1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T 1 3 7 0-2 0 0 4日本 金 龟 子 检 疫 鉴 定 方 法Me t h o d s f o r q u a r a n t i n e a n d i d e n t i f i c a t i o n o f J a p a n e s e b e e t le (P o p i l l i a j a p o n i c a N e w m a n)2 0 0 4-0 6-0 1 发布2 0 0 4-1 2-0 1 实施中华人民共和国国 家 质量 监 督检 验 检 疫 总 局发 布S N/T 1 3 7 0-2 0 0 4月 U吕
2、本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国山东出人境检验检疫局。本标准主要起草人:赖凡、魏晓棠、杜琦、陈长法、王岩。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。S N/T 1 3 7 0-2 0 0 4日 本 金 龟 子 检 疫 鉴 定 方 法范围本标准规定了日 本金龟子的检疫和鉴定方法。本标准适用于日本金龟子的检疫和鉴定。2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。2.1 阳基侧突p a r a me r e 为雄性外生殖器的组成部分。位于阳茎片的前端背方，由左右两侧突片组成。2.2 额唇基沟 t r o n t o c l y
3、p e a l s u t u r e 位于两上颖的前关节之间，是额和唇基的分界线。2.3 内阳茎囊e n d o p h a l l u s 阳茎为雄性生殖器的组成部分，位于阳基侧突腹面，它分为外阳茎和内阳茎，外阳茎为阳茎的外壳部分，内阳茎膜质，衬在外阳茎里面，其基部膨大呈囊状，称内阳茎囊。2.4 R 日 基t e g m e n t b a s a l 为雄性外生殖器的组成部分，位于阳茎片的基部，为一完整的骨片，但可由沟槽分为近端部的中片和近基部的基片，阳基前端以膜与阳基侧突相连。2.5 阳茎基片 t e g m e n t 为雄性外生殖器的组成部分，由阳基侧突和阳基组成，其内包藏阳茎。2
4、.6 阳茎 p e n i s 阳茎包藏于阳茎基片中，其端部具一开口，通人内阳茎，后者是一个可以外翻的空腔，其端部具生殖孔。阳茎肉质或呈现不同程度的骨化。2.7 离蛹e x a r a t e p u p a 又称裸蛹，附肢和翅不贴附在身体上，可以活动，同时腹节间也能自由活动原 理 日 本金 龟子，学名P o p i l l i s j a p o n i c a N e w m a n，英文名J a p a n e s e b e e t l e，鞘翅目C o l e o p t e r a，丽金龟科 R u t e l i d a e，为多食性植物害虫，取食近 3 0 0种植物，对其中大约
5、 1 0 6 种植物可造成经济损失。日本金龟子常以三龄幼虫在约 巧 c m-3 0 c m深处的土室中越冬。当春季土温超过1 0 0C，幼虫在土中约 5 c m处恢复活动，取食植物根部。经几周后化蛹，五月至七月份羽化，羽化时间与纬度有关成虫善飞翔，为害植物的叶子、花和果实，平均寿命 3 0 d-4 5 d，在土中产卯。卵孵化后，幼虫在土中为害植物根部。S N/T 1 3 7 0-2 0 0 4一般一年一代，少数二年一代.日 本金龟子成虫主要取食叶肉及叶表皮，通常只剩下叶脉，使叶子变黄并脱落;取食花瓣;受害玉米胚胎膨大，果粒畸形等。根据日 本金龟子的生物学特性、寄主及各虫态的形态特征制定该虫的检
