1、 ICS 65.CCS B 6广Techn2022-020.20 62 西壮nical co-01-26 发壮族金花de of pr发布 广西壮族自花茶组ractice f(M壮族自治区自治 组织培for tissMerrill)区市场监督区培养技ue cultu Sealy 督管理局 地DB术规程ure of Ca 发 布 45方标B45/T 245程 amellia p2022-0布 5 标准562022 peteloti02-28 实准 2 ii 实施DB45/T 24562022 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 组织培养方法.1 5
2、组培苗移栽.2 6 苗期管理.2 附录 A（资料性）培养基配方.4 附录 B（资料性）金花茶病虫害化学防治方法.5 DB45/T 24562022 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西壮族自治区林业局提出、归口并宣贯。本文件起草单位：广西壮族自治区林业科学研究院。本文件主要起草人：林茂、王华新、唐庆、杨舒婷、李进华、陈尔、孙利娜、孙开道、廖美兰、杜铃、黄欣、汪小玉。DB45/T 24562022 1 金花茶组织培养技术规程 1 范围 本
3、文件规定了金花茶（Camellia petelotii(Merrill)Sealy）组织培养的术语与定义、组织培养方法、组培苗移栽以及苗期管理。本文件适用于广西区内金花茶的组织培养。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 8321(所有部分)农药合理使用准则 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 组织培养方法 4.1 无菌播种 4.1.1 种子采收 10月12月采收优良单株的成熟果实，选取粒大、饱满、未开裂、
4、无霉变和虫害的种子。种子宜随采随播，未及时播种的宜在5 8 下冰箱保湿冷藏。4.1.2 表面灭菌 种子先用0.1中性洗涤剂水溶液浸泡20 min30 min，然后在自来水下流水冲洗40 min60 min。在超净工作台上，将种子先用75酒精浸泡40 s60 s，无菌水冲洗35遍，再用0.1氯化汞溶液浸泡16 min20 min，无菌水冲洗35遍。4.1.3 种子处理及播种 种子放进盛有经高温高压灭菌锅灭菌河沙的组培瓶中，埋入无菌河沙中，倒少量无菌水，以无菌河沙湿润为宜。4.1.4 外植体的获得 待种子萌发后，选择具有2片子叶、真叶尚未展开的无菌苗，切取子叶和胚轴作为外植体。DB45/T 245
5、62022 2 4.2 培养条件 各培养阶段的培养温度为25，光照强度为2 000 lx，光周期14 h16 h。4.3 愈伤组织诱导培养 将子叶和胚轴接入愈伤组织诱导培养基(参见附录A中的A.1)上进行诱导培养，培养30 d35 d。4.4 愈伤组织分化培养 将胚性愈伤组织接入分化培养基(参见附录A中的A.2)上进行培养，培养30 d35 d。4.5 生根培养 从分化培养获得的不定芽中切取生长健壮、高度为3 cm4 cm的组培芽，接入生根培养基(参见附录A中的A.3)上进行培养，培养20 d30 d。4.6 炼苗 选择根、茎、叶俱全，株高4.0 cm5.0 cm，叶片46片，根数3条以上，根
6、长3 cm4 cm的组培苗，先带瓶放置于室温为15 28、光照强度为3 000 lx5 000 lx、空气相对湿度85的环境中5 d7 d，然后除去瓶盖继续放置1 d2 d以进行炼苗。5 组培苗移栽 5.1 环境条件 环境温度为15 28，空气相对湿度85。5.2 基质 基质采用1 000倍高锰酸钾溶液消毒的黄心土，pH值为5.56.5。移栽容器采用50或72孔育苗穴盘，穴盘规格为54 cm28 cm。将基质填充到育苗穴盘。5.3 清洗 从培养瓶中取出组培苗，洗净根部培养基，用50多菌灵可湿性粉剂8001 000倍药液浸泡10 min，在阴凉处晾10 min15 min。5.4 移栽 每穴种植
7、1株，将小苗种植在基质中，浇透定根水。5.5 移栽后管理 移栽后的组培苗置于苗床，覆膜，并采用遮光率为7080的遮阳网进行遮光。白天喷雾6次，每次喷雾60 s，每间隔2 h喷雾1次。移栽40 d后，去除薄膜。6 苗期管理 DB45/T 24562022 3 6.1 水分管理 宜在早晚进行，保持土壤湿润，空气湿度保持在85以上。6.2 施肥管理 每隔10 d15 d用0.1磷酸二氢钾水溶液叶面喷施1次，或每隔10 d15 d用0.10.3尿素、复合肥N-P2O5-K2O（15-15-15）水溶液交替淋施1次。6.3 病虫害防治 预防为主，综合防治。主要病害为炭疽病，病虫害化学防治方法参见附录B，
8、农药使用应符合 GB/T 8321（所有部分）的规定。DB45/T 24562022 4 A A 附录A （资料性）培养基配方 A.1 愈伤组织诱导培养基配方 WPM+2.00 mg/L 6-BA+0.50 mg/L 2,4-D30 g/L 白砂糖7.0 g/L琼脂，pH值为5.45.8。A.2 愈伤组织分化培养基配方 WPM+2.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA30 g/L 白砂糖7.0 g/L 琼脂，pH值为5.45.8。A.3 生根培养基配方 1/2 WPM+0.501.00 mg/L IBA30 g/L 白砂糖7.0 g/L 琼脂，pH值为5.45.8。表B病虫害炭
9、疽白绢藻斑赤叶根腐茶吹绵茶小绿 .1给出了金花害名称 疽病 绢病 斑病 叶枯病 腐病 茶蚜 绵蚧 绿叶蝉 花茶病虫害化5050475肟菌70甲60福12012550225金花茶化学防治的方表B.1 金农药名称 多菌灵可湿性甲基硫菌灵悬45代森铵水剂石灰 硫酸铜 菌戊唑醇水分甲基硫菌灵可湿福福锌可湿性硫酸铜 15噁霉灵水剂啶虫脒可溶粉10吡虫啉乳油噻嗪酮可湿性0杀螟硫磷乳20异丙威乳油速灭威可湿性B B 附录B（资料性）茶病虫害化学方法。金花茶病虫害性粉剂 悬浮剂 剂 分散粒剂 湿性粉剂 性粉剂 剂 粉剂 油 性粉剂 乳油 油 性粉剂 B ）学防治方法 害化学防治方1 08822 01 01 0
10、4 01 02 01 01 086 方法 稀释倍数 0001 200 倍 001 000 倍 001 000 倍-200500 倍 0003 000 倍 0001 200 倍 0001 200 倍 1 000 倍 0005 000 倍 0001 200 倍 0003 000 倍 0001 200 倍 0001 200 倍 001 000 倍 600800 倍 DB45/T 施 叶叶 根 245620225 施药方法 叶面喷雾 灌施 撒施 叶面喷雾 喷洒 根部灌注 喷洒 喷洒 喷洒 2 中华人民共和国广西地方标准 金花茶组织培养技术规程 DB 45/T 24562022 广西壮族自治区市场监督管理局统一印刷 版权专有 侵权必究