1、动物营养学报，（）：不同投喂模式对中间球海胆生长及性腺发育、感官品质和营养品质的影响贺邱雨晴 邸维啸 苟 丹 宫攀科 唐 璐 常亚青 丁 君 左然涛（大连海洋大学水产与生命学院，农业农村部北方海水增养殖重点实验室，大连）摘 要：本试验旨在探究不同投喂模式对中间球海胆生长及性腺发育、感官品质和营养品质的影响。试验：设置饲料组（投喂配合饲料）和海带组（投喂海带），每组 只海胆，均持续投喂。试验：设置饲料组和海带组，每组 只海胆，其中饲料组前 投喂配合饲料，后 投喂海带；海带组持续投喂海带 。结果表明：）试验 和试验 结束时，海带组海胆的增重率显著高于饲料组（）。与试验 相比，试验 饲料组海胆的增重
2、率及海带组海胆的增重率、消化道指数均显著提高（）。）试验 结束时，海带组海胆的性腺指数显著低于饲料组（）。试验 和试验 结束时，饲料组海胆性腺的红度（）、黄度（）值均显著低于海带组（），而亮度（）值均显著高于海带组（）。与试验 相比，试验 饲料组和海带组海胆性腺的、值均显著提高（）。）试验 结束时，饲料组海胆性腺的硬度显著低于海带组（）；试验 结束时，饲料组海胆性腺的黏附性和内聚性均显著高于海带组（）。与试验 相比，试验 饲料组海胆性腺的内聚性、弹性、胶着性、咀嚼性及海带组海胆性腺的弹性均显著提高（）。）试验 结束时，饲料组海胆性腺的非必需氨基酸（）和甜味氨基酸含量显著高于海带组（）；试验 结
3、束时，饲料组海胆性腺的必需氨基酸（）含量显著高于海带组（）。与试验 相比，试验 海带组海胆性腺的、总氨基酸（）、和苦味氨基酸含量均显著提高（）。）试验 和试验 结束时，饲料组海胆性腺的二十碳五烯酸（）含量和 多不饱和脂肪酸（）显著低于海带组（），二十二碳六烯酸（）含量显著高于海带组（）。与试验 相比，试验 饲料组和海带组海胆性腺的、含量和 均显著提高（），饲料组海胆性腺的二十碳四烯酸（）含量显著提高（）。由此可见，投喂配合饲料虽然提高了海胆的性腺指数，但降低了海胆的生长和性腺感官品质。与全程投喂配合饲料相比，使用配合饲料海带接力的投喂模式可提高海胆性腺的颜色、质地和必需脂肪酸含量。关键词：中间
4、球海胆；性腺发育；品质；海带；配合饲料中图分类号：文献标识码：文章编号：（）收稿日期：基金项目：大连市杰出青年科技人才项目（）；辽宁省教育厅面上项目（）作者简介：贺邱雨晴（），女，辽宁鞍山人，硕士研究生，水产养殖专业。：通信作者：左然涛，副教授，硕士生导师，：中间球海胆（）又称虾夷马粪海胆，原产于日本北海道和俄罗斯远东沿海地区，因其性腺色泽好、味道鲜美、营养丰富而广受消费者喜爱，现已成为我国主要海胆养殖品种之一。目前，我国海胆养殖产量已达 ，养殖面积为 ，从而很大程度上满足了海胆的市场需求，缓解了对野生海胆资源捕捞的压力。传统的海胆养殖主要投喂海带动 物 营 养 学 报 卷（）和裙带菜（）等大
5、型藻类作为海胆的食物，但大型藻类存在不易储存、质量不稳定等缺点，这严重制约了海胆养殖业的发展。因此，许多学者尝试向海胆投喂营养全面的配合饲料，以期解决大型藻类季节性短缺造成的食物匮乏问题。性腺是海胆唯一可食用部分，性腺的肥满度和感官品质直接影响着海胆的经济价值。目前，使用营养全面的配合饲料喂养海胆可以促进海胆性腺发育已经在绿海胆（）、红海胆（）、中间球海胆等多种海胆养殖中得到证实。有关中间球海胆多个营养需求量参数如蛋白质、脂肪、长链多不饱和脂肪酸（）、二十碳四烯酸（）等也已被确定，。但是，使用配合饲料喂养的海胆性腺感官品质如色泽和质地欠佳，。相比之下，使用大型藻类喂养的海胆性腺颜色更加靓丽，质
6、地更为坚挺，味道更加鲜甜，但缺点是性腺发育缓慢，养殖周期较长。在黄颡鱼（）、大 西 洋 鲑（）的研究中发现，在其上市前投喂营养成分更丰富的配合饲料可以改善营养品质；向紫海胆（）投喂莴苣（）显著改善了海胆性腺的颜色，使其更接近标准颜色中的芒果橙色；将香蕉皮投喂给中间球海胆可以增加海胆性腺的甜味。以上研究说明，通过配合饲料与天然食物相结合的投喂模式，或许可以在缩短养殖周期的同时得到较高品质的产品。因此，本试验探讨了不同投喂模式对中间球海胆生长、性腺发育、感官和营养品质的影响，以期达到投喂配合饲料使海胆性腺快速发育后再使用海带改善性腺品质的目的。材料与方法 试验饲料 以豆粕和酪蛋白为主要蛋白质源，以
