1、ICS 65.12CCS B46团体标准!#$%&()%)&*+,-./01234353637*89:;*+,-./01234353637*89:;*+,-./01234353637*89:;?9ABCDEDEDE全国团体标准信息平台!#$%&()%)&#FG前.2引.3物有机微量元素铁、铜、锌、锰、硒产技术指南.41 适范围.42 规范性引件.43 术语和定义.54 设计总则.74.1背景原理.74.2标准要求.75 技术流程.75.1初步筛选耐微量元素微物.75.2耐微量元素微物的驯化培养.85.3富集微量元素微物的筛选与驯化.105.4培养基和艺优化，建最优发酵体系.105.5成品指标检
2、测.156 标签.167 包装、运输、贮存和保质期.167.1包装.167.2运输.177.3贮存.177.4保质期.17全国团体标准信息平台!#$%&()%)&HHHIII本指南按照 GB/T1.1-2020标准化作导则第 1 部分：标准化件的结构和起草规则起草。某些内容可能涉及专利，本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。本指南由中国国际科技促进会归。本指南由河南科技学负责具体技术内容的解释，由河南省物发酵态微量元素及安全评价程技术研究中负责相关技术的验证与结果呈现。为提指南质量，请各单位在使过程中，总结经验，积累资料，及时将发现达到问题和意反馈给河南省物发酵态微量元素及安全评价程技术研
3、究中，以供今后修订时参考。联系式：河南省鹤壁市浚县产业集聚区业路与湘江路交叉，邮编：456250；E-mail：。本指南起草单位：河南科技学、河南艾格多科技有限公司、河南岐伯实业有限公司、辽宁岐伯科技实业有限公司、河南省农业科学院、河南业学、学。本指南主要起草：何万领、李晓丽、任振东、杨帮、张晓丽、丁伟、丁美洁、位治国、贾寒、李绍钰、刘来亭、燕燕。全国团体标准信息平台!#$%&()%)&%JJJIII本指南旨在指导如何业化产物有机微量元素，保证其产出来的成品符合其预期设计的质量要求。本指南针对物有机微量元素发酵菌株的筛选与评价、物有机微量元素发酵艺与参数、产品质量控制及添加例进说明和规范。前，
4、有机微量元素产式主要包括合成和微物发酵两种，其中采化合成的有机微量元素存在艺复杂、条件苛刻、成本、品质难保证、缺乏科学检测法等问题。微物是泛存在于然界的物体，能够通过物合成作将机态微量元素转化为有机态，通过合适的产法可以达到效产物有机微量元素的的。基于此，为规范物发酵有机微量元素产，保证产品质量，促进物有机微量元素在动物养殖中的科学应，制定本指南。本指南为次发布，今后将根据物有机微量元素产和应技术的发展进适时修订。全国团体标准信息平台!#$%&()%)&*+,-./01234353637*89:;*+,-./01234353637*89:;*+,-./01234353637*89:;&KLMN
5、KLMNKLMN本指南规定了物有机微量元素产技术的总体设计要求、发酵菌株的筛选与评价、发酵艺与参数、产品质量控制及添加例等技术要求。本指南适于使中华共和国农业部2045号公告 饲料添加剂品种录（2013）中批准的微物发酵产有机微量元素，可作为物有机微量元素产案设计、发酵艺、质量控制及产品检测的技术依据。)OMPJLQROMPJLQROMPJLQR本指南内容部分引了下列件中的条款，凡是注明期的件，仅注期的版本适于本指南。GB/T 10647饲料业语GB/T 6435饲料中分的测定GB/T 13078饲料卫标准GB/T 14699.1 饲料采样GB/T 29605感官分析品感官质量控制导则GB/T