6、疫鉴定标准。4仪器及用具4.14.24.34.44.5实体显微镜、测微尺。剪刀、镊子、昆虫解剖针、毒瓶。培养皿、烧杯。载玻片、盖玻片。酒精灯。5 试剂及材料5.1 清洗液 无水乙醇:乙酸乙醋:水=1，工，1,5.2 1 0%氢氧 化钠溶液。5.3还软器 玻璃干燥器底部加人 2 c m厚洗涤清洁的沙粒，加水并漫过沙粒 1 c m，水中应滴人少量苯酚以防标本腐烂。5.4 乙醇一 甘油保存液 7 5%乙醇:甘油=1 0 0，0.5 一1.现场检疫6.1 确定进境的寄主植物及植物产品是否来自疫区(参见第 A.1 章)。6.2 对来自疫区如日本、美国、加拿大、韩国等的寄主植物及植物产品特别是主要的一些寄
7、主植物(参见第A.2章)进行严格检疫，对疫区来的带土活植物应重点进行检疫。6.3 对疫区来的运输工具进行检疫，重点查看食品舱、客机机舱、载货舱以及水果垃圾堆放点等。6.4 现场检查时，对发现可疑危害症状的样品进行取样，取样应按照中华人民共和国动植物检疫法规定的操作规程进行;发现可疑害虫虫样立即置入备好的毒瓶内杀死，并详细记载有关的采集时间、采集地点、进境国家、寄主植物、运输工具、采集者、虫态和数量等信息资料。实验室检验与鉴 定7.1 标本的预处理7.1.1 用于观察的死的或干的成虫宜放人还软器内回软，新鲜的可疑日本金龟子成虫和幼虫，虫体表面一定要清洁。若虫体表面有污物或粉屑，可用小毛笔蘸少许清
8、洗液仔细清洗虫体表面。7.1.2 制作生殖器玻片:将雄虫的腹部取下，取出生殖器，放人 5 0%的乙醇溶液浸泡一天.去除杂物，制成玻片，在实体显微镜下观察鉴定。7.2 观察 在显微镜下测量各虫态的虫体长度和宽度，观察虫体颜色:对于成虫，还要观察其触角的形状及节数、前胸背板、小盾片、鞘翅以及前后足胫节的特征;而对于雌雄生殖器玻片，要在显微镜下观察雄性阳基侧突、内阳茎及雌性交配囊、受精囊的特征。7.3 鉴定特征7.3.1 科的特征S N/T 1 3 7 0-2 0 0 4 具单眼，或缺;上唇近于后缘平截的心圆形，或近似横椭圆形，左右不对称;上领腹面具近椭圆形的发音横脊区域，由平行紧密排列的横脊构成，
9、各横脊上常有缺口，上额切齿叶缺刻较浅。下顺发音齿发达，尖端尖锐，通常五至十一个，其前方尚有一钝齿，宽度常远大于高度，内外领叶愈合，腹面无明显的缝相隔，外领叶尖端一齿，内领叶尖端通常二齿，基部愈合，极少有三齿者;触角较细长，第二节最长，端节感觉器通常三个，其中背面一个，极少为两个以上者，各节均无毛，或第二、三节上具毛，极少有第一节具毛者。内唇端感区感区刺三至九根，呈单横列;通常具缘脊，如无缘脊或缘脊极细弱，则触角端节背面感觉器两个或两个以上;缺亚缘脊;左上唇根尖端常明显前弯;基感区具突斑两个，其中近中央之感觉突斑较小。前胸及腹部第七、八节气门板显著大于其他各节的气门板;各足具爪，较细长、尖锐，其
10、上具两根刺毛。臀节背板上常具向后开口的骨化环，或缺;复毛区具钩状刚毛，有刺毛列，或缺，如有，则均呈纵列;肛门孔横弧状。7.3.2 种的特征(参见附录B 7.3.2.1 成虫的鉴定特征7.3.2.1.1 外形 虫体卵圆形，长 9 mm-1 5 mm，宽4 m m-7 m m，带强金属光泽。前胸、头、足、小盾片墨绿色，鞘翅黄褐色至褐色，鞘翅外、内端缘暗绿色。7.3.2.1.2 头部 触角九节，鳃片部三节。唇基倒簸箕形，强卷，前缘加厚并上翘，厚度为其宽度的四分之一至八分之三，前角近 1 0 0 0水平夹角;额唇基沟中断或消失。颊中部纵凹。7.3.2.1.3 胸部 前胸背板宽大于长，强隆弓。前角锐，后