7、棕榈油为主要脂肪源，在此基础上添加大豆磷脂、小麦粉、玉米淀粉、胆固醇等原料配制中间球海胆配合饲料，配合饲料组成及营养水平见表。配制之前将所有固体原料粉碎并过 目筛。然后按照配方表将每种饲料原料的细粉先在密封袋中混合，然后转移至容器中将其与油脂混合均匀，最后加水充分混合。将混合好的饲料放入双螺旋制粒机（，济南鼎润机械设备有限公司）制成直径约 、长度约 的饲料。随后将压制好的饲料平铺在托盘上，烘干，待其冷却至室温，用密封袋封装，于 保存备用。海带在每次投喂之前取适量海带干制品用海水泡开后备用。表 配合饲料组成及营养水平（干物质基础）（）项目 含量 原料 豆粕 （，）酪蛋白 谷朊粉（，）小麦粉 （，
8、）麦麸 （，）玉米淀粉 棕榈油 大豆磷脂 胆固醇 维生素预混料 ）矿物质预混料 ）丙酸钙 乙氧基喹啉 氯化胆碱 （）磷酸二氢钙（）（）合计 营养水平 （）粗蛋白质 粗脂肪 ）维生素预混料为每千克饲料提供 ：，叶酸 ，泛酸 ，生物素 ，烟酸 ，肌醇 ，微晶纤维素（载体）（）。）矿物质预混料为每千克饲料提供 ：，（），（），（）（）。）计算值 。期贺邱雨晴等：不同投喂模式对中间球海胆生长及性腺发育、感官品质和营养品质的影响 试验设计和饲养管理 饲养试验于 年 月开始。试验所用中间球海胆购自大连当地养殖场，在饲养试验之前，选取健康无病、大小相近的海胆饲养在 的水槽中，驯养 后，将 只大小相近的海胆初
9、始体重（）随机分配到 个圆柱形漂浮网笼（直径 ，高度 ）中，每个网笼随机放养 只海胆。试验：设置饲料组（投喂配合饲料）和海带组（投喂海带），每组 只海胆，持续投喂 。试验：设置饲料组和海带组，每组 只海胆，其中饲料组前 投喂配合饲料，后 投喂海带；海带组持续投喂海带 。每个网笼底部放置一个玻璃培养皿（直径 ），以防饲料和粪便从笼子缝隙中掉落。每天：对海胆进行投喂，每隔 将培养皿及水槽底部的残饵和粪便吸 出 并 换 水。饲 养 试 验 期 间，水 温 ，盐度约为，溶解氧维持在 以上。每天监测海水中的氨氮和亚硝酸盐浓度，并使其保持在 以下。样品采集 每次饲养试验结束时，对海胆饥饿 后进行取样。记录
10、体重、壳高和壳径，然后对海胆进行解剖，取海胆消化道称重计算消化道指数，取性腺称重后将其分为 部分：一部分放入在多聚甲醛固定液中，用于组织学分析；一部分用于质构检测和颜色测定；一部分于 保存，用于氨基酸和脂肪酸含量检测。组织学分析 性腺切片采用 等的方法制作。性腺样品在多聚甲醛中浸泡 以上，取出后切成合适大小，放入自动脱水机机（，公司，德国）中脱水，然后用石蜡将性腺包埋。接着用切片机将其切成厚度 的薄片，选取位置最佳、组织最完整的切片进行苏木精伊红（）染色，最后封片。制作好的切片在 光学显微镜（公司，德国）下观察。根据 的方法，将生殖腺配子体发育阶段分为 个时期。期：初级配子和营养性吞噬细胞逐渐
11、恢复（恢复期）；期：大量初生配子和营养性吞噬细胞出现（生长期）；期：营养性吞噬细胞数量减少，配子数量逐渐增加（早期）；期：营养吞噬细胞较少，成熟配子聚集（成熟期）；期：营养吞噬细胞耗竭且配子松散（产卵期）；期：生殖腺内无配子（耗尽期）。颜色鉴别 取海胆性腺样品将其压碎至无气泡的均匀密度后，利用色差（，公司，日本）测量亮度（）、红度（）和黄度（）值。根据 等的方法，利用标准浅橙黄色（、）和标准浅黄色（、）计算每个性腺颜色与标准颜色之间的总色差（）值。值越小，表示越接近标准颜色。品质结构分析 使用质地分析仪（，公司，美国）测定 性 腺 的 质 地。选 取 圆 柱 形 探 头（直 径）后将样品放置于
