1、 中华人民共和国国家环境保护标准 中华人民共和国国家环境保护标准 HJ 6342012 土壤 氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定 氯化钾溶液提取-分光光度法 Soil-Determination of ammonium,nitrite and nitrate by extraction with potassium chloride solution-spectrophotometric methods （发布稿）本电子版为发布稿。请以中国环境科学出版社出版的正式标准文本为准。2012-02-29 发布 2012-06-01 实施环 境 保 护 部 环 境 保 护 部 发布发布 I 目 次 前
2、言 II 1 适用范围 1 2 规范性引用文件 1 3 方法原理 1 4 试剂和材料 1 5 仪器和设备 4 6 样品 5 7 分析步骤 5 8 结果计算与表示 7 9 精密度和准确度 8 10 质量保证和质量控制 9 附录 A（资料性附录）本标准与 ISO/TS 14256-1:2003（E）的章条编号对照 10 附录 B（资料性附录）本标准与 ISO/TS 14256-1:2003（E）的技术性差异及其原因 12 附录 C（资料性附录）还原柱的制备 13 II前 言 为贯彻中华人民共和国环境保护法，保护环境，保障人体健康，规范土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定方法，制订本标准。本标准规
3、定了测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的氯化钾溶液提取分光光度法。本标准的技术内容为修改采用土壤质量 硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、氨氮的测定 氯化钾溶液提取法（ISO/TS 14256-1:2003（E）。附录 A 给出了本标准与 ISO/TS 14256-1:2003（E）章条编号对照一览表，附录 B 给出了本标准与 ISO/TS 14256-1:2003（E）的技术性差异及其原因。本标准为首次发布。本标准附录 A附录 C 为资料性附录。本标准由环境保护部科技标准司组织制订。本标准主要起草单位：鞍山市环境监测中心站。本标准环境保护部 2012 年 2 月 29 日批准。本标准自 2012 年 6
4、 月 1 日起实施。本标准由环境保护部解释。1土壤 氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定 氯化钾溶液提取-分光光度法 1 适用范围 本标准规定了测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的氯化钾溶液提取分光光度法。本标准适用于土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定。当样品量为 40.0 g 时，本方法测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的检出限分别为0.10 mg/kg、0.15 mg/kg、0.25 mg/kg，测定下限分别 0.40 mg/kg、0.60 mg/kg、1.00 mg/kg。2 规范性引用文件 本标准内容引用了下列文件中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准 HJ 16
5、8 环境监测 分析方法标准制修订技术导则 HJ 613 土壤 干物质和水分的测定 重量法 HJ/T 166 土壤环境监测技术规范 ISO/TS14256-1 土壤质量 硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、氨氮的测定 氯化钾溶液提取法（Soil quality-Determination of nitrate,nitrite and ammonium in field-moist soils by extraction with potassium chloride solution）3 方法原理 3.1 氨氮 氯化钾溶液提取土壤中的氨氮，在碱性条件下，提取液中的氨离子在有次氯酸根离子存在时与苯酚反应生成蓝色
6、靛酚染料，在 630 nm 波长具有最大吸收。在一定浓度范围内，氨氮浓度与吸光度值符合朗伯-比尔定律。3.2 亚硝酸盐氮 氯化钾溶液提取土壤中的亚硝酸盐氮，在酸性条件下，提取液中的亚硝酸盐氮与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料，在波长 543nm 波长具有最大吸收。在一定浓度范围内，亚硝酸盐氮浓度与吸光度值符合朗伯-比尔定律。3.3 硝酸盐氮 氯化钾溶液提取土壤中的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮，提取液通过还原柱，将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，在酸性条件下，亚硝酸盐氮与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料，在波长 543 nm 处具有最
7、大吸收，测定硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量。硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量与亚硝酸盐氮含量之差即为硝酸盐氮含量。4 试剂和材料 2除非另有注明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为电导率小于 0.2 mS/m（25时测定）的去离子水。4.1 氨氮 4.1.1 浓硫酸：（H2SO4）=1.84 g/ml。4.1.2 二水柠檬酸钠（C6H5Na3O72H2O）。4.1.3 氢氧化钠（NaOH）。4.1.4 二氯异氰尿酸钠（C3Cl2N3NaO3H2O）。4.1.5 氯化钾（KCl）：优级纯。4.1.6 氯化铵（NH4Cl）：优级纯 于 105 下烘干 2 h。4.1.7 氯化钾溶液：c（KCl）=
8、1 mol/L 称取 74.55 g 氯化钾（4.1.5），用适量水溶解，移入 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。4.1.8 氯化铵标准贮备液：（NH4Cl）=200 mg/L 称取 0.764 g 氯化铵（4.1.6），用适量水溶解，加入 0.30 ml 浓硫酸（4.1.1），冷却后，移入 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。该溶液在避光、4 下可保存一个月。或直接购买市售有证标准溶液。4.1.9 氯化铵标准使用液：（NH4Cl）=10.0 mg/L 量取 5.0 ml 氯化铵标准贮备液（4.1.8）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。4.1.10 苯酚溶液
