1、 和 在结核性胸膜炎胸腔积液中表达的意义及其诊断价值梁亚充 王国卫 马丽 池跃朋 王智慧 谢兰品 董雅坤 李晓倩 【摘要】目的 探讨富含丝氨酸 精氨酸剪接因子（）、微小（）在结核性胸膜炎胸腔积液中表达的意义及诊断价值。方法 选取 年 月到 年 月本院收治的 例结核性胸膜炎胸腔积液患者作为结核组，另选取同期非结核性胸膜炎胸腔积液患者 例作为对照组。两组患者均于无菌条件下进行胸腔穿刺，抽取胸腔积液进行、水平测定。法分析结核组 与 水平的相关性。采用多因素 回归分析影响结核性胸膜炎发生的危险因素。采用受试者工作特征（）曲线分析胸腔积液 和 水平对结核性胸膜炎的诊断价值。结果 结核组胸腔积液 表达水平
2、明显高于对照组（.），表达水平明显低于对照组（.）。相关性分析显示，结核组胸腔积液 与 表达水平呈负相关（.）。多因素 回归分析显示，高水平、低水平是影响结核性胸膜炎发生的危险因素（.）。、联合诊断结核性胸膜炎的价值高于 及 单独诊断。结论 在结核性胸膜炎胸腔积液中表达水平升高，在结核性胸膜炎胸腔积液中表达水平降低，两者是影响结核性胸膜炎发生的危险因素，两者联合对于结核性胸膜炎具有较高的诊断价值。【关键词】富含丝氨酸 精氨酸剪接因子；微小；结核性胸膜炎；胸腔积液；诊断价值 ，；，【】（）（），（）（.），（.）（.）（.）：基金项目：河北省医学科学研究课题计划项目（）作者单位：河北 石家庄，河
3、北省胸科医院 结核二科、中医科、内镜室通信作者：李晓倩，：临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期 （.），【】；结核性胸膜炎是由于结核分枝杆菌及其代谢产物入侵胸腔侵犯胸膜引发的一种炎症反应，胸腔积液是渗出性胸膜炎主要表现。结核性胸膜炎起病较为隐匿，临床容易出现漏诊误诊，因此寻找特异性的诊断指标意义重大。富含丝氨酸 精氨酸剪接因子（，）家族已被证实在多种癌症中呈现出异常表达。研究表明，在结核性胸腔积液中表达异常升高，敲低 能够抑制炎症刺激的胸膜间皮细胞的细胞增殖。微小（，）参与多种疾病的病理生理过程。等人研究发现，结核性胸腔积液外泌体 表达水平降低，同时抑制 能够促进 的表达。基于此，本研究对结核性
4、胸膜炎胸腔积液中、进行检测，以探讨两者对结核性胸膜炎的诊断价值。资料与方法一、一般资料选取 年 月到 年 月本院收治的例结核性胸膜炎胸腔积液患者作为结核组，患者均通过胸腔积液的常规检查及胸膜活检确诊。纳入标准：符合肺结核诊断 中结核性胸膜炎相关诊断标准：胸腔积液为渗出液，胸腔积液或胸膜组织活检显示结核分枝杆菌阳性；胸膜组织活检显示典型的结核性病理改变。以上两条满足其中一条即可确诊。另选取同期非结核性胸膜炎胸腔积液患者 例作为对照组。排除标准：其它原因如恶性肿瘤、肺癌等导致的恶性胸腔积液患者；免疫性疾病导致的胸腔积液患者；不接受穿刺患者；近三个月内有胸部手术史患者；精神异常无法配合患者。两组患者
5、对本研究知情并签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会批准，伦理批号：。二、方法 临床资料收集收集患者入院时的基本资料，包括性别、年龄、体质量指数、饮酒史、吸烟史、临床表现（发热、胸痛、咳嗽、气短）。患者住院后，经超声定位引导，无菌条件下进行胸腔穿刺，收集胸腔积液，记录胸腔积液体积，对胸腔积液进行常规检查，包括腺苷脱氨酶（，）、乳酸脱氢酶（，）、干扰素（，）、淋巴细胞计数、总蛋白等。样品采集两组患者均于无菌条件下进行胸腔穿刺，抽取胸腔积液约，置含肝素的离心管中，离心机 离心，取上清液，置 冰箱保存待测。主要仪器与试剂 试剂（货号：）购自上海杰美基因医药科技有限公司；反转录试剂盒（货号：）购自定州
6、百克赛斯生物科技有限公司；荧光定量 试剂盒（货号：）购自上海吉玛制药技术有限公司；仪（型号：）购自美国 公司；试剂盒（货号：）购自武汉菲恩生物科技有限公司；型酶标仪购自美谷分子仪器（上海）有限公司。检测胸腔积液上清液 的表达水平使用 试剂提取胸腔积液上清液样本中总，反转录成（反转录反应体系：总 、（）、（）后进行 反应，检测条件：预变性 循环 次，变性、退火，延伸 秒，共循环 次。以 为内源对照，以 的方法计算 的表达水平。引物由亚泰恒信生物科技（北京）有限公司合成（见表）。法检测胸腔积液 表达水平采用 法检测胸腔积液 水平，操作步骤按照 试剂盒说明书进行。三、统计学分析临床肺科杂志 年 月
