定性确证时相对离子丰度的最大允许误差相对离子丰度（基峰）允许的相对误差 定量测定根据样液中被测物的含量情况，选定响应值相近的标准工作液。标准工作溶液和样液中分析物的响应值均应在仪器的检测线性范围内。对标准
9、工作溶液和样液等体积参差进样测定。在上述仪器条件下，十三吗啉的参考保留时间约为 ，标准色谱图参见附录。空白试验除不加样品外，按上述相同条件和步骤进行。结果计算和表述试样中的残留含量按式（）计算，计算结果需扣除空白值：犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m犡犃犮犞犃犿（）式中：犡 试样中被测组分残留量，单位为微克每千克（）；犃 测定液中被测组分的峰面积；犮 标准工作溶液中被测组分浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 样品溶液最终定容体积，单位为毫升（）；犃 标准液中被测组分的峰面积；犿 样品溶液所代表最终试样的质量，单位为克（）。测定低限和回收率 测定低限本方法的测定低限：苹果、菠菜、姜
10、、大豆、小麦、牛肉、鸡肝、鱼肉、奶和蜂蜜为；茶叶为 。回收率在不同基质，四个不同添加水平的回收率范围见表。表不同基质十三吗啉添加回收率基质添加水平（）回收率苹果 菠菜 姜 小麦 花生 犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m表（续）基质添加水平（）回收率大豆 牛肉 鸡肝 鱼肉 蜂蜜 奶 茶叶 （）（）（）（）犛 犖犜 w w w.b z f x w.c o m附录犃（资料性附录）参考质谱条件）参考质谱条件：）鞘气压力：（）；）辅助气压力：（）；）正离子模式电喷雾电压（）：；）毛细管温度：；）源内诱导解离电压：；）分辨率为，分辨率为；）碰撞气：高纯氩气；）碰撞气压力：；）其他质谱参数
11、见表 。表 犃 被测物的参考保留时间、监测离子对和裂解能量分析物保留时间 检测离子对（）裂解能量 十三吗啉 为定量离子对，对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。）非商业性声明：附录所列参考质谱条件是在 型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛 犖犜 附录犅（资料性附录）标准物质多反应监测质量色谱图）图 犅 十三吗啉标准物质多反应监测质量色谱图犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犃 狀 狀 犲 狓犃犪 狀 犱犃 狀 狀 犲 狓犅狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻
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