1、 ICS 67.060 CCS B23 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 23402021 呼伦贝尔大豆 Hulunbuir soybean 2021-09-08 发布 2021-10-08 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 23402021 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会(SAM/TC20)归口。本文件起草单位：呼伦贝尔市农牧科学研究所、内蒙古自治区种子站、阿荣旗农业技术推
2、广中心、中国农业科学院农产品加工研究所。本文件主要起草人：孙如建、孙宾成、王景顺、张琪、胡兴国、郭荣起、于平、冯雷、柴燊、毕秀丽、邵玉彬、傅晓华、许一荣、李淑英。DB15/T 23402021 1 呼伦贝尔大豆 1 范围 本文件规定了呼伦贝尔大豆的术语和定义、产地环境技术要求、品种选择要求、生产管理模式、收储方法、质量要求、品质要求、卫生要求、检验规则、标签标识和包装。本文件适用于呼伦贝尔大豆。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件
3、。GB 1352-2009 大豆 GB 2715 食品安全国家标准 粮食 GB 2761 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量 GB 2762 食品安全国家标准 食品中污染物限量 GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB 5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定 GB 5009.6 食品安全国家标准 食品中脂肪的测定 GB 5009.88 食品安全国家标准 食品中膳食纤维的测定 GB/T 5490 粮油检验 一般规则 GB 5491 粮食、油料检验扦样、分样法 GB 19641 食品安全国家标准 食用植物油料 GB/T 21760 植物检疫证书准则 GB/T 3
4、0885-2014 植物蛋白饮料 豆奶和豆奶饮料 NY/T 285-2012 绿色食品 豆类 NY/T 1740 大豆中异黄酮含量的测定 高效液相色谱法 LS/T 3111-2017 中国好粮油 大豆 LS/T 3241-2012 豆浆用大豆 DB15/T 2336呼伦贝尔大豆产地环境技术要求 DB15/T 2337 呼伦贝尔大豆品种选择要求 DB15/T 2338 呼伦贝尔大豆高效栽培技术规程 DB15/T 2339 呼伦贝尔大豆收储技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 DB15/T 23402021 2 呼伦贝尔大豆 Hulunbuir soybean 源于呼伦贝尔
5、市行政区域，产地环境、品种选择、生产管理模式、收储方法、质量、品质、卫生、标签标识和包装符合本文件要求的大豆。4 产地环境技术要求 应符合DB15/T 2336的规定。5 品种选择要求 应符合DB15/T 2337的规定。6 生产管理模式 应符合DB15/T 2338 的规定。7 收储方法 应符合DB15/T 2339的规定。8 质量要求 8.1 感官要求和理化指标 应符合GB 1352-2009中5.1.1的规定。8.2 安全指标 真菌毒素限量、污染物限量应符合GB 2761、GB 2762对豆类及其制品的规定和NY/T 285-2012中4.4的规定。农药残留限量应符合GB 2763和NY
