1、ICS 65.150 CCS B 50 DB36 江西省地方标准 DB36/T 15992022 大刺鳅种质标准 Variety standard for mastacembelus armatus 2022-05-30 发布 2022-12-01 实施 江西省市场监督管理局 发 布 DB36/T 15992022 I 目 次 前 言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 学名和分类地位.1 4 主要形态结构特征.1 5 生长与繁殖.2 6 遗传学特性.3 7 检测方法.4 附录 A（规范性附录）试剂配制.5 DB36/T 15992022 II 前 言 本文件按照GB/T1.1-2
2、020 标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件江西省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：江西省水产科学研究所、赣州市畜牧水产研究所。本文件主要起草人：王海华、徐先栋、马本贺、李燕华、吴斌、曾庆祥、刘毅、钟颖良、王梦杰、余连渭、李左宏、邓丽芳、李行伟、赵立军。DB36/T 15992022 1 大刺鳅种质标准 1 范围 本文件给出了大刺鳅 Mastacembelus armatus(Lacpde,1800)的学名与分类地位、形态特征、生长繁殖、细胞遗传学和生化遗传学特性以及检测方法。本文
3、件适用于江西省境内大刺鳅种质的检测和鉴定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 18654.3 养殖鱼类种质检验 第3部分：性状测定 GB/T 18654.4 养殖鱼类种质检验 第4部分：年龄与生长的测定 GB/T 18654.6 养殖鱼类种质检验 第6部分：繁殖性能的测定 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分：染色体组型分析 GB/T 18654.13 养殖鱼类种质检验 第13部分：同工酶电泳分析 3 术语和定义 本文件没有
4、需要界定的术语和定义。4 学名和分类地位 4.1 学名 大刺鳅 Mastacembelus armatus(Lacpde,1800)。4.2 分类地位 脊椎动物亚门（Vertebrata），硬骨鱼纲（Osteichthyes），鲈形目(Perciformes)，刺鳅科（Mastacembelidae），刺鳅属(Mastacembelus)。5 主要形态结构特征 5.1 外部形态特征 5.1.1 外形 体长，前段稍侧扁，肛门以后扁薄。头长而尖。眼位于头的前部，侧上位。眼间头背自后向前渐狭长。眼被皮膜覆盖。眼下斜前方有一尖端向后的小刺，埋于皮内。吻长远不及眼后头长。吻端向下伸出成吻突，其长度大于眼
5、径。两对鼻孔前后分离，后鼻孔靠近眼，呈平眼状，前鼻孔位于吻突两侧，呈管DB36/T 15992022 眼状。口下位，口裂几成三角形。口角止于后鼻孔下方。上下颌有绒毛状齿带。胸鳍小而圆。无腹鳍。背鳍和臀鳍分别迕于尾鳍。尾鳍长圆形。背鳍刺34，臀鳍刺2，肛门靠近臀鳍。体鳞细小。侧线完全。背侧灰褐色，腹部灰黄色，胸鳍黄白色，其它各鳍灰黑色，鳍缘有一灰白边。大刺鳅外形见图1。图1 大刺鳅外形图 5.1.2 可数性状 背鳍刺3235；臀鳍刺2。5.1.3 可量性状 大刺鳅可量性状的实测比例值见表1。表1 大刺鳅可量性状比例值 体高/体长 头长/体长 体宽/体长 眼径/头长 吻长/头长 体高/体长 头长/
6、体长 体宽/体长 眼径/头长 吻长/头长 0.0980.010 0.1790.016 0.0620.010 0.0960.098 0.4010.042 5.2 内部构造 5.2.1 鳔 细长，无鳔管。5.2.2 脊椎骨 总数8387。5.2.3 胃 呈“V”型，无内含物时为长管状结构，内壁具褶皱，分为贲门部、胃体部、幽门部3个部分。5.2.4 肠 较短、具1个弯曲，肠绒毛细长而密集，肠的始端向幽门部延伸出2个幽门盲囊。6 生长与繁殖特性 6.1 生长 不同年龄组大刺鳅的体长和体重的分布情况见表2。表2 不同年龄组大刺鳅的体长和体重组成 年龄 体长范围（cm）体重范围(g)1 6.6011.70