11、角钝角形，基缘向后方突出，并在小盾片前凹人，后缘边框近完整。侧区小凹陷一对。小盾片圆三角形，常具不规则刻点。鞘翅扁平，短，向后收狭，露出部分前臀板，具缘膜。鞘翅缝角间具有一对小齿，鞘翅背面六条点行，行二散乱并在近端部五分之四处消失。中胸腹突前伸较明显，胸腹部布满白毛，足粗壮，前足胫节端部外侧具二个相连大齿，内侧中端具一距。后足胫节内侧无刺列，但有一个长毛列。7.3.2.1.4腹部 臀板强隆，具鳞状横刻纹，前臀板具有白色刚毛。臀板基部有两个白色毛斑，腹部一至五节腹板中央两侧中部各着生一列白色刚毛，刚毛列在腹侧分别聚成毛斑，六对毛斑不被鞘翅覆盖。背面观，雄性外生殖器的阳基侧突端部钝，两侧由基部向端
12、部收窄，对称，右侧突叠于左侧之上。阳基中片长于基片。侧面观，阳基侧突顶部尖削，向下弯曲呈鸟咏状，长为隆拱点处宽的四倍，腹片端缘翘突位于腹缘隆拱点的顶端。7.3.2.2 卵的鉴定特征 刚产的卵乳白色，呈圆形，直径 1 m m，之后变成长卵形，长1.5 m m，宽1 m m，色也渐加深7.3.2.3 幼虫的鉴定特征 体白色，呈“c.,型弯曲，老熟幼虫体长 1 8 m m-2 5 mm，上颗极发达，黑褐色，臀节膨大，背面具骨化环。肛门横裂，刺毛列由针状毛组成，每列五到六根，前端不超过腹毛区。幼虫三个龄期，头壳宽度分别为 1.2 m m,1.9 mm,3.1 m m,7.3.2.4 蛹的鉴定特征 阔纺
13、锤形，长1 4 m m，宽 7 m m，灰白色至黄揭色，跄肢活动自如，离蛹。S N/T 1 3 7 0-2 0 0 48 结果评定 以上述特征为依据，符合标准中所描述的成虫形态特征者可鉴定为日本金龟子，其他虫态可作参考。标本制作和样品保存 日本金龟子制作标本时，将成虫放人毒瓶内或用乙醚杀死后，将昆虫针从其右鞘翅的左上角插人，正好穿过右中足和后足之间，利用三级板调整好虫体在昆虫针上的位置，再用镊子和解剖针调整其足和触角的姿势，使其处于一种自然状态，同时用标签注明采集的时间、来源地和名称、寄主，最后放人恒温干燥箱内干燥，保存，以备复验、谈判和仲裁。日本金龟子幼虫，一般用乙醇一 甘油保存液浸泡保存。
14、S N/T 1 3 7 0-2 0 0 4 附录A (资料性附录)日本金龟子的分布范围与主要寄主A.1 分布范围 朝鲜、韩国、日 本、千岛群岛、俄罗斯(远东地区)、葡萄牙、加拿大(安大略、魁北克)、美国(康涅狄格、纽经贸部、佐治亚、俄亥俄、新泽西、田纳西、弗吉尼亚、马萨诸塞、密执安、伊利诺斯、印第安纳、北卡罗来纳、密苏里、依阿华、肯塔基、缅因、新罕布什尔、宾夕法尼亚、南卡罗业纳1 佛蒙特、华盛顿、西弗吉尼亚、威斯康星、马里兰、加利福尼亚)、古巴。A.2 主要嗜食的寄主 械属A c e r、七叶树属 A e s c u l u s,桦木属 B e t u l a、栗属 C a s t a n e
15、 a、大豆属 G l y c i n e、胡桃属 J u g l a n s、桃属Ma l u s,悬铃木属 P l a t a n u s、杨属 P o p u l u s、李属 P r u n u s,蔷薇属 R o s a,悬钩子属 R u b u s、柳属 S a l i z,锻树属 T i l i.s,榆属U l m u s,葡萄属 V i t i s 等，其中主要包括:葡萄、苹果、草毒、树每、樱桃、梨、桃、李、杏、柿、梅、黑梅、油桃、械树、杨、柳、榆、石刁柏、栋树、锻树、白桦、落叶松、美国梧桐、蔷薇、樟、栗、黑槐、丁香、接骨木、忍冬、虎杖、怪树、紫藤、连翘、酸模、王叶地锦、玫瑰、杜鹃、蜀葵、锦葵、向日葵、大丽花、美人蕉、天竺葵、万寿菊、牵牛花、莺尾、薄荷、五叶爬山虎、蒲公英、百日草、律草、啤酒花、车前草、香董菜、切花等花卉观赏植物及要科植物杂草、牧草、JO E 类、小麦、裸麦、荞麦、高粱，栗、花生、大豆、菜豆、小豆、豌豆、马铃薯、甘薯、西瓜、甜瓜、蛇葡萄、玉米、芦笋、首蓓.S N/T 1 3 7 0-2 0 0 4 附录B (资料性附录)日本金龟子各虫态图娜一粉1 成 虫2 蛹;3 幼 虫;4-雄性外生殖器背面观;5 雄性外生殖器侧面观;6 幼 虫 腹 部 末 端 腹 面 观图 B.日本金 龟子