6、/T 285-2012中4.4的规定。8.3 追溯信息 应符合LS/T 3111-2017中4.4的规定。9 品质要求 9.1 普通大豆 应符合表1的规定。DB15/T 23402021 3 表1 普通大豆指标 项目 指标 检测方法 粗蛋白质含量（干基）/（%）41.0 GB 5009.5 粗脂肪含量（干基）/（%）20.5 GB 5009.6 粗蛋白质和粗脂肪含量总和（干基）/（%）59.0 GB 5009.5/GB 5009.6 9.2 高油大豆 应符合表2的规定。表2 高油大豆指标 项目 指标 检测方法 一级 二级 三级 粗脂肪含量（干基）/（%）22.5 21.5 20.5 GB 50
7、09.6 9.3 高蛋白质大豆 应符合表3的规定。表3 高蛋白质大豆指标 项目 指标 检测方法 一级 二级 三级 粗蛋白质含量（干基）/（%）44.0 42.5 41.0 GB 5009.5 9.4 其他品类大豆 9.4.1 高异黄酮大豆 应符合表4的规定。表4 高异黄酮大豆指标 项目 指标 检测方法 一级 二级 三级 异黄酮含量/（mg/kg）4300 4000 3700 NY/T 1740 9.4.2 豆腐用大豆 应符合表5的规定。DB15/T 23402021 4 表5 豆腐用大豆指标 项目 指标 检测方法 一级 二级 三级 粗蛋白质含量/（%）42 3842 38 GB 5009.5
8、粗脂肪含量/（%）19 1921 21 GB 5009.6 11S 含量/7S 含量 2.25 1.352.25 1.35 附录 A 9.4.3 豆浆用大豆 应符合表6的规定。表6 豆浆用大豆指标 项目 指标 检测方法 蛋白质转移率/（%）25 LS/T 3241-2012 中 5.1 可溶性膳食纤维含量（干基）/（%）9 GB 5009.88 总固形物转移率/（%）55 GB/T 30885-2014 中 6.2 蛋白质含量（干基）/（%）40 GB 5009.5 脂肪含量（干基）/（%）19 GB 5009.6 10 卫生要求 10.1 食用大豆应符合 GB 2715、GB 19641 的
9、规定。10.2 植物检疫应符合 GB/T 21760 的规定。11 检验规则 11.1 检验的一般规则应按 GB/T 5490 执行。11.2 检验批为同种类、同产地、同收获年度、同运输单元、同储存单元的大豆。11.3 扦样、分样：应按 GB 5491 的要求执行。11.4 高油大豆按粗脂肪含量定等，粗脂肪含量低于最低等级规定的，不应作为高油大豆。11.5 高蛋白质大豆按粗蛋白质含量定等，粗蛋白质含量低于最低等级规定的，不应作为高蛋白质大豆。11.6 高异黄酮大豆按异黄酮含量定等，异黄酮含量低于最低等级规定的，不应作为高异黄酮大豆。11.7 豆腐专用大豆按品质定等，低于最低等级规定的，不应作为
10、豆腐用大豆。11.8 豆浆专用大豆应符合规定品质指标，不符合要求的，不应作为豆浆用大豆。11.9 出厂检验项目包括质量要求、品质要求和卫生要求。11.10 型式检验项目包括本文件第 8 章、第 9 章中规定的全部项目。发生下列情况之一时，也应进行型式检验：原料、工艺有较大变化时；长期停产后重新恢复生产时；检验结果与平常记录有较大差别时；国家有关市场监督管理行政主管部门提出要求时；“呼伦贝尔大豆”授权使用单位提出要求时。11.11 判定是否符合本文件要求时，应遵循以下规则：卫生要求有一项不合格，即判该批产品为不合格。质量要求中有不符合规定等级的项目，可进行一次复检，复检仍不合格，则判该批产品为不
11、合格。DB15/T 23402021 5 12 标签标识和包装 应符合GB 1352-2009中第8章和第9章的规定。DB15/T 23402021 6 附录A （规范性）大豆蛋白亚基 11S/7S 检测方法 A.1 原理 大豆11 S和7 S蛋白亚基含量是影响蛋白质加工品质的重要因素,大豆中11 S和7 S的比值，与营养价值和商品性密切相关，11 S球蛋白含硫氨基酸比较丰富，蛋白品质好，豆制品的营养价值高，而7 S球蛋白富含赖氨酸，豆乳制品乳化性好，豆腐凝聚性好。聚丙烯酰胺单体和交联剂在催化剂的作用下聚合成网状结构凝胶，通过调节聚丙烯酰胺和交联剂的浓度比例，可得到不同孔径凝胶，用于分离不同分
