1、SN/T1819-20066试剂与材料6.1所用试验用水应符合GB/T6682三级水要求，所用试剂均为分析纯或相当纯度的试剂。6.2磷酸(0=1.68g/mL)6.3盐酸(0=1.19g/ml)6.4硫酸(0=1.84g/ml).6.5抽提溶液(0.025mol/L磺酸盐缓冲溶液，pH=7.4士0.2)：称取磷酸二氢钾(KH,PO,)0.816g、磷酸氢二钠(Na:HPO,12H2O)6.802g,加水溶解并定容至1000ml。6.6氢氧化钠溶液(0.2mol/L):取饱和氢氧化钠溶液10.8mL,加水至1000mL后用盐酸标准溶液标定。6.7脱氧胆酸钠(DOC)溶液(1.5g/L):称取0.
2、15g脱氧胆酸钠溶于水并定容至100mLe6.8三氯乙酸(TCA)溶液(720g/1):称取72g三氯乙酸溶解水中并定容于100mL6.9磷钨酸(PTA)溶液(720g/L):称取72g磷钨酸溶解水中并定容于100mL6.10碱性酒石酸钠溶液：称取2.22g碳酸钠(Naz CO,)、0.44g氢氧化钠(NaOH)、0.18g酒石酸(C,HO2),溶于水并定容至100mL。6.11硫酸铜溶液：称取7.0g硫酸铜(Cu2S0,5H,O)溶于水并定容至100mL6.12福林(Folin)试剂：称取100g钨酸钠(Na:WO2HO)、25g钼酸钠(Na:MoO,2H,O),加入蒸馏水700mL、磷酸5
3、0mL、盐酸100mL,溶解后放入2L回流装置中，以小火回流10h,再加入150g硫酸锂(1i2SO,),蒸馏水100ml,及数滴溴水，然后开口继续煮沸15min,以除去过量的溴，冷却后定容至1000mL。过滤，贮于棕色瓶中。6.13蛋白质标准液：蛋白质标准储备液1.00mg/mI,冷藏条件下溶液能：存48h:温度为一18时，可贮存2个月：融化时，要求用水浴加热到45并保温15min。注：蛋白质标准液可从临床检验质控中心获得，冷藏时间为累计时间。为进一步避免反复的冷冻和酷化，建议将蛋白质母液分几份贮存，每份足够制备一条标准曲线，或在试验步骤中足够使用。6.14蛋白质试验试剂：试剂A:脱氧胆酸钠
4、溶液(DOC)。试剂B:三氣乙酸溶液(TCA)磷钨酸溶液(PTA)(1+I)混合.试剂C:1ml,硫酸铜溶液和150mL,碱性酒石酸钠溶液混合，用时配制。试剂D:1份福林(Folin)试剂与1份水混合，用时配制.7测定步骤7.1蛋白质的抽提取医用手套手掌内、外侧约4dm手套测试的样品面积=长(mm)宽(mm)210000,剪成1cm2m大小的片状试样并称取质量（精确到0.0001g),置于50mL聚丙烯试管(5.5）中，抽提溶液体积与试样量（质量比）按1：10移取抽提溶液于装有试片的聚丙烯管中，使被测试样全部均匀地浸泡在抽提溶液中，在整个抽提过程中保持在25士5，抽提2h,每间隔30mn搅动试样一次。将抽提液倒入50mL离心管中，离心力为500g条件下离心15min,小心吸出上层清液，必要时通过0.45m孔径滤膜过滤，立即进入下步操作。否则应将上层清液在2一8贮存，贮存时间不超过24h.注：离心机的相对离心力(RCF)与离心机转速(r/mi)的换算见式(1)：RCF=r/g=(2rm/60)r/980=1.11810nr+(1)式中：RCF一相对离心力，单位为克(g):