6、 130792006 饲料中总砷的测定GB/T 13080饲料中铅的测定 原吸收光谱法GB/T 13081饲料中汞的测定GB/T 13082饲料中镉的测定法GB/T 13083饲料中氟的测定 离选择性电极法GB/T 13091饲料中沙菌的检测法GB/T 13883饲料中硒的测定GB/T 13885饲料中钙、铜、铁、镁、锰、钾、钠和锌含量的测定原吸收光谱法NY/T 2071饲料中曲霉毒素、霉烯酮和 T-2 毒素的测定液相谱-串联质谱法全国团体标准信息平台!#$%&()%)&5饲料添加剂品种录(2013)(农业部公告第 2045 号)饲料原料录(农业部公告第 1773 号)S S S:TUVW:T
7、UVW:TUVW下列术语和定义适于本件。3.1微量元素添加剂 micro mineral additive为了满养殖过程中畜禽对矿物营养的需要补加的类营养添加剂。3.2有机微量元素 organic trace elements属元素与有机络合体，如蛋质、氨基酸、有机酸、肽、多糖及其衍物等通过共价键或离键结合形成的简单络合物或螯合物。3.3物有机微量元素 biological organic trace elements利微物发酵作合成的类有机微量元素。3.4元素耐受能 element tolerance ability某种微物在含有种或多种微量元素培养基（微量元素浓度远于实际需要平）上仍能够的
8、能。3.5微物驯化 microbial acclimation利段对微物环境加以控制，使该微物性能达到预期标的培养过程。3.6发酵基质 fermentation substrate利农副产品、产制造副产物及其他营养物质混合成，以满菌种、繁殖、合成产物等需要的制品。3.7单位活菌数 bacterial counts全国团体标准信息平台!#$%&()%)&运活菌计数法测得的定体积或质量发酵产物中存活的菌种数量。3.8含量 moisture content物料中的重量与物料湿重之，通常百分数表示。3.9元素有机转化率 organic conversion of elements通过微物发酵作，发酵终
9、产物中有机微量元素质量与未发酵前物料中机元素质量之，通常百分数表示。3.10元素形态 elemental speciation天然产出或合成的元素所具有的物理和化学相，通常从元素的价态、化合状态及结合状态等进分析。3.11物量 biomass发酵培养的某阶段，微物质量与发酵产物总质量的值，通常 g/L 或 g/kg 表示。3.12单位富集量 enrichment per unit定质量的菌体中含有的某种微量元素的质量，通常 mg/g 表示。3.13总富集量 total enrichment所有菌体中含有的某种微量元素的质量，通常 mg/g 表示。3.1.4富集率 enrichment rate
10、微物富集的微量元素的质量与额外加的机微量元素质量的值，通常百分数表示。3.1.5微量元素有机率 organic percentage of trace elements微物转化合成的有机微量元素的质量与额外加的机微量元素质量的值，通常百分数表示。全国团体标准信息平台!#$%&()%)&7X X XYZYZYZX&_aa）微量元素是动物、发育、繁殖等过程中必需的营养素，在养殖过程中必须通过粮进。b）畜禽养殖中主要添加机微量元素，但其存在物学效价低，毒性，排泄污染严重等问题。c）化合成的有机微量元素存在艺复杂、条件苛刻、成本、品质难保证、缺乏科学检测法等问题。d）微物是泛存在于然界的物体，能够通过
11、物合成作将机态微量元素转化为有机态。因此，通过从然界中筛选微量元素耐性微物，并加以驯化进步提其耐受性，然后从中筛选对微量元素具有富集能的菌株，再次进驯化培养获得发酵菌株。最后通过培养基改造和发酵艺优化，达到效产物有机微量元素的的。X)bcdea）发酵所微物需符合饲料添加剂品种录（2013）相应要求。b）发酵所原料和添加剂需符合饲料原料录和饲料添加剂品种录(2013)以及相应的卫标准的要求。f f f9:gh9:gh9:gh利微物身合成功能产物有机微量元素，基本技术流程般为：初步筛选对微量元素具有耐受性的微物通过微量元素浓度梯度驯化进步提微物耐受性富集微量元素微物的筛选微量元素浓度梯度驯化进步提
