1、SN/T1956一2007肉及肉制品中己烯雌酚残留量检测方法酶联免疫法1范围本标准规定了肉及肉制品中己烯雌酚残留量的酶联免疫测定方法。本标准适用于鸡肉、猪肉、牛肉、羊肉、猪肉饼中已烯雌酚残留量的检测。2试样的制备和保存2.1试样的制备从所取全部样品中取出有代表性样品约1kg,充分搅碎,混匀,采用四分法,将样品分成两等份,装入洁净容器,加封并做标识。2.2试样的保存试样放置一20一18条件下保存3测定方法3.1方法提要本方法的测定基础是竞争谁酶联免疫反应。己矫雕酚与己婚雕酚酶标记物共同竞争己烯雌酚抗体的结合位点,用酶标仪测量微孔溶液的吸光度值,己稀濉酚浓度写吸光度值成反比,按绘制的校正曲线定量计
2、算。3.2试剂和材料除另有规定外,所用化学试剂均为分析纯或为更高级别。水为重蒸馏水。3.2.1己烯雌酚酶联免疫定事测定试剂盒(参见附录A。3.2.2叔丁基甲基醚:色谱纯3.2.3石油醚。3.2.4二氯甲烷。3.2.5磷酸。3.2.6盐酸。3.2.7甲醇:色谱纯。3.2.8磷酸氢二钠(Na2HPO42H2O)。3.2.9磷酸二氢钠(NaH2 PO,HO)。3.2.10氯化钠。3.2.11三羟甲基氨基甲烷。3.2.12磷酸盐缓冲液(67mmol/L,pH=7.2):称取9.61g磷酸氢二钠,1.79g磷酸二氢钠和8.7g氯化钠溶解于并定容至1000mL水中。3.2.13Tris缓冲液(20mmol/L,pH=8.5):称取2.42g三羟甲基氨基甲烷溶解于700mL水中,加人200mL甲醇,用5mol/1.盐酸调节pH值至8.5,加水定容至1000mL。3.2.14洗涤用磷酸盐缓冲液(20mmol/L,pH=7.2):称取2.85g磷酸氢二钠,0.55g磷酸二氢钠9g氯化钠和1mL吐温20,溶解并定容至1000mL水中。3.2.15氢氧化钠溶液(1mol/L):称取40g氢氧化钠溶于1000mL水中。