12、子量的蛋白。十二烷基硫酸钠（SDS）是阴离子表面活性剂，与蛋白质形成的复合物带有大量负电荷，从而降低或消除天然蛋白质分子间电荷差别，同时SDS能够使蛋白质变性。SDS-蛋白质复合物的电泳迁移率差异仅取决于蛋白质分子量，能够将不同蛋白质亚基按照分子量分离为不同带谱，以便检测亚基含量。A.2 仪器设备 电子天平（精确度 0.001），研钵，斡旋仪，离心机，蛋白电泳仪及电泳装置，凝胶成像系统。A.3 试剂 A.3.1 试剂准备 Tris-HCl、10%十二烷基硫酸钠（SDS）、尿素（CH4N2O）、溴酚蓝（Bromophenol blue)、甘氨酸（Glycine）、丙烯酰胺（Acrylamide）
13、、过硫酸铵（APS）、四甲基乙二胺（TEMED）、考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue G-250）、乙醇（C2H5OH）、乙酸（CH3COOH）、甲醇（MtOH）、巯基乙醇（ME）。A.3.2 蛋白提取液 称取6.055 g Tris-HCl，2 g十二烷基硫酸钠，303 g 尿素，2.25 g溴酚蓝溶于ddH2O，定容至1 L，调PH到6.8。A.3.3 10缓冲液 称取30.3 g Tris-HCl，143.1 g甘氨酸，10 g十二烷基磺酸钠溶于ddH2O定容至3 L。A.3.4 12%分离胶（一块）吸取9.8 mL ddH2O，12 mL 30%丙烯酰胺，7.
14、6 mL 1.5 M Tris-HCl，0.3 mL10%十二烷基硫酸钠，0.3 mL 10%过硫酸铵，12 L四甲基乙二胺，快速混匀。A.3.5 5%浓缩胶（一块）吸取6.8 mL ddH2O，1.66 mL 30%丙烯酰胺，1.26 mL 1.0 M Tris-HCl，0.1 mL 10%十二烷基硫酸钠，0.1 mL 10%过硫酸铵，10 L四甲基乙二胺，快速混匀。A.3.6 染色液 称取2.25 g考马斯亮蓝，440 mL 乙醇，60 mL 乙酸，ddH2O定容至1 L。DB15/T 23402021 7 A.3.7 脱色液 量取1000 mL甲醇，250 mL乙酸，3750 mLddH
15、2O，充分混匀。A.4 制胶及灌胶的方法 将玻璃板用酒精擦干净，用夹子固定在固定板上，然后按配方先灌40 mL分离胶，混匀，灌至过固定板红线1 cm2 cm 止；灌好分离胶后立即加水封，用1000 L的移液枪缓慢的加水封4 cm5 cm,静置30 min左右，直到看到分离胶与水封间有一道清晰的折光面为止，说明分离胶已凝固；倒掉水封，用滤纸插入两玻璃板间，轻吸分离胶表面的水分，滤纸不应接触胶面；吸干胶面水分后，再将浓缩胶灌满玻璃板，除去浓缩胶表面的气泡，快速插入梳子，静置1 d左右，到倾斜玻璃板浓缩胶表面时胶液不流动为止。A.5 样品制备 将待测大豆样品去皮，用研钵磨成豆粉；1/1000电子天平
16、称量 5 mg 样品装入 2 mL 的离心管中；加入500 L蛋白提取液（含10 L 巯基乙醇）；斡旋仪800 rpm 振动20 min；离心机12000 rpm 离心10 min，取上清液备用。A.6 样品检测 配制12.0%的分离胶和 5.0%的浓缩胶，取10 L 的上清液加入点样孔；浓缩胶电泳电压为80 V，分离胶电泳电压为 120 V，电泳2 h；染色5 h，脱色直至脱净背景，凝胶成像系统扫描；计算11 S与7 S比值，结果精确到小数点后1位。DB15/T 23402021 8 参考文献 1邱丽娟,常汝镇,刘章雄,等.大豆种质资源描述规范和数据标准M.北京:中国农业出版社,2006.2韩粉霞,丁安林,孙君明.高异黄酮含量大豆新品种中豆27J.大豆科学,2002,21(3):231-233.3张明俊,李忠峰,于莉莉,等.大豆子粒蛋白亚基变异种质的鉴定与筛选J.作物杂志,2018,(3):44-50.