7、第 卷第 期表 引物序列基因正向引物 反向引物 .作为本研究数据的分析软件。计量资料符合正态分布，以均数 标准差（?）表示，两组间比较采用 检验；计数资料以（）表示，两组间比较采用检验；相关性分析胸腔积液 与 的关系。多因素 回归分析影响结核性胸膜炎发生的危险因素；受试者工作特征（）曲线评价胸腔积液、表达水平对结核性胸膜炎的诊断价值，、联合诊断与两者单独诊断 曲线下面积（）的比较采用 检验；.代表统计学上存在显著差异。结 果一、两组临床资料比较两组年龄、性别、体质量指数、胸腔积液体积、发热、胸痛、咳嗽、气短、饮酒史、吸烟史比较无显著差异（.）；结核组、淋巴细胞计数、总蛋白均明显高于对照组（.）
8、（见表）。表 两组临床资料比较（?，）项目结核组（）对照组（）年龄（岁）性别（男 女）体质量指数（）胸腔积液体积（）临床表现 发热（有 无）胸痛（有 无）咳嗽（有 无）气短（有 无）饮酒史（有 无）吸烟史（有 无）（）（）（）淋巴细胞计数（）总蛋白（）二、两组胸腔积液、表达水平比较结核组胸腔积液 水平明显高于对照组（.），明 显 低 于 对 照 组（.）（见表）。三、结核组胸腔积液 与 表达水平的相关性分析 网址预测 与 间存在结合位点（见图）。相关性分析结果显示，结核组患者胸腔积液 与 表达水平呈负相关（.，.）（见图）。四、多因素 回归分析影响结核性胸膜炎发生的因素以发生结核性胸膜炎为因变
9、量（是 ，否），（.，.）、图 与 结合位点临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期表 两组胸腔积液、表达水平比较（?）组别（）结核组 对照组 图 结核组患者胸腔积液 与 相关性（.，.）、（.，.）、淋巴细胞计数（.，.）、总蛋白（.，.）、（.，.）、（.，.）为自变量进行多因素 回归分析，结果显示，高水平（.）、低水平（.）是影响结核性胸膜炎发生的危险因素（.）（见表）。五、胸腔积液、表达水平对结核性胸膜炎的诊断价值分析 曲线显示，单独诊断结核性胸膜炎的 为.（：.），其敏感度、特 异 性 分 别 为.、.，截 断 值 为.；单独诊断结核性胸膜炎的 为.（：.），其敏感度、特异性分别为.、.，
10、截断值为.；两者联合诊断结核性胸膜炎的 为.（：.），其 敏 感 度、特 异 性 分 别 为.、.，两者联合诊断的 显著大于 单独诊断的（.，.），单 独 诊 断 的 （.，.）（见图）。表 多因素 回归分析影响结核性胸膜炎发生的因素变量 淋巴细胞计数 总蛋白 图 胸腔积液、诊断结核性胸膜炎的 曲线讨 论结核病是一种全球性的传染性疾病，中国的结核病负担高居世界第二位。结核性胸膜炎是肺外结核的一种类型，患者常伴有发热、胸痛、咳嗽、气短等不适，并出现不同程度的胸腔积液。胸腔积液可由多种病因引起，如多种恶性肿瘤和一些良性炎症性疾病，而结核性胸膜炎引起的胸腔积液占。由于结核性胸膜炎胸腔积液中结核分枝杆
11、菌数量较少，临床检查胸腔积液中结核分枝杆菌难度较大，难以满足诊断要求。目前对于结核性胸膜炎的诊断包含细菌学、分子生物学、病理学、免疫学等多个学科，、干扰素释放试验及聚合酶链反应等发挥了重要作用。不断寻临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期求新的生物标志物和治疗靶点在结核性胸膜炎的治疗中尤为重要。家族主要参与基因的剪切调节，研究证实，家族参与多种疾病的进展，。人 基因位于第 号染色体上，至少包含 个外显子和 个内含子。在急性淋巴细胞白血病、结直肠癌等多种疾病中均呈现出过表达的现象。本研究发现，结核组患者胸腔积液中 表达水平明显升高，与其在淋巴细胞白血病、结直肠癌中的表达一致，在疾病进展过程中发挥促进
