1、1.3 余氯检测方法采用国家标准“游离氯和总氯的测定 N，N-二乙基-1,4苯二胺分光光度法（HJ 586-2010）”。250mL锥形瓶中依次加入15.0mL磷酸盐缓冲溶液、5.0mLN,N-二乙基-1,4-苯二胺（DPD）溶液、100.0mL试样和1.0g碘化钾摇匀。515nm波长处测定吸光度，利用标准曲线计算余氯浓度。1.4 数据分析数 据 用 平 均 值 标 准 差（MeansSD）表示。采用SPSS 26.0 软件进行单因素方差分析（One-Way ANOVA），用Duncans多重比较组间差异，差异显著水平为P0.05。2 结果与分析2.1 0盐度水体不同浓度二氧化氯对余氯值的影响
2、水体盐度为0时，二氧化氯对水体余氯值的影响见如图1。添加不同浓度二氧化氯粉剂在1、4、12、24、48h均显著高于空白组（P0.05）。添加二氧化氯粉剂产品至1、5、10g/m3浓度时，水体的余氯值1、4、12、24、48h均低于0.05g/m3。添加二氧化氯粉剂产品至20g/m3时，1、4、12 h余氯值均超过0.1g/m3，24h和48h降至0.1g/m3以下。2.3 25盐度水体不同浓度二氧化氯对余氯值的影响水体盐度为25时，二氧化氯对水体余氯值的影响见图3。添加不同浓度二氧化氯粉剂在1h显著高于空白组（P0.05）。添加二氧化氯粉剂产品至1、5、10g/m3浓度时，水体的余氯值1、4、
3、12、24、48h均低于0.05g/m3。添加二氧化氯粉剂产品至20g/m3时，1、4、12h余氯值均超过0.1g/m3，24h和48h降至0.1g/m3以下。3 讨论本研究设置3个不同盐度，即淡水盐度（0）、江苏如东县南美白对虾养殖盐度（3）、一般海水虾养殖盐度（25），通过添加不同浓度的二氧化氯粉剂，了解二氧化氯对余氯的图3 25盐度水体二氧化氯对余氯值的影响（注：不同字母表示差异显著）影响。结果显示，添加二氧化氯粉剂均能显著升高余氯含量。二氧化氯粉剂（1、5、10g/m3）在不同的时间段余氯浓度均低于0.05g/m3，低于余氯安全浓度0.1g/m3。高浓度二氧化氯粉剂（20g/m3）12
4、h内高于0.1g/m3；24h后余氯含量降低至0.1g/m3以下。二氧化氯分子由一个氯原子和两个氧原子组成，氯氧键双键结构(O=Cl=O)，对称的非线形分子，具有极强的氧化性。二氧化氯是通过氧化分解微生物蛋白质中的氨基酸，致氨基酸链断链，蛋白质失去功能，同时二氧化氯对细胞壁有较强的吸附和穿透能力，放出的原子氧将细胞内的含巯基酶氧化，抑制微生物蛋白质的合成，使微生物死亡。漂白粉等含氯消毒剂是通过氯代反应起作用，因此二氧化氯的作用机理和以漂白粉为代表的含氯消毒剂是完全不同的。使用漂白粉会有余氯残留，导致余氯值上升，是因为漂白粉水解后，会产生次氯酸（HClO）或次氯酸盐（ClO-）。二氧化氯分子结构
5、不稳定,在光照条件下易分解，主要生成氯酸根（ClO3）、亚氯酸根（ClO2）和次氯酸（ClO），而次氯酸是余氯的组成成分，因此二氧化氯的分解是可以增加余氯值的，本研究中的结果显示了二氧化氯会增加水体余氯的浓度。可能二氧化氯分解产生的次氯酸（ClO）比例低，相比漂白粉等含氯消毒剂，产生的余氯值低。本研究采用国家标准N，N-二乙基-1,4苯二胺分光光度法测定余氯含量，一般认为二氧化氯对余氯的测定有一定的干扰作用，但有研究（王冰等，2020年）明确说明了二氧化氯含量在0.10.8mg/L时，对余氯测定结果的影响可以忽略不计，高浓度二氧化氯粉剂用量20g/m3时，二氧化氯实际含量为1.2g/m3，其对
6、余氯含量测定应该有一定的影响，其影响程度有待于进一步的探讨。由此可见，水产养殖上二氧化氯使用浓度10g/m3以下，不会升高水体余氯值0.1g/m3以上，可以安全使用。病害监测058当代水产 2023320233当代水产059集思广益，欢迎对本文发表见解，如需评论或新闻爆料可致电陈记者：13414963510或发邮件：更多即时精彩信息，请关注微信公众平台：tsfish中草药在加州鲈病变肝脏中的修复作用 王凯（江门市澳保生物科技有限公司 广东 江门 52900）肝脏既是鱼体代谢器官，也是重要的免疫器官，不仅具有解毒、代谢脂肪和糖类的功能，而且在氧化防御方面具有重要作用。当外界环境发生变化时，肝脏中
