1、ICS 65.020.20 B 16 DB61 陕西省地方标准 DB 61/T 10822017 番茄灰霉病抗性鉴定技术规范 Rule for Resistance evaluation of Tomato grey mold 2017-07-13 发布 2017-08-06 实施陕西省质量技术监督局 发 布DB61/T 10822017 I 目 次 前 言.II 1 范围.1 2 术语和定义.1 3 病原物.1 3.1 病原物来源和保存.1 3.2 孢子悬浮液的制备.1 4 抗病性鉴定.1 4.1 室内鉴定.1 4.2 田间鉴定.2 4.3 病情级别与标准.2 4.4 抗性级别判定.3 DB
2、61/T 10822017 II 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由西北农林科技大学提出。本标准由陕西省农业厅归口。本标准负责起草单位：西北农林科技大学。本标准主要起草人：王阳、马青、宗兆锋、赵新贝。本标准由西北农林科技大学负责解释。本标准首次发布。联系信息如下：单位：西北农林科技大学 电话：029-87082710 地址：陕西杨凌邰城路3号 邮编：712100 DB61/T 10822017 1 番茄灰霉病抗性鉴定技术规范 1 范围 本标准规定了番茄灰霉病抗性鉴定技术的术语和定义、病原物制备、抗病性评价标准及鉴定报告等内容。本标准适用于番茄生产品种、新育成品
3、种、区域试验品种、亲本及中间材料的灰霉病抗性鉴定和抗性评价。2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。2.1 番茄灰霉病 Tomato grey mould 由灰葡萄孢 Botrytis cinerea Pers侵染引起的番茄真菌性病害。植株的叶片、花、果实和茎均可受害。叶片发病，形成“V”字形病斑；幼果受害先危害残留的花瓣、花托，后向果实扩展呈灰白色腐烂；茎部受害，为深褐色长椭圆形病斑；湿度大时产生灰色霉层。3 病原物 3.1 病原物来源和保存 采集灰霉病病株，从发病植株的典型病斑上分离纯化病菌，经致病性测定后，4保存备用。长期保存于-80超低温冰箱中。3.2 孢子悬浮液的制备 灰霉病菌在
4、PDA平板上黑暗培养7d产孢后，收集孢子，2%的蔗糖溶液配置孢子悬浮液（1106孢子/ml）。4 抗病性鉴定 4.1 室内鉴定 4.1.1 苗期鉴定 选取待测番茄品种和感病对照六叶期幼苗，进行孢子悬浮液喷雾接种，接种后在23、相对湿度90%的黑暗条件下保湿24h。每份试材3次重复，每重复10株。4d后调查发病率和严重度，并按照公式（1）计算灰霉病病情指数。病情指数=（各级病株数该病级值）/（调查总株数最高级值）100（1）DB61/T 10822017 2 4.1.2 离体叶片鉴定 选取待测番茄和感病对照六叶期植株第3片复叶，采用孢子悬浮液点滴接种,每份试材3次重复，每重复30片小叶。在小叶中
5、心近轴处用移液器加5L孢子悬浮液，以2%蔗糖溶液作对照。将接种后的叶片置于直径9cm的培养皿内，封口膜封口。在23、相对湿度90%的黑暗条件下培养24h后进行光照培养，光照时间为12h/d，光照强度为3000lx。4d后记载侵染型，计算病情指数。4.1.3 果实鉴定 取发育一致的果实，在果实对应侧面用消毒针尖扎3mm深的孔，接种5L孢子悬浮液，以灭菌蒸馏水5L作对照。每份试材3次重复，每重复5个果，每果扎2个孔。将果实置于湿度90%的器皿中保湿，20黑暗条件下保存，4d后测量病斑面积，计算病斑扩展速率和相对病斑扩展速率。4.2 田间鉴定 4.2.1 鉴定圃设置 在番茄灰霉病常发区域设置抗性鉴定
6、圃。田间鉴定病圃的栽培条件（品种、土壤类型及施肥）须均匀一致，设立保护行。在鉴定圃中每个材料种2行，每行15株，选当地感病品种做对照，重复3次。4.2.2 接种方法 用2%蔗糖溶液配置孢子悬浮液（1106孢子/ml）接种，接种采用喷雾法。在番茄初花期进行接种，接种前2d田间浇灌，以满足发病所需条件。选择傍晚接种，保湿24h。接种后15d、30d各调查一次；记载病株率和严重度。4.3 病情级别与标准 4.3.1 室内苗期和田间鉴定病情级别 室内苗期和田间鉴定病情级别见表1。表1 室内苗期和田间鉴定病情级别 抗性类别 病情级别 症 状 缩写 类别 0 级 叶片无病斑 I 免疫 1 级 单叶片有病斑
7、 3 个 HR 高抗 3 级 单叶片有病斑 4 个6 个 R 抗病 5 级 单叶片有病斑 7 个10 个 MR 中抗 7 级 单叶片有病斑 11 个20 个，部分密集成片 S 感病 9 级 单叶片有病斑密集占叶面积四分之一以上 HS 高感 4.3.2 离体叶片病情级别 离体叶片病情级别见表2。DB61/T 10822017 3 表2 离体叶片病情级别 抗性类别 病情级别 症 状 缩写 类别 0 级 叶片无病斑 I 免疫 1 级 病斑面积占整个叶面积的 5%以下 HR 高抗 3 级 病斑面积占整个叶面积的 6%15%R 抗病 5 级 病斑面积占整个叶面积的 16%25%MR 中抗 7 级 病斑面
8、积占整个叶面积的 26%50%S 感病 9 级 病斑面积占整个叶面积的 50%以上 HS 高感 4.3.3 离体果实病情级别 离体果实病情级别见表3。表3 离体果实病情级别 抗性类别 病情级别 症 状 缩写 类别 0 级 无病斑 I 免疫 1 级 病斑直径小于 1cm HR 高抗 3 级 病斑直径 1cm2cm R 抗病 5 级 病斑直径 2cm3cm MR 中抗 7 级 病斑直径 3cm4cm S 感病 9 级 病斑直径大于 5cm HS 高感 4.4 抗性级别判定 4.4.1 有效性判别 对照感病品种的抗性级别达到7级9级，该批次鉴定有效。4.4.2 抗性评价 4.4.2.1 在连续 3 次鉴定的结果中，如有 2 次的抗性类别是一致的，则此抗性类别作为最终鉴定结论。4.4.2.2 达到免疫-高抗的鉴定品种，当两次抗性类别不一致时，以记载的被确认的最高病情级别所对应的抗性类别为准。4.4.2.3 同一鉴定品种的抗性级别一次为 5 级，另一次在 5 级以下或 5 级以上且相差 1 个等级，取抗性级别数值较大的鉴定结果；如果两次抗性级别相差 2 个级别以上（包括 2 个级别）的，则需要做第三次抗性鉴定。4.4.2.4 同一鉴定品种的抗性级别一年在 5 以上，另一年在 5 以下的，则需要做第三次抗性鉴定，按本标准 4.4.2.14.4.2.3 规则重新划分抗性类别。_