1、 ICS 67.220.10 B 36 GH 中 华 人 民 共 和 国 供 销 合 作 行 业 标 准 GH/T 12902020 花椒及花椒加工产品 花椒酰胺总含量的测定 紫外分光光度法 Prickly ash and its processed productsDetermination of total fagaramideUltraviolet spetrophotometry 2020-06-04 发布 2020-09-01 实施 中华全国供销合作总社 发 布 GH/T 12902020 I 前 言 本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。本标准的附录A是资料性附录。本标准
2、由中华全国供销合作总社提出。本标准由全国辛香料标准化技术委员会（SAC/TC 408）归口。本标准起草单位：中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究院、陕西为康食品科技股份有限公司、晨光生物科技集团股份有限公司、驻马店市王守义十三香调味品集团有限公司、山东百佳食品有限公司、青岛利和萃取股份有限公司、中国食品土畜进出口商会调料分会。本标准主要起草人：刘英杰、刘强、刘登帅、张慧、赵伯涛、刘继华、焦利卫、吴耀军、霍书香、王银良、王艳改、黄晓德、苏海、李漪、张永昌、孙西丽。GH/T 12902020 1 花椒及花椒加工产品 花椒酰胺总含量的测定 紫外分光光度法 1 范围 本标准规定了花椒及花椒加工
3、产品中花椒酰胺总含量的紫外分光光度测定方法。本标准适用于花椒及花椒加工产品的分析与检验。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 12729.2 香辛料和调味品取样方法 GB/T 12729.3 香辛料和调味品分析用粉末试样的制备 3 术语与定义 3.1 花椒加工产品花椒加工产品 prickly ash products 花椒经粉碎、萃取等工艺生产的产品。主要包括花椒粉、花椒油树脂、花椒油等以花椒为原料
4、加工的产品。3.2 花椒酰胺花椒酰胺 fagaramide 花椒呈麻味的主要成分，含有羟基-山椒素、羟基-山椒素、羟基-山椒素和羟基-山椒素等多种酰胺类成分。4 原理 花椒酰胺主要包含羟基-山椒素、羟基-山椒素、羟基-山椒素和羟基-山椒素等酰胺类组分，试样中的花椒酰胺成分经甲醇提取后，在270 nm波长具有最大吸收，吸光度与提取液中花椒酰胺的含量存在正相关性，不同类型样品的萃取液在270 nm的吸收系数不同，通过吸光度折算吸收系数法对样品中的花椒酰胺总量进行测定。5 试剂材料与仪器设备 5.1 试剂材料 5.1.1 甲醇：色谱纯。5.1.2 微孔滤膜：孔径为 0.22 m 有机相滤膜。5.2
5、仪器设备 GH/T 12902020 2 5.2.1 紫外可见分光光度计，带 1 cm 石英比色皿。5.2.2 分析天平，感量 0.0001 g。5.2.3 万能粉碎机，转速10000 rpm。5.2.4 组织捣碎机，转速300 rpm。5.2.5 恒温水浴锅。5.2.6 超声清洗器，超声功率 240 W。6 样品处理 6.1 干花椒 取混合均匀的花椒粒100 g，用万能粉碎机粉碎后过20目筛，混匀。称取1g(精确至0.0001 g）粉碎混匀后的样品置于烧瓶中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容量瓶中，甲醇定容，移取上清液10 mL于50 mL容量瓶定容，经
6、0.22 m滤膜过滤，待测。6.2 鲜花椒 取混合均匀的鲜花椒粒200 g。经组织捣碎机捣碎后，称取5 g(精确至0.000 1 g）粉碎混匀后的样品置于具塞烧瓶中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容量瓶中，甲醇定容，移取上清液10 mL于50 mL容量瓶定容，经0.22 m滤膜过滤，待测。6.3 花椒粉 称取1 g(精确至0.000 1 g）混匀后的样品置于具塞烧瓶中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容量瓶中，甲醇定容，移取上清液10 mL于50 mL容量瓶定容，经0.22 m滤膜过滤，待测。6.4 花椒油树脂 取膏状或
7、固体油树脂样品置于50 水浴锅中溶解，摇匀。精密称取0.2 g（精确至0.000 1 g）样品置于具塞烧杯中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容量瓶中，甲醇定容，经0.22 m滤膜过滤，待测。6.5 花椒油 精密称取花椒油0.2 g（精确至0.000 1 g）样品置于具塞烧瓶中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容量瓶中，甲醇定容，经0.22 m滤膜过滤，待测。7 测定 将样品液置于1 cm比色皿中，以甲醇为参比，测定270 nm处的吸光度，吸光度超出仪器测定范围的样品液应用甲醇稀释后测定。8 结果计算 试样中花椒酰胺含总量
8、以羟基-山椒素计，单位以毫克每克（mg/g）表示，按式（1）计算：GH/T 12902020 3 mEAKV.(1)式中：X样品中花椒酰胺类物质的含量，单位为毫克每克（mg/g）；A样品溶液270 nm处的吸光度；V定容体积，单位为毫升（mL）；K 样品溶液测定稀释的倍数；m样品质量，单位为克（g）；E吸光系数，1 mg/mL花椒酰胺溶液在270nm处的吸光值，其中花椒及花椒粉的系数为410，花椒油树脂及花椒油产品的系数为380。取重复性条件下绝对差值不大于算术平均值5%的两次独立测定结果的算术平均值为测定值。计算结果保留小数点后2位。GH/T 12902020 4 A A 附 录 A（资料性附录）典型紫外吸收图谱 A.1 羟基-山椒素的紫外吸收光谱见图A.1。图A.1 羟基-山椒素的典型紫外吸收光谱图 A.2 花椒样品的典型紫外吸收光谱见图A.2。图A.2 花椒样品的典型紫外吸收光谱图 00.511.5190210230250270290310330350370390Abs波长（nm）00.511.5190210230250270290310330350370390ABs波长（nm）_