1、ICS 65.120 B 46 DB37 山东省地方标准 DB 37/T 22242012 饲料酸化剂中乳酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、磷酸和柠檬酸的测定 离子色谱法 Determination of lactic acid、malic acid、tartaric acid、fumaric acid、phosphoric acid and citric acid in feed acidulant by ion chromatography 2012-12-19 发布 2013-01-01 实施山东省质量技术监督局 发 布山东省地方标准公开山东省地方标准公开 DB37/T 22242012 前
2、言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位：山东省饲料质量检验所。本标准主要起草人：梁萌、战余铭、门晓东、朱良智、刘继明、杨志强。山东省地方标准公开山东省地方标准公开DB37/T 22242012 1 饲料酸化剂中乳酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、磷酸和柠檬酸的测定 离子色谱法 1 范围 本标准规定了离子色谱法测定饲料酸化剂中乳酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、磷酸和柠檬酸含量的测定方法。本标准适用于饲料酸化剂中乳酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、磷酸和柠檬酸含量的同步测定。本标准定量限：乳酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、磷酸和柠檬酸的
3、定量限为500 mg/kg。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。GB/T 14699.1 饲料 采样 3 方法原理 用水溶解或提取试样中的酸，将提取液稀释至合适的浓度后，以氢氧化钾溶液为淋洗液，用阴离子交换分离柱和电导检测器进行分离测定。4 试剂和材料 4.1 除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合 GB/T 6682 规定的一级水。4.2 流动相：氢氧化钾溶液，梯度洗脱，见表 1。4.3
4、乳酸标准品：纯度98%。4.4 苹果酸标准品：纯度98%。4.5 酒石酸标准品：纯度98%。4.6 富马酸标准品：纯度98%。4.7 磷酸标准品：纯度98%。4.8 柠檬酸标准品：纯度98%。4.9 混合标准储备溶液：分别称取乳酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、磷酸和柠檬酸的标准品约 0.1g（精确至 0.0001 g），置于 100mL 容量瓶中，用水溶解，定容。此混合标准储备溶液中乳酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、磷酸和柠檬酸的浓度均为 1mg/mL。4条件下保存 1 个月。4.10 混合标准工作溶液：准确移取混合标准储备溶液（4.8）适量，置于 100 mL 容量瓶中，用水定容。使混合标准工作溶液
5、中乳酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、磷酸和柠檬酸的浓度分别为 2.00g/mL、5.00g/mL 10.0g/mL、20.0g/mL、50.0g/mL。现用现配。4.11 0.45m 无机滤膜。山东省地方标准公开山东省地方标准公开DB37/T 22242012 2 5 仪器 5.1 离子色谱仪：具淋洗液自动发生器、阴离子抑制器和电导检测器。5.2 分析天平：感量 0.0001g。5.3 电动震荡器。6 采样 按GB/T 14699.1的规定执行。7 测定 7.1 试样制备 7.1.1 液体试样制备 称取试样1g，精确到0.0001g，置于250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。若样品中酸含量较高
6、，可进一步稀释,使其最终浓度在2.00g/mL50.0g/mL范围内。用0.45m无机滤膜（4.10）过滤，供离子色谱分析用。7.1.2 固体试样制备 称取试样1g，精确到0.0001g，置于250 mL容量瓶中，加入约150mL水，在电动振荡器上剧烈震荡30 min，用水稀释至刻度，摇匀后过滤。若样品中酸含量较高，可将提取液进一步稀释，使其最终浓度在2.00g/mL50.0g/mL范围内。用0.45m无机滤膜（4.10）过滤，供离子色谱分析用。7.2 离子色谱参考条件 色谱柱：1)Ionpac AS11-HC离子色谱柱，长250mm，内径4mm，或性能类似的分析柱；流动相：梯度洗脱程序见表1
7、。表1 梯度洗脱程序 时间 min 氢氧化钾浓度 mmol/L 0.0 15.0 10.0 15.0 11.0 30.0 23.0 30.0 24.0 15.0 27.0 15.0 流速：1mL/min；1)Ionpac AS11-HC 离子色谱柱是由美国戴安公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。山东省地方标准公开山东省地方标准公开DB37/T 22242012 3 柱温:30；进样量:25L；检测器:电导检测器。7.3 测定 将待测试液和混合标准工作溶液分别注入离子色谱仪，以单点或多点校正。
8、根据保留时间定性，以峰面积定量。离子色谱条件下有机酸标准工作溶液的离子色谱图参见附录A。8 结果计算 试样中某一酸含量Xi，以毫克每千克(mg/kg)表示，按式（1）计算：1000mi=siiiiPnCPX.(1)式中：Pi 试样溶液峰面积值；Ci 标准溶液的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；Psi 标准溶液峰面积值；ni 试样溶液的稀释倍数；m 试样的质量，单位为克（g）。平行测定结果用算术平均值表示，计算结果保留三位有效数字。9 精密度 在重复性条件下，两次独立测定结果的的绝对差值不得超过算数平均值的10%。山东省地方标准公开山东省地方标准公开DB37/T 22242012 4 AA 附 录 A（资料性附录）有机酸混合标准溶液的离子色谱图 图A.1 有机酸混合标准溶液离子色谱图（10.0 g/mL）0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.012.014.016.018.020.022.0 24.0 27.0-1.0 10.0 ECD_1min乳酸 苹果酸 酒石酸富马酸磷酸柠檬酸 _ 山东省地方标准公开山东省地方标准公开