1、ICS65.150B51备案号：38080-2013DB46海南省地方标准DB 46/ T 2552013马氏珠母贝插核育珠技术规程Technical regulations for nucleus-inserting and pearl production of pearl oyster Pinctada fuctada martensii (Dunker)2013 - 07 - 10发布2013 - 08 - 01实施海南省质量技术监督局发布DB46/ T 2552013前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由海南省海洋与渔业厅提出。本标准起草单位：海南大学、海南
2、省海钰珍珠研究院。本标准起草人：冯永勤、周永灿、谢珍玉、王世锋、方再光。6马氏珠母贝插核育珠技术规程1 范围本标准规定了马氏珠母贝Pinctada fuctada martensii (Dunker)插核育珠技术规程的术语和定义、术前处理、栓口、细胞小片制作、插核、术后休养和育珠。本规程适用于马氏珠母贝插核育珠技术操作。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY 5052 无公害食品 海水养殖用水水质DB46/T 13 海水养殖珍珠3 术语和定义下列术语和定
3、义适用于本文件。3.1母贝壳长3 cm以上尚未进行插核手术的贝的统称。3.2小片贝用于制作外套膜细胞小片的母贝。3.3育珠贝经过人工插核手术，在贝体内已植入珠核及细胞小片后用于培育珍珠的成贝。3.4插核在珍珠贝体内植入珠核及细胞小片的操作过程。3.5术前处理母贝性腺发育初期或生理机能过强时，采取抑制性腺发育和减弱生理机能强度；母贝生殖腺过于饱满时，采取促进生殖细胞排放等处理措施。3.6休养期母贝插核手术后经过20 d30 d的休养恢复期。3.7育珠期母贝插核手术后，经过休养、珍珠育成至收获的全过程。3.8壳长 由贝壳的前端至后端的最大距离。3.9壳高 由贝壳顶端至腹缘的最大距离。3.10壳宽左
4、右两壳间的最大距离。3.11体重 贝个体的湿重量。4 术前处理4.1 抑制性腺发育及生理机能强度的方法4.1.1 塑料筐吊养处理法塑料筐为长方形，规格为长40 cm、宽30 cm、高16 cm，四周有长方形的孔，孔长1.5 cm、宽0.8 cm，每筐装入母贝6080个，吊养水深3 m5 m，吊养时间15 d30 d。4.1.2 网笼吊养处理法用网目2 mm的聚乙烯网布缝制成长110 cm、宽60 cm的网袋，在网袋内套入两个直径32 cm的锥形贝笼，每笼装入母贝40个，吊养水深3 m5 m，吊养时间7 d15 d。4.2 促进生殖细胞排放的方法按照4.1.1的吊养方法，选择晴天气温较高时将塑料
5、筐提升至水深0.5 m的水层，第二天再将塑料筐下降至水深3 m5 m水层，以此方法连续操作34次，利用水温变动刺激生殖细胞排放；经检查大部分生殖细胞已排放之后，将母贝再次深吊于水深5 m水层，吊养3 d5 d后用于插核施术。5 栓口5.1 插核贝的选择选择1.52.5龄母贝，壳高6.5 、壳宽2.3 以上，体重大于38 g，贝体健壮，植核部位较大并疏松。5.2 清贝先用清贝刀切断母贝足丝和清除贝壳表面的附着生物，再用海水冲洗贝壳表面的污泥。5.3 排贝将母贝腹缘向上紧密排列于排贝笼内，为使插核贝之间尽可能没有缝隙，把个别贝腹缘向下倒插于两贝之间，然后将排贝笼吊养于海区2 h3 h。5.4 栓口
6、 将排贝笼中的母贝稍松开，当母贝自然张壳时,用开口器张开贝壳，然后在两壳间塞入宽1.3 cm1.5 cm的木塞，或用开口器张开贝壳后直接放于插核台手术。6 细胞小片制作6.1 小片贝的选择选择1.5龄至2龄、壳长6.5 cm以上、贝体健康、贝壳珍珠层呈银白色、外套膜自然伸展至贝壳边缘、外套膜厚薄适中的母贝作为制作细胞小片的小片贝。6.2 切取外套膜剖开小片贝，用剪刀剪取从唇瓣下方至肛门腹面的外套膜，剪取路线为外套膜肌集束端与色线之间。然后用小片刀以色线为中间，按内、外各占一半比例把外套膜切成长条形。外套膜边缘触手应切除干净。6.3 抹片把切成长条状的外套膜放置于玻璃板或质地坚实的光滑木板上，用
7、湿棉花球抹去外套膜两面的粘液，在分泌珍珠质的一面（称正面，即自然生长时外套膜紧贴贝壳的一面）应轻抹，避免损伤分泌珍珠质的组织细胞。6.4 切小片用小片刀将经抹片的长条形外套膜切成方形或近方形的小片，小片边长根据拟植入的珠核大小而定，直径7.5 mm8.5 mm的珠核，小片边长为2.6 mm3.0 mm；直径6.5 mm7.5 mm的珠核，小片边长为2.3 mm2.6 mm；直径5.0 mm6.5 mm的珠核，小片边长为2.0 mm2.3 mm。6.5 消毒与染色使用医用红汞药水配成3海水溶液，然后滴于小片上染色与消毒。6.6 小片使用时间小片制作完成后，应在20 min以内使用完。7 插核7.