12、作用。同时 等人研究发现，家族的其它三种剪接因子在结核性胸腔积液中也呈现出表达升高的现象。由此推测 能够促进结核性胸膜炎的发生发展，可能与结核性胸膜炎的发病机制存在一定的关联。能够与靶 的 结合从而调控基因的表达，参与多项生理过程。阳慧等人发现，能够抑制心肌炎模型大鼠的炎性反应和心肌细胞凋亡。体外细胞实验表明，能够通过靶向 基因抑制甲状腺癌细胞的增殖和迁移。同时 也可接受 的靶向负调控，抑制食管癌细胞的增殖，诱导癌细胞凋亡。本研究中，结核组患者胸腔积液中 表达水平明显降低，表明与其在癌症中的肿瘤抑制作用一样，对结核性胸膜炎同样具有抑制作用。通过 网站分析显示，与 存在靶向结合 位 点，表 明
13、极有可能是 的靶基因。相关性分析结果显示，结核组患者胸腔积液 与 表达水平呈负相关，提示 可能通过负向调控 参与结核性胸膜炎的发生发展。本研究中，在两组患者入院后对其胸腔积液进行了生化检查，发现结核组患者胸腔积液中、淋巴细胞计数、总蛋白均明显高于对照组，但多因素 回归分析显示，、淋巴细胞计数、总蛋白不是影响结核性胸膜炎发生的危险因素，可能是由于这些指标容易受到患者的年龄、淋巴细胞数量、结核分枝杆菌的细菌负荷等因素的影响，但依然可作为诊断的参考项目。多因素 回归分析显示，高水平、低水平是影响结核性胸膜炎发生的危险因素，表明两者在结核性胸膜炎的疾病进展中发挥着重要作用。同时 曲线显示，胸腔积液、诊
14、断结核性胸膜炎的 分别为.、.，两者联合诊断的 为.，且敏感度高于两者单独诊断。表明胸腔积液、对结核性胸膜炎有一定的诊断价值，且两者联合的诊断价值更高。综上所述，结核性胸膜炎患者胸腔积液 表达升高，表达降低，两者可能参与结核性胸膜炎的疾病进展过程，是影响结核性胸膜炎的危险因素，两者联合对结核性胸膜炎具有更高的诊断价值，有望成为早期诊断指标。但本研究纳入病例数较少，同时并未深入探讨两者在结核性胸膜炎中的具体作用机制，因此后续仍需进行深入研究。参考文献李丹华，李润浦，闫姗姗，等、在结核性胸膜炎胸腔积液中表达的意义及鉴别诊断价值 实用医学杂志，（）：席素雅，乔庆哲，刘薇，等 白介素 联合腺苷脱氢酶在
15、结核性胸膜炎中的诊断价值 中国医刊，（）：高珊，黄海荣，初乃惠 结核性胸膜炎常用诊断方式的应用 中国临床医生杂志，（）：刘经纬，李浩，任玲，等 基于 数据库分析富含丝氨酸精氨酸剪接因子家族在不同癌症中的表达及其预后意义中国医科大学学报，（）：，（）：肺结核诊断 中国感染控制杂志，（）：，：，：，（）：阳苑，胡明明，鲁葆华，等 恶性胸膜间皮瘤合并肺结核 结核性胸腔积液的临床特征分析 国际呼吸杂志，（）：，（）：李瑞雪，罗浩，张育泉，等 结核性胸膜炎临床诊断的研究进展 临床误诊误治，（）：熊焰，汪奇柏 丝氨酸和富含精氨酸剪接因子 基因通过调控翻译过程影响神经胶质瘤 细胞的增殖 中国肿瘤生物治疗杂志
16、，（）：段玉青，夏宁，贾云泷，等 通过调控 可变剪接促进食管鳞状细胞癌 细胞增殖、侵袭和迁移 中国癌症杂志，（）：（下转第 页）临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期，（）：，（）：，：，（）：，（）：，：，（）：，（）：李秀业，杨霁，赵惠敏 药物相关性间质性肺疾病四例误诊分析 临床误诊误治，（）：，：（），（）：陈孟毅，孟爱民 肺纤维化动物模型及研究进展 中国比较医学杂志，（）：陈佳音，马洁，童刚领，等 奥沙利铂相关性肺损伤的文献分析 中国医院药学杂志，（）：盛海燕，冯瑞娥，胥杰，等 胺碘酮肺部不良反应二例中华结核和呼吸杂志，（）：袁芳，傅应云 药物相关间质性肺病的研究进展 河北医药，（）：，：，（）：陈银 放射性肺损伤的研究进展 临床肿瘤学杂志，（）：，（）：，：，（）：，（）：，（），（）：，：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：收稿日期：（上接第 页），：，（）：，（）：，（）：阳慧，苏雨江，钟江华，等 靶向 抑制心肌炎的炎性反应和心肌细胞凋亡 中国老年学杂志，（）：王小蕊，董非斐，何碧凝，等 通过靶向 基因抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的体外研究 中国老年学杂志，（）：徐萌