7、 0.475.13 DB36/T 15992022 3 表 2 不同年龄组大刺鳅的体长和体重组成（续）年龄 体长范围（cm）体重范围(g)2 12.3025.10 5.0140.95 3 24.6035.70 40.27141.97 4 34.2047.50 138.23224.75 6.2 生长方程 生长方程：W=0.004 L2.85(R2=0.90；p0.05)。W：体重，单位g；L：体长，单位cm。6.3 繁殖 6.3.1 性成熟年龄 性成熟年龄一般在 III 龄IV 龄。6.3.2 产卵特性 属分批产卵类型，产卵期为 5 月底至 10 月初，产卵高峰为 7 月到 9 月，产卵水温一般
8、在 25以上，卵具有弱粘性，显淡黄色。IV 期卵巢的卵径大小在 0.8mm1.6 mm 之间，V 期卵巢的卵径分布在1.7mm2.0 mm 之间。6.3.3 怀卵量 绝对怀卵量为 576 粒7823 粒；相对怀卵量平均为 73 粒/g。7 遗传学特性 7.1 大刺鳅染色体核型 7.1.1 试剂配制 实验试剂配制方法见附录。7.1.2 染色体数 体细胞染色体2倍数，2n=48。7.1.3 染色体核型图 中部着丝粒（M）7对，端部着丝粒(T)17对，见图2。图2 大刺鳅染色体组型 DB36/T 15992022 7.2 大刺鳅同工酶检测 7.2.1 乳酸脱氢酶酶谱表型 7.2.1.1 大刺鳅乳酸脱
9、氢酶（LDH）同工酶共检测到5条酶带，在肌肉中均能检测到5条，在肝脏中检测到4条，在脾脏、肾脏及心脏检测到1条，脑组织中未检测到乳酸脱氢酶表达（图3）。在肝脏中乳酸脱氢酶表达活性最高。图3 大刺鳅不同组织乳酸脱氢酶电泳图谱及酶谱示意图 注：G：鳃；B：脑；L：肝；S：脾；H：心；K：肾；M：肌肉（下同）。7.2.1.2 大刺鳅酯酶（EST）同工酶共检测到6条酶带，在肌肉中检测到4条，肝脏、脾脏、肾脏和心脏中均检测到2条，脑组织中检测到1条（图4）。在肝脏中酯酶表达活性最高，其次为肾脏、脾脏。图4 大刺鳅不同组织酯酶电泳图谱及酶谱示意图 8 检测方法 8.1 形态特征的测定 按GB/T 1865
10、4.3的规定执行。8.2 年龄鉴定 采用耳石鉴定年龄。按GB/T 18654.4的规定执行。8.3 繁殖性能测定 按GB/T 18654.6的规定执行。8.4 细胞遗传学特性 按GB/T 18654.12的规定执行。8.5 生化遗传学特性测定 按GB/T 18654.13的规定执行。DB36/T 15992022 5 附 录 A（规范性）试剂配制 A.1 生理盐水 称取氯化钠 8.5 g，加入1000ml ddH2O中，搅拌至完全溶解后，经121 高温高压灭菌20 min备用。A.2 秋水仙素 称取20 mg秋水仙素，加入0.85%生理盐水溶液20 mL，待完全溶解后，经121 高温高压灭菌1
11、5 min，避光保存于4 冰箱备用。A.3 植物血凝素 称取20 mg植物凝集素，加入0.85%生理盐水溶液20 mL，待完全溶解后，保存于4 冰箱备用。A.4 卡诺氏固定液(Carnoys Fluid)100mL卡诺氏固定液配制：量取甲醇75mL，冰乙酸25mL，混合均匀，现配现用。A.5 磷酸缓冲液 配制pH7.0的0.1 mol/L PBS缓冲溶液：称取KH2PO4 13.6g，K2HPO4 22.832 g，NaCl 8.5g，加入1000mLddH2O中，搅拌至完全溶解后，经121高温高压灭菌20 min，保存于4 冰箱备用。A.6 0.075 mol/L氯化钾低渗液 称取氯化钾 0.559 g，溶于100 mLddH2O，经121高温高压灭菌20 min，备用。A.7 姬姆萨染液 量取Giemsa原液 1 mL，置于10 mL 1/15 mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）中稀释，现配现用。_