8、1 切口将插核贝安放于插核台后，先判别是否适宜进行插核手术。对适宜手术的插核贝，用开口刀在其足基部黑白处切开一弧形切口，切口宽度以稍小于珠核直径为宜，刀口深度应不伤及足丝腺。7.2 通道使用通道针往“左袋”（腹嵴与肠管之间部位）和“右袋”（围心腔与泄殖孔之间部位）进行通道，通道路径紧靠表皮下面前进，不应伤及肠管和消化肓囊。7.3 插核7.3.1 核位核位包括“左袋”和“右袋”，“左袋”位于缩足肌腹面，腹嵴与肠管之间；“右袋”位于围心腔与泄殖孔之间。7.3.2 珠核规格拟植入珠核的规格根据插核贝的壳高来确定，具体见表1：表1 插核贝的壳高与植入珠核规格插核贝壳高cm植入单核规格mm植入双核规格m
9、m左袋左袋右袋6.57.06.67.26.06.55.06.07.07.57.27.56.57.06.06.57.58.07.58.07.08.06.57.08.09.08.08.58.08.57.07.57.3.3 送核先向“左袋”部位送核，用送核器吸住珠核1/3面积部位，沿着通道向“左袋”核位前进，当珠核到核位时，用送核器向核位轻压珠核，使珠核埋植于核位内，埋植深度以从腹嵴表皮观察珠核不造成表皮隆起为准。“右袋”部位送核，只用送核器沿通道送至“右袋”核位即可。一个插核贝只植单核部位为“左袋”，植双核为部位为“左袋”和“右袋”。7.4 送小片送小片有“先送小片法”和“后送小片法”两种，“先送
10、小片法”为先送小片后送核; “后送小片法”为先送核后送小片。“先送小片法”应把分泌珍珠质的细胞面向上，用小片针把小片分别送至左袋和右袋核位即可；“后送小片法”是将分泌珍珠质的细胞向下，用小片针把小片送至珠核表面后，沿着珠核把小片移至珠核后端下方，使珠核紧压住小片。7.5 暂养完成插核手术后的育珠贝先放于休养笼中，然后放置于插核室水槽中或吊养于插核室附近的贝架上暂养。8 术后休养8.1 休养笼具休养笼具有锥形休养网笼和方型塑料笼两种，锥形笼底部直径32 cm、高20 cm，网笼底部用网目2 mm的聚乙烯网布包住，上方为3 cm网目的聚乙烯网；塑料笼规格长40 cm、宽35 cm、高16 cm，其
11、四周有长方形孔，孔长1.5 cm、宽0.8 cm。8.2 放养密度锥形休养笼放养手术贝40个；方型塑料休养笼放养手术贝60个。休养贝选择风平浪静、潮流缓慢的海区吊养，吊养水深3 m4 m。8.3 休养期管理插核手术后第2 d至第7 d，每天检查死亡情况。检查时把贝笼提至表层，如发现死亡个体应尽快捡出，并清除贝笼中的污物，记录死亡贝数及吐出的珠核数。检查操作过程速度应快、轻，尽量减少对插核手术贝的刺激。8.4 贝体康复判定休养贝体康复时，贝壳腹缘生长出新鳞片，有新的足丝分泌，贝体软体部黑色素恢复到手术前的状态。8.5 休养时间休养时间一般为20 d30 d。9 育珠9.1 育珠海区条件的要求育珠
12、贝养殖场所应选择风浪比较小，潮流比较畅通的海区，水深5 m以上，底质为沙、砾石或沙泥，受台风影响较小的海区；且要求养殖海区的海水盐度2535，冬季水温不低于13 ，夏季水温不高于30 。海水水质应符合NY 5052 的规定。9.2 育珠贝笼具聚乙烯锥形网笼，筐底直径32 、高20 ，网目长度3 ；聚乙烯片状网笼，长70 cm、宽40 cm，网目4 cm。9.3 育珠贝放养密度聚乙烯锥形网笼，每笼放养休养期结束后的育珠贝30个；聚乙烯片状网笼，每笼放养育珠贝4045个。9.4 育珠贝的管理9.4.1 清贝根据贝笼附着物情况，每14个月换笼和清除育珠贝体表附着物1次。清贝时应避免阳光曝晒及露空时间过长，清除的附着物不应倒入海中。9.4.2 调节吊养深度夏季高温期、暴雨季节和冬季低温期吊养于4 m5 m水层，温度适宜时，吊养于2 m3 m的水层。9.5 育珠期育珠期1218个月。9.6 收珠珠层厚度0.4 mm以上，抽样检查珍珠层形成的厚度符合DB46/T 13的要求后方可收珠。_