1、ICS13.060C 51DB37山东省地方标准DB37/T 41592020水质苦味酸的测定液相色谱-串联质谱法Water qualityDetermination of trinitrophenolLiquid chromatography-Tandem mass spectrometry2020 - 09 - 25发布2020 - 10 - 25实施山东省市场监督管理局发布DB37/T 41592020目次前言II1范围12规范性引用文件13方法原理14试剂和材料15仪器和设备26样品27分析步骤28结果计算与表示39精密度与准确度410质量保证和质量控制4前言本标准按照GB/T 1.1
2、2009给出的规则起草。本标准由山东省住房和城乡建设厅提出并组织实施。本标准由山东省城镇给水排水标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省城市供排水水质监测中心、山东珞珈计量检测有限公司、济南市疾病预防控制中心、国家城市供水水质监测网青岛监测站、山东省分析测试中心、中国兵器工业集团第五三研究所。本标准主要起草人：孙韶华、贾瑞宝、王明泉、赵清华、辛晓东、宋艳、刘莉、刘仲、王晓芳、赵汝松、高岩立、冀克俭、王晓利、梁玉、刘岚铮。4水质苦味酸的测定液相色谱-串联质谱法警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在的危害，应尽量避免与这些化学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操
3、作时应按规定要求佩戴防护器具,避免接触皮肤和衣物。1 范围本标准规定了测定生活饮用水及其水源水中苦味酸的液相色谱-串联质谱法。本标准适用于生活饮用水及其水源水中苦味酸的测定。进样量10L时，本标准的方法检出限为1g/L，测定下限为4g/L。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 5750.22006生活饮用水标准检验方法水样的采集与保存GB/T 5750.32006生活饮用水标准检验方法水质分析质量控制GB/T 32465化学分析方法验证确认和内部质
4、量控制要求GB/T 33087仪器分析用高纯水规格及试验方法HJ/T 91地表水和污水监测技术规范HJ/T 164地下水环境监测技术规范3 方法原理样品经0.22m针头过滤器过滤后直接进样，经液相色谱仪分离后进入串联质谱仪，采用多反应监测（MRM）模式，根据保留时间和特征离子峰进行定性分析，外标法定量分析。4 试剂和材料4.1 载气：高纯氮，纯度99.999%。4.2 高纯水：水质应满足GB/T 33087的规定。4.3 甲醇：色谱纯。4.4 苦味酸标准溶液：=100mg/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。4.5 一次性针头过滤器：0.22m，聚四氟乙烯（PTFE）材质。4.6 一次性注射器：2.
5、5mL。4.7 标准贮备液的制备：=10.0mg/L。取1.00mL苦味酸标准溶液（4.4），用高纯水（4.2）稀释并定容至10mL，配制10.0mg/L苦味酸标准贮备液。于4以下冷藏密封避光保存。4.8 标准使用液的制备：=1.00mg/L。取1.00mL苦味酸贮备液（4.7），用高纯水（4.2）稀释并定容至10mL，配制1.00mg/L苦味酸标准使用液。于4以下冷藏密封避光保存。5 仪器和设备5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2 色谱柱：C18色谱柱（3.5m，2.1mm100mm）或其他性能等效的色谱柱。5.3 样品瓶：玻璃瓶，2mL。5.4 容量瓶：10mL。5.5
6、采样瓶：棕色玻璃瓶，具有玻璃塞。5.6 微量注射器：100L和1000L。6 样品6.1 样品的采集和保存按照HJ/T 91和HJ/T 164的相关规定采集样品。用采样瓶（5.5）采集样品。按照GB/T 5750.22006的相关规定保存样品。样品采集后在4以下冷藏保存，24h内完成水样过滤处理并上机测试。若水样中存在残留氯，加入抗坏血酸去除余氯。6.2 试样制备将水样经一次性针头过滤器（4.5）过滤后，置于进样瓶中，待测。如水样浓度较高或基体复杂，可将样品适当稀释后，再经过一次性针头过滤器过滤。6.3 空白试样制备用高纯水（4.2）代替样品，按照与试样制备（6.2）相同的步骤制备空白试样。7
7、 分析步骤7.1 色谱分析条件7.1.1 流动相：A相高纯水（4.2），B相甲醇（4.3），A:B=10:90（V:V），等度洗脱。7.1.2 流速：0.25mL/min。7.1.3 柱温：30。7.1.4 进样体积：10L。7.2 质谱分析条件7.2.1 离子源：电喷雾离子源，负离子模式。7.2.2 离子源温度：350 。7.2.3 扫描方式：MRM，多反应监测条件见表1。表1 苦味酸的ESI-MS/MS质量条件参数中文名母离子m/z子离子m/z碎裂电压V碰撞能V苦味酸228197.91098181.9109127.3 校准曲线的绘制7.3.1 本方法使用外标法定量。7.3.2 校准系列的配
8、制：取6个10mL容量瓶，用微量注射器（5.6）依次准确加入40L、100L、150L、200L、250L、500L标准使用液（4.8），用高纯水（4.2）定容至刻度，配制浓度分别为4g/L、10g/L、15g/L、20g/L、25g/L、50g/L校准系列，现用现配。7.3.3 按照质量浓度从低到高依次进样，以校准系列溶液中目标组分的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制校准曲线。7.4 试样测定7.4.1 采用自动进样器，进样量为10L。7.4.2 按照与校准曲线的绘制（7.3）相同的步骤进行试样（6.2）的测定。7.4.3 苦味酸MRM色谱图见图1。图1 苦味酸MRM色谱图7.5 空白
9、试验按照与试样测定（7.4）相同的步骤进行空白试样（6.3）的测定。8 结果计算与表示8.1 定性结果根据苦味酸MRM色谱图中的保留时间和特征离子对进行定性分析。8.2 定量结果根据样品中目标物定量离子对的峰面积，外标法定量。苦味酸的定量离子对为228181.9。8.3 结果计算水样中目标化合物的质量浓度计算见式（1）：(1)式中：水样中目标化合物的质量浓度（g/L）；A 水样中目标化合物对应的峰面积；k 校准曲线的斜率；b 校准曲线的截距。测定结果位数的保留与测定下限一致，最多保留三位有效数字。9 精密度与准确度9.1 精密度4家实验室分别测定浓度为4g/L、30g/L、50g/L的样品，实
10、验室内相对标准偏差为0.8%4.5%；实验室间相对标准偏差分别为6.8%、7.0%和5.5%；重复性限为0.35g/L、1.3g/L和2.1g/L；再现性限为0.86g/L、7.0g/L和8.7g/L。9.2 准确度4家实验室分别测定地表水、地下水、出厂水及管网水加标样品。加标浓度分别为4g/L、30g/L、50g/L时，加标回收率分别为80.9%107%、93.0%101%、88.7%97.7%。10 质量保证和质量控制10.1 空白试验每批次样品应做空白试验，测定结果不能超过方法的检出限。10.2 校准曲线要求分析样品之前应建立能够覆盖样品浓度范围的至少6个浓度点的校准曲线，曲线的相关系数r2应大于0.995。10.3 平行样平行双样测定结果的相对偏差满足GB/T 5750.32006的要求。10.4 基体加标基体加标样品的加标回收率范围满足GB/T 32465的要求。_