1、ICS13.060C 51DB37山东省地方标准DB37/T 41462020水质联苯胺的测定固相萃取-液相色谱-串联质谱法Water qualityDetermination of benzidineSolid phase extraction-Liquid chromatography-Tandem mass spectrometry2020 - 09 - 25发布2020 - 10 - 25实施山东省市场监督管理局发布DB37/T 41462020目次前言II1范围12规范性引用文件13方法原理14试剂和材料15仪器和设备26样品27分析步骤28结果计算与表示49精密度和准确度410质量
2、保证和质量控制5前言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由山东省住房和城乡建设厅提出并组织实施。本标准由山东省城镇给水排水标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省城市供排水水质监测中心、国家城市供水水质监测网武汉监测站、国家城市供水水质监测网杭州监测站、国家城市供水水质监测网青岛监测站、山东省分析测试中心、中国兵器工业集团第五三研究所。本标准主要起草人：宋艳、贾瑞宝、孙韶华、赵清华、刘莉、许燕、李世蔚、张立亚、王晓芳、赵汝松、王晓利、高岩立、冀克俭、潘慧慧、黄允河。水质联苯胺的测定固相萃取-液相色谱-串联质谱法警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在
3、的危害，应尽量避免与这些化学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具,避免接触皮肤和衣物。1 范围本标准规定了测定生活饮用水及其水源水中联苯胺的固相萃取-液相色谱-串联质谱法。本标准适用于生活饮用水及其水源水中联苯胺的测定。取水样500mL，浓缩倍数为125倍时，本标准测定联苯胺的方法检出限为0.010g/L，测定下限为0.040g/L。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 5750.2-2006生活饮用水标准检验
4、方法 水样的采集与保存GB/T 5750.3-2006生活饮用水标准检验方法 水质分析质量控制GB/T 32465化学分析方法验证确认和内部质量控制要求GB/T 33087仪器分析用高纯水规格及试验方法HJ/T 91地表水和污水监测技术规范HJ/T 164地下水环境监测技术规范3 方法原理本方法采用固相萃取柱对水中的联苯胺进行富集，经甲醇洗脱后，进入液相色谱分离后串联质谱检测，根据保留时间、碎片离子质荷比定性，外标法定量测定。4 试剂和材料4.1 固相萃取柱：HLB（6mL，200mg）或等效固相萃取柱。4.2 高纯水：水质满足GB/T 33087的规定。4.3 甲醇：色谱纯。4.4 氮气：纯
5、度99.999%。4.5 乙酸铵：分析纯。4.6 硫代硫酸钠：分析纯。4.7 联苯胺标准溶液：=100mg/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。4.8 标准使用液：=1.0mg/L。取1000L联苯胺标准溶液（4.7），用甲醇（4.3）稀释并定容至100mL，配制1.0mg/L标准使用液。于4以下冷藏密封避光保存。4.9 乙酸铵-水溶液：c =10.0mmol/L。称取0.7708g乙酸铵（4.5）用高纯水（4.2）溶解并定容至1L。4.10 硫代硫酸钠溶液：用硫代硫酸钠（4.6）、高纯水（4.2）配制，浓度为5g/L。5 仪器和设备5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2 色谱柱：C