7、一系列的抗氧化酶类将被激活，快速清除体内多余的自由基，以此抵御外界胁迫所产生的侵害，维持鱼体内环境稳态。近年来，在高产高效益的驱使下，我国每年都有由于投喂、管理不当造成的白肝、花肝、黄肝等肝脏问题，最终导致鱼吃料少、长速慢、免疫力低下。长期的低免疫状态使得鱼体难以克服多变的外部环境，易造成鱼病的爆发和鱼类的大规模死亡，从而增加养殖风险，影响养殖利润。中草药是一种天然的饲料添加剂，具有提高鱼体免疫力、增加鱼类食欲、保肝护肠等功效，加之其低成本、低残留、低耐药性等特点，近年来，应用中草药防治鱼病受到了越来越多的关注。因此，针对现有鱼类肝脏问题，对具有护肝功效的中草药进行探究，不仅有利于鱼类的健康养
8、殖，维护“餐桌上的安全”，也对于水资源环境的保护具有重要意义。1 材料与方法1.1 实验动物 养殖江门市澳保生物科技有限公司种苗厂实验网箱中的加州鲈，体质量为50100g/条，无病毒性、细菌性和寄生虫性疾病。实验期间养殖水体水质良好，水温2127，氨氮00.2mg.L-1，亚盐00.007mg.L-1，pH值7.47.8，溶氧5.67.6mg.L-1。每天投喂2次。1.2 实验材料江门市澳保生物科技有限公司自主研发的复方中草药护肝产品A。1.3 实验设计 1.3.1 肝脏损伤检查和肝脏分级 正式实验前对现有养殖的15个网箱加州鲈鱼肝脏进行检查，每个网箱随机取5条鱼，选择肝脏损伤较为严重的网箱进
9、行实验，并对不同的肝脏损伤程度进行分级。1.3.2 肝脏修复 实验一：产品A护肝效果初步检验对肝损伤的网箱F中的加州鲈（200条）拌喂中草药护肝产品A进行治疗，每天拌喂2次，连续拌喂14d。分别于第0d、第7d和第14d进行取样，每次随机取样6条鱼，5条用于肝脏观察，1条用于切片。实验二：产品A护肝效果对比实验 将肝损伤的15、16号网箱中的加州鲈（200条/网箱）分为两组，一组为图1 不同肝脏损伤程度分级（注：1级肝脏：肝脏红润；2级肝脏：肝脏粉红；3级肝脏：肝脏红润或粉红带白斑或黄斑；4级肝脏：完全发黄或发白。）图2 网箱拌喂产品A后肝脏修复情况病害监测060当代水产 2023320233
10、当代水产061抗菌肽和植物精油体外抑菌效果研究 王凯1 沈娟娟1 阮鹏飞2（1 江门市澳保生物科技有限公司；2 江门市动物疫病预防控制中心）我国是水产养殖大国，随着集约化养殖，水产动物疾病呈多发、复杂状态，生存环境恶化。由于预防并治疗鱼病等原因，人为在饲料中添加大量抗生素，这种方式带来了一系列问题，比如药物残留、耐药性及其毒副作用等，这些问题严重危害着水产品安全与人类健康。针对这一现状，在水产养殖过程中使用替抗产品迫在眉睫。抗 菌 肽（A n t i m i c r o b i a l peptide；AMP）是一类两亲性阳离子型短肽，长度约为10100个氨基酸残基。作为先天性免疫防御系统的重
11、要组成部分，抗菌肽是自然界在长期进化过程中形成的一类天然抗病活性多肽因子，在所有生物防御外源病原微生物的第一道防线中起着不可或缺的重要作用。植物精油属于天然、绿色、无残留物质，具有来源广泛、抗菌谱广、作用迅速、不易产生耐药性等特点。牛至油已被我国农业部批准作为一种可长期添加的药物饲料添加剂，从而说明天然植物提取物有望替代抗生物，具有较大的市场潜力。本研究针对从市场上收集的抗菌肽样品和植物精油样品进行体外抑菌实验，比较所有样品对水产常见致病菌大肠杆菌、副溶血弧菌、嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌、鰤鱼诺卡氏菌、无乳链球菌、维氏气单胞菌等的抑菌效果对比，从而筛选出有显著抑菌作用效果的抗菌肽和植物精油产