12、压缩台，每个性腺样品以 的速度被挤压 次，探头将其压缩到原来高度的。硬度定义为试样第 次压缩时的最大峰值，黏附性定义为使圆柱形探头与样品分离所必需的功，弹性定义为试样第 次压缩后可恢复的程度，内聚性定义为样品内部的黏附力，胶着性定义为半固态样品的黏度特性（硬度内聚性），咀嚼性定义为咀嚼固体样品所需的功（弹性胶着性）。营养成分分析 氨基酸含量的测定：首先在硝基下用盐酸水解样品，当所有蛋白质被水解形成游离氨基酸后，吹氮气使液体干燥；然后在干燥后加入 （）；最后用氨基酸分析仪（，日立公司，日本）对氨基酸的绝对含量进行定量。脂肪酸含量的测定：采用 等的方法，样品中的所有脂肪酸被完全甲酯化后，将正十九酸
13、甲酯（）与各样品中的脂肪酸甲酯按固定浓度混合。用气相色谱质谱联用仪（，公司，美国）检测脂肪酸谱。进样器和检测器设置为 ，然后，温度按以下步骤升高：（）、（）和 （）。根据内标的峰面积和已知量对脂肪酸进行定量。计算公式和统计分析 相关指标计算公式如下：存活率（）；增重率（）（）；性腺指数（）；消化道指数（）；动 物 营 养 学 报 卷（）（）（）。式中：为海胆的初始数量；为海胆的最终数量；为每只海胆的初始体重；为每只海胆的最终体重；和 分别为每只海胆性腺和消化道的最终湿重；为标准颜色的亮度（或）；为标准颜色的红度（），为标准颜色的黄度（或），、和 分别为性腺样本的亮度、红度和黄度值。所有试验数据
14、采用 软件进行分析，采用独立样本 检验对不同饲料组间及不同试验间数据进行分析，表示有显著差异。数据统计结果以平均值标准误表示。结 果 不同投喂模式对中间球海胆生长和发育的影响 由表 可知，个试验的海胆均未见死亡个体。试验 结束时，海带组海胆的终末体重和增重率显著高于饲料组（）；试验 结束时，海带组海胆的终末体重和增重率显著高于饲料组（）。试验 结束时，饲料组海胆的消化道指数显著高于海带组（）；试验 结束时，饲料组海胆的消化道指数略高于海带组（）。与试验 相比，试验 饲料组海胆的终末体重、增重率及海带组海胆的终末体重、增重率、消化道指数均显著提高（）。表 不同投喂模式对中间球海胆生长和发育的影响
15、 项目试验 饲料组 海带组 试验 饲料组 海带组 存活率 初始体重 终末体重 增重率 性腺指数 消化道指数 同行数据肩标不同大写字母表示同一饲料组在不同试验之间差异显著（），肩标不同小写字母表示同一试验中不同饲料组之间差异显著（）。下表同。，（），（）不同投喂模式对中间球海胆性腺发育的影响 性腺指数 由表 可知，试验 结束时，海带组海胆的性腺指数显著低于饲料组（）；试验 结束时，海带组海胆的性腺指数与饲料组没有显著性差异（）。性腺切片 由图 可见，试验 结束时，饲料组雌性和雄性海胆性腺均同步发育至期，而海带组雄性海胆性腺发育至期，雌性海胆性腺仅发育至期；试验 结束时，饲料组和海带组雌性和雄性海
16、胆性腺发育同步，均发育至期。不同投喂模式对中间球海胆性腺感官品质的影响 性腺颜色 由表 和图 可知，试验 结束时，饲料组海胆性腺的、值均显著低于海带组（），而、值均显著高于海带组（）；试验 结束时，饲料组海胆性腺的、值均显著低于海带组（），而、值均显著高于海带组（）。与试验 相比，试验 饲料组和海带组海胆性腺的、值均显著提高（），与 值 均 显 著 下 降（）。期贺邱雨晴等：不同投喂模式对中间球海胆生长及性腺发育、感官品质和营养品质的影响 ：试验，饲料组期（雄性）；：试验，饲料组期（雌性）；：试验，海带组期（雄性）；：试验，海带组期（雌性）；：试验，饲料组期（雄性）；：试验，饲料组期（雌性）；：试验，海带组，期（雄性）；：试验，海带组，第阶段（雌性）。：营养吞噬细胞；：精母细胞；：精子；：卵母细胞；：卵子；：空腔；：卵母细胞裂解产物。：，（）；：，（）；：，（）；：，（）；：，（）；：，（）；：，（）；：，（）：；：；：；：；：；：；：图 不同投喂模式对中间球海胆性腺发育的影响 （）性腺质地 由表 可知，试验 结束时，饲料组海胆性腺的硬度显著低于海带组（）；试验 结束时，饲料组海胆性腺