6、18柱或其他等效色谱柱。5.3 固相萃取装置。5.4 棕色样品瓶：2mL。5.5 容量瓶：100mL。5.6 采样瓶：1L4L棕色玻璃瓶，螺旋盖（具聚四氟乙烯涂层的密封垫）。5.7 微量注射器：100L和1000L。6 样品6.1 样品采集与保存按照HJ/T 91和HJ/T 164的相关规定采集样品。用采样瓶（5.6）采集样品。按照GB/T 5750.22006的相关规定贮存样品。样品采集后在4下冷藏避光保存，24h内完成前处理，5d内完成样品分析。若水样中存在残留氯，加入硫代硫酸钠溶液（4.10）去除余氯。6.2 试样制备6.2.1 活化依次用10mL甲醇（4.3）和10mL高纯水（4.2）
7、活化固相萃取柱（4.1）。6.2.2 样品富集量取500mL水样，以10mL/min流速通过活化后的固相萃取柱，完成固相萃取富集。注： 富集所用水样体积根据水样实际情况可适当增减；不同型号的自动固相萃取仪或手动固相萃取仪，按照各自型号仪器或手动进样操作规程进行萃取。6.2.3 淋洗用5mL高纯水（4.2）以10mL/min流速淋洗萃取柱，淋洗完成后用氮气吹干。6.2.4 洗脱用4mL甲醇（4.3）以1mL/min流速洗脱吸附在固相萃取柱上的被测组分，收集洗脱液至浓缩管中，并用甲醇（4.3）定容至4mL，取1mL上机测定。6.3 空白试样制备用高纯水（4.2）代替样品，按照与样品（6.2）相同的
8、步骤制备空白试样。7 分析步骤7.1 液相色谱条件7.1.1 流动相：A相甲醇（4.3）、B相10mmol/L乙酸铵-水溶液（4.9）。7.1.2 洗脱模式及洗脱流速：采用等度洗脱，流动相为A:B= 98:2（V:V），洗脱速率为0.3mL/min。7.1.3 柱温：30。7.1.4 进样体积：10L。7.2 质谱条件7.2.1 离子源：电喷雾离子源，正离子模式。7.2.2 离子源温度：350。7.2.3 扫描方式：MRM，多反应监测条件见表1。表1 质谱参考参数设置物质名称母离子子离子碎裂电压V碰撞电压V联苯胺185167*13029151*30注： 带*为定量离子，带*为定性离子。7.3
9、校准曲线的绘制7.3.1 本方法使用外标法定量。7.3.2 校准系列的配制：分别取5L、25L、50L、100L、150L、200L、250L标准使用液（4.8），用甲醇（4.3）定容至1mL，配制成浓度分别为5g/L、25g/L、50g/L、100g/L、150g/L、200g/L、250g/L校准系列溶液，保存在2mL棕色样品瓶（5.4）中待上机测试。7.3.3 将校准系列溶液按浓度由低到高的顺序依次进样，以校准系列浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制校准曲线。7.4 试样测定7.4.1 采用自动进样器进样，进样量为10L。7.4.2 将6.2处理后的试样上机测定。注： 若样品中联苯胺浓度超
10、出校准曲线最高点，用甲醇（4.3）稀释后测定。7.4.3 联苯胺MRM色谱图见图1所示。图1 联苯胺MRM色谱图7.5 空白试验按照与试样测定（7.4）相同的步骤进行空白试样（6.3）的测定。8 结果计算与表示8.1 定性结果根据联苯胺MRM色谱图中的保留时间和特征离子对进行定性分析。8.2 定量结果根据定量离子的峰面积外标法定量。由校准曲线得到样品中待测物的浓度x按照公式（1）计算，测定结果位数的保留与测定下限一致，最多保留三位有效数字。x =(1)式中：x 样品中组分质量浓度，单位为微克每升（g/L）；0 固相萃取洗脱液质量浓度，单位为微克每升（g/L）；Vt 固相萃取洗脱液浓缩后定容体积
11、，单位为毫升（mL）；Vs 水样体积，单位为毫升（mL）。9 精密度和准确度9.1 精密度4家实验室分别测定浓度为0.08g/L1.00g/L的高纯水加标样品。实验室内相对标准偏差为0.9%14%；实验室间的相对标准偏差为8.0%12%。9.2 准确度4家实验室分别测定地表水、地下水及生活饮用水加标样品。加标浓度为0.08g/L1.00g/L，其加标回收率为72.1%117%。10 质量保证和质量控制10.1 空白试验每批次样品应做空白试验，测定结果不能超过方法的检出限。10.2 校准曲线要求分析样品之前，应建立能够覆盖样品浓度范围的至少6个浓度点的校准曲线，曲线的相关系数r2应大于0.995。10.3 平行样平行双样测定结果的相对偏差满足GB/T 5750.32006的要求。10.4 基体加标基体加标样品的加标回收率范围满足GB/T 32465的要求。_7