1、ICSICS 67.05067.050 CCSCCS X X 6262 团团 体体 标标 准准 T/NAIA 01992023 葡萄酒软木塞中愈创木酚、葡萄酒软木塞中愈创木酚、2,4,6-2,4,6-三氯三氯苯甲醚和苯甲醚和 2,4,6-2,4,6-三溴苯甲醚的测定三溴苯甲醚的测定 气相色谱气相色谱/质谱法质谱法 Optimization of Headspace Solid-Phase Microextraction Coupled to GC/MS for the Determination of guaiacol,2,4,6-trichloroanisole and 2,4,6-trib
2、romoanisole in Wine Corks 2023-04-10 发布 2023-04-17 实施 宁夏化学分析测试协会宁夏化学分析测试协会 发发 布布 全国团体标准信息平台 T/NAIA 01992023 前前 言言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则规定编写。本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监管重点实验室（枸杞和葡萄酒质量安全）、宁夏工商职业技术学院、宁夏回族自治区食品质量监督检验二站、宁夏计量质量检验检测研究院、宁夏化学分析测试协会。本文件主要起草人：汤丽华
3、、李谦、刘继辉、章伟、岳娜、马桂娟、高琳、辛世华、赵瑞、王琛、陈盼盼、王泽岚、张小飞。本文件为首次发布。全国团体标准信息平台 T/NAIA 01992023 葡萄酒软木塞中愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚和 2,4,6-三溴苯甲醚的测定 气相色谱/质谱法 1 1 范围范围 本文件规定了葡萄酒软木塞中愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚和 2,4,6-三溴苯甲醚的气相色谱质谱检测方法。本文件适用葡萄酒软木塞中愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚和 2,4,6-三溴苯甲醚的定性和定量测定。2 2 规范性引用文件规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于
4、本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 SN/T 3940 食品接触材料 木质材料 软木中三氯苯甲醚和三溴苯甲醚的测定 气相色谱-质谱法 SN/T 4675.13 出口葡萄酒中 2,4,6-三氯苯甲醚残留量的测定 气相色谱-质谱法 3 3 术语和定义术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 4 方法提要方法提要 试样经乙醇溶液超声提取，经高温萃取后顶空固相微萃取进行富集，色谱柱分离，用气相色谱-质谱仪测定，特征离子定性，内标法/外标法定量。5 5 试剂和材料试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均
5、为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。5.5.1 1 试剂试剂 5.1.15.1.1 乙醇：色谱纯。5.1.25.1.2 甲醇：色谱纯。5.1.35.1.3 氯化钠：分析纯。5.1.45.1.4 乙醇溶液（6+44，体积比）：准确量取 60mL 无水乙醇，加入 440mL 水，混匀。5.25.2 标准品标准品 5.2.5.2.1 1 标准品：愈创木酚（guaiacol，CAS 号 90-05-1，C7H8O2）、2,4,6-三氯苯甲醚（2,4,6-trichloroanisole，CAS 号 87-40-1，C7H5Cl3O）、2,4,6-三溴苯甲醚（2,4,6-tribromoa
6、nisole，CAS 号 607-99-8，C7H5Br3O）、2,4,6-三氯苯甲醚-D5(2,4,6-trichloroanisole-D5，CAS 号 352439-08-8，C7Cl3O-D5)，纯度均99%。全国团体标准信息平台 T/NAIA 01992023 5.2.5.2.2 2 混合标准储备液：准确称取适量的标准品，用甲醇配制成浓度为 1000.0mg/L 的标准储备溶液，-18保存。5.2.35.2.3 混合标准工作液：根据需要，用乙醇溶液（5.1.4）配制适当浓度的标准工作液，临用现配。6 6 仪器和设备仪器和设备 6.16.1 气相色谱-质谱联用仪(GC/MS)。6.26
7、.2 分析天平：感量 0.1mg 和 0.01g。6.36.3 固相微萃取头：100m 聚二甲基硅氧烷。6.46.4 固相微萃取瓶：15mL。6.56.5 数显恒温磁力搅拌器：可温控。6.66.6 超声波清洗器。6.76.7 磁力搅拌子：1.5cm。7 7 分析步骤分析步骤 7.17.1 试样制备试样制备 取代表性样品 50g，将其制成粒径约为 10mm 的颗粒，混匀。7.27.2 试液的提取试液的提取 称取试样 2.0 g（精确到 0.01g）置于锥形瓶中，加入乙醇溶液（5.1.4）30mL 使其浸没在液面以下，超声提取 30min，浸泡 24 小时，提取液待测。取 10mL 软木塞提取液置
8、于萃取瓶中，加入 10g/mL 的内标使用液 50L 和 3g 氯化钠，放入磁力搅拌子后拧紧瓶盖在涡旋混合器上混匀（内标上机浓度为 50ng/L），置于 40的数显恒温磁力搅拌器中，保持 5min 后用固相微萃取手柄的保护针管刺穿瓶盖橡胶垫，插入萃取瓶内顶空中，推出萃取头置于溶液上方。控制萃取温度为 40，萃取 40min 后收回萃取头拔出保护针管，插入气相色谱仪进样口解吸 5min，按仪器工作条件进行测定，愈创木酚采用外标法定量，2,4,6-三氯苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚采用内标法定量。7.7.3 3 仪器参考条件仪器参考条件 7.3.17.3.1 气相色谱参考条件气相色谱参考条件 7.