12、品，为实际养殖提供参考。1 材料与方法1.1 试验材料注：-表示无明显抑菌圈，抑菌圈直径越大，说明抑菌作用越强。表2 不同抗菌肽产品和植物精油产品对致病菌的最小抑菌浓度表1 不同抗菌肽产品和植物精油产品对致病菌的抑菌效果1.1.1 指示菌株大 肠 杆 菌（E s c h e r i c h i a c o l i）、副 溶 血 弧 菌（V i b r i o Parahemolyticus）、嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）、迟钝爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）、鰤鱼诺卡氏菌（Nocardia s e r i o l a e）、无 乳 链 球 菌（St
13、reptococcus agalactiae）、维氏气单胞菌（Aeromonas veronii），以上菌种均由江门市澳保生物科技有限公司菌种保藏中心提供。1.1.2 抗菌肽和植物精油1 0 个 不 同 厂 家 生 产 的 抗 菌 肽（Antimicrobial peptide,AP）和植物精油产品均为市售产品，由江门市澳保生物科技有限公司收集。10个抗菌肽产品分别标记为AP-1、AP-2、AP-3、AP-4、AP-5、AP-6、AP-7、AP-8、AP-9、AP-10，植物图3 网箱拌喂产品A后肝脏修复切片表1 网箱拌喂产品A后肝脏修复效果图4 拌喂产品A后增重、增重率、吃料量、饵料系数比较
14、对照组，投喂普通饲料，另一组为实验组，投喂拌有中草药护肝产品A的药饵，每天拌喂2次，连续拌喂7d，于第0d、第7d进行取样，每次随机取样10条鱼，观察肝脏情况。记录每日吃料量，采样前鱼体总重，采样后每条鱼体重、肝脏重，计算增重、增重率、吃料量、饵料系数。增重=鱼体末重-鱼体初重增重率=（鱼体末重-鱼体初重）/鱼体初重100%吃料量=每日吃料量吃料天数饵料系数=每日吃料量吃料天数/增重100%2 结果2.1.肝脏分级根据养殖经验，对鱼体不同状态下的肝脏进行分级，为后续实验的分析提供判断依据。1级肝脏：肝脏为猪肝红，肝脏状态最好，不需调理；2级肝脏：肝脏颜色较猪肝红淡，呈现为粉红色，肝脏状态尚可，
15、可调理也可不调理；3级肝脏：肝脏红润或粉红带白斑或黄斑，肝脏状态较差，需要调理；4级肝脏：肝脏完全转变为白色或黄色，肝脏状态很差，急需调理。2.2 产品A护肝效果初步检验2.2.1 肝脏外观观察实验第0d，加州鲈鱼肝脏发黄，均为4级肝脏；拌喂产品A 7d后，加州鲈鱼肝脏好转，4条肝脏为略微粉红，2级肝脏，1条肝脏为发黄，4级肝脏；拌喂产品A 14d后，加州鲈鱼肝脏基本修复完全，3条红润，1级肝脏，2条粉红，2级肝脏（图2），表明随着时间的增加，在产品A的作用下，加州鲈肝脏逐步修复。肝脏切片结果表明，加州鲈胰腺埋于肝脏中，围绕血管分布。在使用产品A前，肝脏发黄，血管周围的胰腺组织完全消失；使用产
16、品A 7d后，肝脏粉红，血管周围的胰腺部分修复，部分出现病变，胰腺部分肿大、出现大量嗜酸性小体和空泡；使用产品A 14d后，肝脏红润，胰腺组织恢复正常，围绕血管均匀分布。实验第0d，对照组和产品A组12级肝脏的占有率分别为40%和20%，34级肝脏的占有率分别为60%和80%，实验第7d，对照组12级肝脏和34级肝脏占有率相比于第0d没有变化，而产品A组12级肝脏占有率显著上升，为80%，34级肝脏的占有率显著下降，为20%（表1），说明产品A对肝损伤的加州鲈肝脏修复效果明显。实验结果表明，投喂产品A组增重、增重率、吃料量、饵料系数均明显优于对照组，说明鱼体肝脏的修复有利于鱼体的生长。3 讨论肝脏是鱼体维持内环境稳态最核心的器官之一，当机体出现代谢紊乱和病变时，肝脏状态也随之发生变化，如肝脏由光滑有弹性转变为豆腐状、易脆等，颜色由猪肝红转变为黄肝、花肝、白肝、绿肝等（黄春红等，2019；汪开毓等，2001）。在加州鲈养殖过程中，肝脏的颜色是否红润通常是评价鱼体是否健康的依据之一。在本研究中，我们选择肝脏条件很差的鱼类进行了两组不同维度的肝脏修复实验，一组是纵向比较实验，另一组是横向比较