1、DB21/T2743-20177操作步骤7.1菌落培养接种的菌落由新鲜的划线平板菌落来制备，按要求选择琼脂培养基平板进行接种，除特殊要求培养时间不超过24小时。7.2菌液制备用接种环挑取琼脂平板上培养1618小时的35个单菌落，用0.85%无菌生理盐水或M-H肉汤稀释至0.5麦氏单位，菌液浓度约为12108 CFU/mL。7.3抗菌药物工作溶液的制备7.3.1溶剂和稀释液用于制备抗菌药物储备液的溶剂和稀释液，除蒸馏水可高压灭菌外，其余应采用0.22m微孔滤膜过滤除菌。7.3.2抗菌药物储备波的制备抗菌药物储备液的米度应乃能o0公广但衬于某些溶解性低的抗菌药物可以制备恢低度的储备液。7.3.3抗
2、菌药切液的利名将抗菌药物储备液用M-H肉汤稀释定的4后，按倍比稀释法进一步稀释一系列所需浓度（一般10个浓度横度），然后按序用多道移液器点入96孔板中，每块板横向10稀释度，每孔0.1mL,设阴性和阳性对照。7.4菌液接种将调节至0.5麦氏单位的液用M-H肉汤稀释100倍，混匀备用。使用多道移液器吸取菌液0.1mL分别加入含系列抗菌药物溶液的药敏板中，或米用自动上祥器进行接种，阴性对照孔除外，阳性对照为菌液0.1mL。阴性对照孔中加入0.1mL水解酪蛋白肉汤，盖好板盖。7.5培养将加有菌液和抗菌药物的板，置36t1培养箱中培养1618小时。7.6结果判定取出培养后的药敏板，先观察阴性和阳性结果，阴性对照孔应无细菌生长，孔内液体未见浑浊：阳性对照孔应有细菌生长所形成的圆形或者网状沉淀。如果阴性和阳性对照结果正常，继续观察其余孔内细菌生长情况，无细菌生长的孔内所含最低抗菌药物浓度即为最低抑菌浓度(MIC)。或采用药敏结果判定仪进行判定。7.7质量控制在质控菌株的最低抑菌浓度符合规定范围的前提下，按判断标准判断被检菌株的敏感性一敏感(S)、中度敏感(I)或耐药(R)。对于只给出敏感判断标准的药物，只报告其是否敏感即可。可参3
