1、农业部783号公告一2一2006前言本标准的附录A为资料性附求本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出。本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归，本标准起草单位：上海水产大学，中国水产科学研究院东海水产研究所。本标准主要起草人：杨先乐、制纪、杨勇、李怡、房文红、于慧娟。人农业部783号公告一2一20065.2高速组织捣碎机。5.3旋转蒸发仪。5.4离心机，4500r/min5.5振荡器。5.6离心管：10mL,具塞并带划度。5.7三角烧瓶：150mL5.8分液漏斗：100mL5.9微孔滤膜：0.45um6测定6.1制备鱼，去鳞、去皮，沿脊背取肌肉：虾，去壳，取肌肉部分：贝类，去六
2、，取可食用部分（包括体液）。样品均质混匀，备用6.2提取准确称取样品5g(精确到0.01g),依次加人30g无水硫酸钠和30mL酸化乙腈，用高速组织捣码机匀浆。将匀浆样品置于带玻商珠的三角瓶中(2粒3粒/瓶)，经摇床振荡15min(120r/min),再转入离心管中，4500r/min离心15min,取上清液。往残渣中加入30ml,凌化乙腈，重复上述操作一次，合并上清液。6.3净化和浓缩将上清液置于分液漏斗中，加人25mL正已烷，振荡5mi,充分净置，取下层乙腈层移入烧瓶，55旋转蒸发至干。用1.0mL流动相充分溶解残渣，移入1.5mL离心管，4500r/min离心5min,取上清液，经0.4
3、5m微孔滤膜过滤，滤液供高效液相色谱仪测定。6.4色谱条件6.4.1色谱柱：反相色谱柱(、柱(150mm4.6mm)或相当性能6.4.2流动相：乙腈：四丁基溴化铵溶液=5：95(V/V)。6.4.3流速：1.5 mL/min。.6.4.4激发波长：280nm,发射波长450nmo6.4.5柱温：40。6.4.6进样量：20L。6.5色谱测定根据样品中诺氟沙星、环内沙星、恩诺沙星残留量，选定标准丁作：溶液浓度范围。对标准工作溶液和样液等体积参插进样进行测定。在6.4规定的条件下，诺氟沙是保留时间约为4.8m,环丙沙星保留时间约为5.5min,恩诺沙星9.4min(参见附录A)6.6空白对照试验除
4、不加试样外，均按测定少聚进行。7结果计算与表述根据标准工作液和样液的峰面积，按式(1)计算样品中诺氟沙早、环丙沙星、恩诺沙星残留量，计算结果需扣除空白值：C=C(e-en)V1000EX m(12农业部783号公告一2一2006式中：C一样品中诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星残留量，单位为微克每千克(gkg):一样液中诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星的峰面积：,一标准工作溶液中诺氯沙是、环丙沙星、恩诺沙星峰面积：co一空白试验的峰面积：Cs一标准工作溶液中诺氟沙是、环丙沙星、恩诺沙星的浓度，单位为微克每毫升(g/mL):V一样品最终定容体积，单位为毫升(mL):样品的称取量，单位为克(g)。3线性范围
5、、检出限、回收率、精密度3.1线性范围诺氟沙星标准工作液线性范围为0.02gmL一5.00gmL:环丙沙星标准工作液线性范围为0.004g/mL4.00gmL:恩诺沙星标准工作液线性范围为0.02gmL5.00g/mL。8.2检出限诺氟沙星的最低检出浓度可达到5.0gkg,环丙沙星的最低检出浓度可达到1.0g/kg,恩诺沙星的最低检出浓度可达到5.0gkg8.3回收率诺氟沙星的回收率为68.5%81.3%：环丙沙星的回收率为65.0%83.4%；恩诺沙星的回收率为70.0%-80.5%。8.4精密度诺氟沙星的精密度为2.62%-7.09%：环丙沙星的精密度为2.63%5.95%：恩诺沙星的精密度为1.24%7.95%。3