12、微物富集能培养基改造（分为固态体系和液态体系）发酵艺优化产加成品检测出。f&ijklm./01.*+从然界中分离获得多种微物，并根据微物种类不同，制备相应筛选培养基，同时在培养基中加定量微量元素，制成初筛培养基，通过观察微物的情况挑选速度快、菌落积的微物为元素耐性微物。全国团体标准信息平台!#$%&()%)&分离微物所使的样品种类般有以下种：矿区壤、矿区、矿区植株及根部壤、畜禽肠道粪便等。初筛培养基般采实验室常的物试剂进制备，具体可参考 5.1.1-5.1.5 具体内容。f&m2noklpqr成分包括膏 5g、蛋胨 10g、氯化钠 5g、铁 300mg 溶解于蒸馏中并定容1000mL，调整 p
13、H 7.27.5。为了确保获得耐性菌株，挑选状态好的菌株进纯化培养，并在铁含量 300mg/L 的培养基上稳定传代 3 代次。f&)m4noklpqr成分包括膏 5g、蛋胨 10g、氯化钠 5g、铜 100mg 溶解于蒸馏中并定容1000mL，调整 pH6.87.0。为确保获得耐性菌株，筛选状态好的菌株进纯化培养，并在铜含量 100mg/L 的培养基上稳定传代 3 代次。f&Sm5noklpqr成分包括膏 5g、蛋胨 10g、氯化钠 5g、锌 300mg 溶解于蒸馏中并定容1000mL，调整 pH 6.87.2。挑选状况好的菌株进纯化培养，并在锌含量 300mg/L的培养基上稳定传代 3代次。
14、f&Xm6noklpqr成分包括膏 5g、蛋胨 10g、氯化钠 5g、锌 150mg 溶解于蒸馏中并定容1000mL，调整 pH 7.2。挑选状况好的菌株进纯化培养，并在锌含量 150mg/L 的培养基上稳定传代 3代次。f&fm7noklpqr成分包括酵膏5g、蛋胨10g、氯化钠5g、硒50g溶解于蒸馏中并定容1000mL，调整 pH 5.56.2。挑选状况好的菌株进纯化培养，并在硒含量 50g/L 的培养基上稳定传代 3代次。f)sm./01.*+tuvpq将 5.1 获得的耐性微物作为起始菌种，通过在更浓度梯度培养基上驯化培养，以达到更的耐性。该梯度培养基以起始菌种的耐受浓度为基准，按照
15、每梯度增加定的微量元素含量，制成微量元素梯度驯化培养基。选取每梯度下优势菌株，继续传代培养 35代次，待遗传稳定后（以菌株物量为依据），进更梯度的驯化培养。每次梯度驯化，都是以挑选菌株所在微量元素含量为基础，向更浓度梯度驯化，每个元素进全国团体标准信息平台!#$%&()%)&9 34轮的梯度驯化。具体培养基配置法及微物元素耐性驯化法可参考 5.2.1-5.2.5具体内容。f)&sm2.*+uvpqr为了进步提耐铁微物的耐铁能，采以下培养基进驯化培养：每升培养基中成分包括膏 5g、蛋胨 10g 和氯化钠 5g，并分别配制铁含量为 300、450、600、750、900、1050、1200、135
16、0、1500、1650、1800、1950、2100mg/L，调整 pH 7.27.5。经过 34轮的驯化后，挑选最铁含量培养基中的微物，并在该浓度培养基上传代培养 35代次。f)sm4.*+uvpqr为了进步提耐锌微物的耐锌能，采以下培养基进驯化培养：每升培养基中成分包括膏 5g、蛋胨 10g 和氯化钠 5g，并分别配制铜含量为 100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000mg/L，调整 pH6.87.0。经过 34 轮的驯化后，挑选最铜含量培养基中的微物，并在该浓度培养基上传代培养 35代次。f)Ssm5.*+uvpqr为了进步提耐锌微物的耐锌能，采以下培养基进驯化培养：每升培养基中成分包括膏 5g、蛋胨 10g 和氯化钠 5g，并分别配制锌含量为 300、450、600、750、900、1050、1200、1350、1500、1650、1800、1950、2100mg/L，调整 pH 6.87.2。经过 34轮的驯化后，挑选最锌含量培养基中的微物，并在该浓度培养基上传代培养