9、3.1.1 色谱柱：HP-5MS，柱长：30 m；内径：0.25 mm；膜厚：0.25m 或性能相当。7.3.1.2 进样口温度：280。7.3.1.3 程序升温：初始柱温 50，保持 2 min；以 9/min 升温至 130，保持 1min；再以 4/min升温至 150,保持 0min；最后以 20/min 升温至 260，保持 10min。7.3.1.4 进样方式：不分流进样。7.3.1.5 进样量：1L。7.3.27.3.2 质谱参考条件质谱参考条件 7.3.2.1 电离方式：电子轰击电离源(EI)。7.3.2.2 传输线温度：250。7.3.2.3 离子源温度：230。7.3.2.
10、4 电子能量：70eV。全国团体标准信息平台 T/NAIA 01992023 7.3.2.5 监测方式：选择离子扫描(SIM)。监测离子参见附录 A。7.47.4 定量测定定量测定 根据试液中被测物含量情况，选定浓度相近的混合标准工作液，混合标准工作液和待测试液中被测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内。混合标准工作液和待测试液均按 7.2 和 7.3 规定条件进行测定，如果试液中与混合标准工作液在相同的保留时间有峰出现，则对其进行确证，愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚的参考保留时间见表 1。愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚标准品的总离子流图参见
11、附录 B，内标法/外标法定量。表 1 参考保留时间 被测物名称 保留时间/（min）愈创木酚 7.854 2,4,6-三氯苯甲醚 12.529 2,4,6-三溴苯甲醚 18.487 7.57.5 定性测定定性测定 经确证分析被测物色谱峰保留时间与标准物质相一致，并且在扣除背景后的样品谱图中，所选择的离子均出现。同时所选择离子的丰度比与标准样物质相关离子的相对丰度一致，相似度在允许偏差之内，见表 2，则可判定样品中存在对应的被测物。表 2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 50 20至 50 10至 20 10 允许的相对偏差 20 25 30 50 7.67.6 空白试验空白
12、试验 除不加试样外，均按上述步骤进行。8 8 分析结果的表述分析结果的表述 试液中被测物含量按式（1）进行计算：式中：X 试样中被测物含量，单位为微克每千克（g/kg）；c 试液测定浓度，单位为纳克每升（ng/L）；c0 空白溶液浓度，单位为纳克每升（ng/L）；v 样本提取溶液体积，单位为毫升（mL）；m 试样质量，单位为克（g）。注：测定结果用平行测定的算数平均值表示，保留三位有效数字。9 9 精密度精密度）（13110000mvccX全国团体标准信息平台 T/NAIA 01992023 在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。1010 定量限定量限
13、 本方法愈创木酚的定量限为 0.375g/kg，2,4,6-三氯苯甲醚的定量限为 0.075g/kg，2,4,6-三溴苯甲醚的定量限为 0.075g/kg。全国团体标准信息平台 T/NAIA 01992023 附录附录 A A(资料性附录资料性附录)愈创木酚、愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚、三氯苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚、三溴苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚三溴苯甲醚-D5 的质谱参数的质谱参数 表 A.1 愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚-D5 的质谱参数 被测物名称 定量离子(m/z)定性离子(m/z)愈创木酚 109 81,124,109 2,4,6-三氯苯甲醚 195 210,212,195 2,4,6-三溴苯甲醚 344 301,329,344 2,4,6-三溴苯甲醚-D5 199 217,215,199 全国团体标准信息平台 T/NAIA 01992023 附录附录 B (资料性附录资料性附录)愈创木酚、愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚、三氯苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚的总离子流图三溴苯甲醚的总离子流图 图 B.1 愈创木酚、2,4,6-三氯苯甲醚、2,4,6-三溴苯甲醚的总离子流图 全国团体标准信息平台