1、网络出版时间：网络出版地址：成人噬血细胞性淋巴组织细胞增生症 例 突变筛查及临床特征分析王珍，邓明凤，杨锋钰，高敏，刘艳，杨叶子，杨辉摘要：目的探讨成人噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（，）患者行 相关致病基因突变检测和筛查的意义。方法收集 例成人 患者临床资料及其骨髓标本，提取骨髓标本基因组 ，对 基因 个外显子及至少包含 内含子区域的序列进行 扩增测序；分析其临床病理特征并复习相关文献。结果例成人 标本的骨髓涂片均可见组织细胞吞噬血细胞，例标本检出种 突变，其中种为错义突变，另 种均为同义突变。例患者检测出携带 （）杂合突变。结论 基因突变的筛查和鉴定，有助于临床 的确诊和治疗。关键词：噬血细
2、胞综合征；基因突变；扩增测序中图分类号：文献标志码：文章编号：（）：接受日期：基金项目：长江大学医学科研联合基金（）作者单位：长江大学医学部，荆州 长江大学附属荆州医院检验科，荆州 作者简介：王珍，女，硕士研究生。：杨辉，女，副教授，通讯作者。：噬血细胞综合征又称噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（，），是一种罕见且危及生命的过度炎症反应综合征 。其临床表现多样、缺乏特异性，常继发于感染、肿瘤等疾病，易误、漏诊，病死率高。目前，国际组织细胞协会修订的 诊断标准是临床诊断 遵循的原则，相关致病基因突变的鉴定是诊断的重要标准 。文献报道 相关致病基因中，亚洲人最常见的是 基因突变 。本文着重探讨对 患者
3、进行 基因突变筛查，旨在了解其在 患者中的携带情况，提高患者的预后。材料与方法 临床资料收集 年 月长江大学附属荆州医院 例诊断或疑似为 患者的骨髓标本，其中男女性各 例，年龄 岁。本实验经长江大学医学部伦理委员会批准，患者均知情同意。方法采用 提取试剂盒（北京天根生物公司）提取骨髓样本基因组 。根据 数据库的 参考序列（序列号 ）设计 对引物（表 ），对 基因 个外显子及至少包含 内含子区域的序列进行 扩增测序。患者均行骨髓血细胞形态学检测，活检后剩余样本于 保存。表 引物序列外显子引物序列（）扩增长度（）正向：反向：、正向：反向：、正向：反向：、正向：反向：、正向：反向：、正向：反向：、正
4、向：反向：、正向：反向：、正向：反向：、正向：反向：正向：反向：、正向：反向：、正向：反向：正向：反向：正向：反向：正向：反向：结果判断测序结果与 （：临床与实验病理学杂志 ；（）数据库 参考序列进行对比，查阅基因多态性数据库（）和基因组数据库（），同时通过查看测序图确认突变及发现未被识别的突变位点。根据 遗传变异分类标准与指南，将突变类型分为致病、可能致病、意义不明确、可能良性和良性。结果 临床特点本组 例成人 患者标本，其中 例患者合并感染，例为血液系统肿瘤的患者（例淋巴瘤，例非霍奇金淋巴瘤，例骨髓增生异常综合征）（表 ）。例患者中有 例（）出现持续发热，例（）肝脾肿大。实验室检查发现 例
5、患者均出现不同程度的血细胞减少，其中例系减少，例系减少，均出现血小板减少。例患者（，）甘油三酯 ，例患者（，）铁蛋白 。例患者骨髓涂片均可见组织细胞吞噬血细胞（图 ）。图 噬血细胞现象 突变情况本组 例标本检出 种 突变，其中 种为错义突变（图 ），余 种均为同义突变。种错义突变分别为 （）和 （，良性）。种同义突变分别为 （，良 性），（，良性），（，意义不明确）和 （，良性）（表 ）。查询 种错义突变临床致病性，（，）为良性突变，而 （）在 和 均未收 录，查 询 突 变 预 测 网 站 （：）预测该新发突变 （）可能致病。讨论 分为原发性和继发性，原发性 主要是遗传缺陷所致，继发性 多为