9、称取 70 g 苯酚（C6H5OH）溶于 1000 ml 水中。该溶液贮存于棕色玻璃瓶中，在室温条件下可保存一年。注：配制苯酚溶液时应避免接触皮肤和衣物。4.1.11 二水硝普酸钠溶液 称取 0.8 g 二水硝普酸钠Na2Fe（CN）5NO2H2O溶于 1000 ml 水中。该溶液贮存于棕色玻璃瓶中，在室温条件下可保存三个月。4.1.12 缓冲溶液 称取 280 g 二水柠檬酸钠（4.1.2）及 22.0 g 氢氧化钠（4.1.3），溶于 500 ml 水中，移入1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。4.1.13 硝普酸钠-苯酚显色剂 量取 15 ml 二水硝普酸钠溶液（4.1.11）及
10、15 ml 苯酚溶液（4.1.10）和 750 ml 水，混匀。该溶液用时现配。4.1.14 二氯异氰尿酸钠显色剂 称取 5.0 g 二氯异氰尿酸钠（4.1.4）溶于 1000 ml 缓冲溶液（4.1.12）中，4下可保存一个月。4.2 亚硝酸盐氮 4.2.1 浓磷酸：（H3PO4）=1.71 g/ml。34.2.2 氯化钾（KCl）：优级纯。4.2.3 亚硝酸钠（NaNO2）：优级纯 干燥器中干燥 24 h。4.2.4 氯化钾溶液：c（KCl）=1 mol/L 同4.1.7。4.2.5 亚硝酸盐氮标准贮备液：（NO2-N）=1000 mg/L 称取 4.926 g 亚硝酸钠（4.2.3），用
11、适量水溶解，移入 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。该溶液贮存于聚乙烯塑料瓶中，4 下可保存六个月。或直接购买市售有证标准溶液。4.2.6 亚硝酸盐氮标准使用液：（NO2-N）=100 mg/L 量取 10.0 ml 亚硝酸盐氮标准贮备液（4.2.5）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。4.2.7 亚硝酸盐氮标准使用液：（NO2-N）=10.0 mg/L 量取 10.0 ml 亚硝酸盐氮标准使用液（4.2.6）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。4.2.8 磺胺溶液（C6H8N2O2S）向 1000 ml 容量瓶中加入 600 ml 水，再加入 20
12、0 ml 浓磷酸（4.2.1），然后加入 80g 磺胺。用水定容，混匀。该溶液于 4下可保存一年。4.2.9 盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺溶液 称取 0.40 g 盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺（C12H14N22HCl）溶于 100 ml 水中。4下保存，当溶液颜色变深时应停止使用。4.2.10 显色剂 分别量取 20 ml 磺胺溶液（4.2.8）、20 ml 盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺溶液（4.2.9）、20 ml浓磷酸（4.2.1）于 100 ml 棕色试剂瓶中，混合。4下保存，当溶液变黑时应停止使用。4.3 硝酸盐氮 4.3.1 浓磷酸：（H3PO4）=1.71 g/ml。4.3
13、.2 浓盐酸：（HCl）=1.12 g/ml。4.3.3 镉粉：粒径 0.3 mm0.8 mm。4.3.4 氯化钾（KCl）：优级纯。4.3.5 硝酸钠（NaNO3）：优级纯 干燥器中干燥 24 h。4.3.6 亚硝酸钠（NaNO2）：优级纯 同 4.2.3。4.3.7 氯化铵（NH4Cl）。4.3.8 硫酸铜（CuSO4.5H2O）。4.3.9 氨水（NH4OH）：优级纯。4.3.10 氯化钾溶液：c（KCl）=1 mol/L 同 4.1.7。4.3.11 硝酸盐氮标准贮备液：（NO3-N）=1000 mg/L 4称取 6.068 g 硝酸钠（4.3.5），用适量水溶解，移入 1000 ml
14、 容量瓶中，用水定容，混匀。该溶液贮存于聚乙烯塑料瓶中，4下可保存六个月。或直接购买市售有证标准溶液。4.3.12 硝酸盐氮标准使用液：（NO3-N）=100 mg/L 量取 10.0 ml 硝酸盐氮标准贮备液（4.3.11）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。4.3.13 硝酸盐氮标准使用液：（NO3-N）=10.0 mg/L 量取 10.0 ml 硝酸盐氮标准使用液（4.3.12）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。4.3.14 硝酸盐氮标准使用液：（NO3-N）=6.0 mg/L 量取 6.0 ml 标准使用液（4.3.12）于 100 ml 容量瓶中
15、，用水定容，混匀。用时现配。4.3.15 亚硝酸盐氮标准贮备液：（NO2-N）=1000 mg/L 同 4.2.5。4.3.16 亚硝酸盐氮标准中间液：（NO2-N）=100 mg/L 同 4.2.6。4.3.17 亚硝酸盐氮标准使用液：（NO2-N）=6.0 mg/L 量取 6.0 ml 亚硝酸盐氮标准中间液（4.3.16）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。4.3.18 氨水溶液：（1+3）。4.3.19 氯化铵缓冲溶液贮备液：（NH4Cl）=100 g/L 将 100 g 氯化铵（4.3.7）溶于 1000 ml 容量瓶中，加入约 800 ml 水，用氨水溶液（4.3.
16、18）调节 pH 值为 8.78.8，用水定容，混匀。4.3.20 氯化铵缓冲溶液使用液：（NH4Cl）=10 g/L 量取 100 ml 氯化铵缓冲溶液贮备液（4.3.19）于 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。4.3.21 磺胺溶液 同 4.2.8。4.3.22 盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺溶液 同 4.2.9。4.3.23 显色剂 同 4.2.10。5 仪器和设备 5.1 分光光度计：具 10 mm 比色皿。5.2 pH 计：配有玻璃电极和参比电极。5.3 恒温水浴震荡器：振荡频率可达 40 次/分钟。5.4 还原柱：用于将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，具体制备方法见附录 C。5.5 离心机：转速可达 3000 r/min，具 100 ml 聚乙烯离心管。5.6 天平：精度为 0.001 g。5.7 聚乙烯瓶：500ml，具螺旋盖。或采用既不吸收也不向溶液中释放所测组分的其他容器。55.8 具塞比色管：20 ml、50 ml、100 ml。5.9 样品筛：5 mm。5.10 一般实验室常用仪器和设备。6 样品 6.1 样品的采集 按照 HJ/T 166 的相关规定采集样品。