6、感染性疾病、恶性肿瘤或自身免疫性疾病的基础上发生，以 感染常见 。本组 例表 例成人噬血细胞性淋巴组织细胞增生症患者 基因突变检测例号性别年龄（岁）临床诊断突变位点女 脓毒血症；肺部感染 ；男 感染相关性疾病；脓毒血症 女 噬血细胞综合征；淋巴瘤，肺部感染 ；女 非霍奇金淋巴瘤 ；男 噬血细胞综合征；淋巴瘤；败血症；肺部感染 ；女 骨髓增生异常综合征 ；男 噬血细胞综合征；肺部感染；中枢感染 ；男 类白血病反应；血小板减少症；急性阑尾炎 ；图 测序突变类型及突变位点：正常对照（反向测序）；杂合错义突变（反向测序）；正常对照；纯合错义突变（正向测序）成人 患者多伴感染尤其是 感染，与以往研究一致
7、 。因此，在 诊断过程中进行相关病原体检测、筛查，对协助寻找 的病因或诱因具有重要意义。的确诊主要依赖于检测出 相关致病基因突变。在 相关致病基因中，突变占亚洲人突变类型的 。定位于染色体 ，包含 个外显子，编码 蛋白，与颗粒胞吐过程有关 。基因突变后，细胞毒性颗粒释放功能受损，对感染的靶细胞杀伤功能发生障碍，抗原持续性刺激 临床与实验病理学杂志 ；（）淋巴细胞活化增殖，释放炎症因子，导致过度炎症反应的 。截至 年，已 发 现 多 种 突 变 。突变可导致 型家族性 ，传统观点认为 属于常染色体隐性遗传病 ，但王旖旎等 研究显示 为显、隐性均会发病，本组结果也证实了该观点。本组例 检测出携带
8、和 两种错义突变，为纯合错义突变，已有研究表明该突变是良性突变，另一杂合突变 （）为首次报道，其致病性未明。预测该新发突变（）可能致病。突变导致 蛋白第 位亮氨酸被甲硫氨酸取代，而 蛋白的第 位氨 基 酸 是 结 合 所 必 须 的，蛋 白 与 直接相互作用，完成颗粒胞吐过程，其第 位氨基酸改变后与 的结合作用直接缺失 。另与 突变紧邻的 突变（，）也已证实为临床致病突变，由此推测该新发现的突变位点是致病突变。本组例 患者放弃治疗，未进行随访，其骨髓样本包括 在内的其他 个 相关致病基 因 、进行全外显子测序，结果显示除了携带检测出的 杂合突变外，未发现其他 相关致病基因的突变。由此我们推测该
9、新发现的 位点杂合突变，是导致该患者发病的重要遗传基础。越来越多的研究证实，患者大多携带有疾病相关基因的突变，本组仅对 例患者进行最常见的 突变筛查，例行 相关致病基因全外显子检测；还需积累更多临床样本进行 相关致病基因的检测。本次筛查提示 相关致病基因检测对临床确诊、及时识别并治疗携带致病基因的高风险者，降低其病死率的必要性和重要性。参考文献：涂松涛，周玉兰，李菲异基因造血干细胞移植治疗成人噬血细胞综合征的研究进展 中国实验血液学杂志，（）：，：，（）：，（）：，：，（）：曹富娇，郭洁，姜中兴成人继发性噬血细胞综合征的临床特征及预后分析 临床血液学杂志，（）：黄娇娇，罗南都，杜作晨，等不同
10、病毒 载量的噬血细胞综合征患儿临床特征分析 中国实验血液学杂志，（）：张梦潇，汪英颖，刘亚楠，等 例成人继发性噬血细胞综合征实验室检查及临床分析 武汉大学学报（医学版），（）：，郭义敏，韩争争，温晓霞，等 例儿童噬血细胞综合征基因结果分析及临床疗效观察 贵州医药，（）：，（），（）：，（）：，（）：，（）：颜宏利，王瑶，刘明华 基因剪接突变所致家族性嗜血细胞综合征 例报告 中国临床医学，（）：杜立安，罗建明噬血细胞性淋巴组织细胞增生症的分类、发病机制及诊治研究进展 山东医药，（）：王旖旎，王昭，张嘉，等成人噬血细胞综合征基因型特点及家系调查 临床和实验医学杂志，（）：，（）：，：，（）：临床与实验病理学杂志 ；（）