1、NSFC案例精讲班(六)解螺旋课堂2017老谈解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂0课 程 内 容文献案例分析研究模式总结132相关技术介绍解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析蛋白修饰泛素化磷酸化乙酰化甲基化解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.1.Expression of PGK1 correlated with distant metastasis and poor prognosis of human
2、HCCs.NLT：normal liver tissue;PT：peritumoral liver tissue.MFH：metastasis-free HCCEHMH：HCC with extrahepatic metastasis解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.2.PGK1 contributed to liver cancer cell proliferation,glycolysis,and tumorigenesis.Myc:transcription factor for PGK1解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋
3、课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.2.PGK1 contributed to liver cancer cell proliferation,glycolysis,and tumorigenesis.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.3.High expression of PGK1 K323 acetylation in HCC was correlated with poor survival of HCC patients.TSA/NAM:deacetylationinhibitors解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋
4、课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.3.High expression of PGK1 K323 acetylation in HCC was correlated with poor survival of HCC patients.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.4.PCAF promotes PGK1 K323 acetylation.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.4.PCAF promotes PGK1 K323 acetylation.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解
5、 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.5.SIRT7 deacetylates PGK1 K323.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.5.SIRT7 deacetylates PGK1 K323.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.6.Acetylated PGK1 was more potent at promoting cell metabolism,glucose uptake,and tumorigenesis.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献
6、案 例 分 析FIG.6.Acetylated PGK1 was more potent at promoting cell metabolism,glucose uptake,and tumorigenesis.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析逻辑思路：APGK1 临床意义Fig.1BFig.2CFig.3DFig.4PGK1 的表型研究PGK1 K323乙酰化的临床意义PCAF 是乙酰化酶EFig.5SIRT7 是去乙酰化酶DFig.6乙酰化的PGK1表型研究解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析FIG.
7、7.Graphic model of K323 acetylation-dependent regulation of PGK1 function in liver cancer.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 1.NFAT3 is overexpressed in skin cancer cell lines.NFAT：nuclear factor of activated T cell transcription factor解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺
8、旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 2.NFAT3 has an oncogenic role in skin cancer cells.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 2.NFAT3 has an oncogenic role in skin cancer cells.2D culture3D culture解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 3.CDK3 interacts with NFAT3.two-hybrid assayFlag-tagge
9、d NFAT3HA-tagged CDK3解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 4.CDK3 phosphorylates NFAT3 at Ser259.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 5.CDK3 enhances the transactivation and transcription activity of NFAT3.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 6.NFAT3 phosphorylation is resp
10、onsible for cell transformation,proliferation and tumor growth.3D culture解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 7.CDK3 and phosphorylated NFAT3 are overexpressed in human skin cancer.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析ANFAT3在肿瘤细胞中的表达Fig.1BFig.2CFig.3DFig.5逻辑思路：EFFig.7NFAT3 在肿瘤中起到oncogene
11、作用（表型）CDK3与NFAT3 相互作用Fig.4CDK3 磷酸化 NFAT3 的 Ser259 位点CDK3激活NFAT3的转录能力Fig.6NFAT3磷酸化后，促进肿瘤恶性表型CDK3和磷酸化的NFAT3在肿瘤中有相同的表达趋势G解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析cul3：Cullin-3 E3 ligaseDBC2/RhoBTB2：a substrate-specific adaptor protein解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献
12、案 例 分 析Figure 1.The interaction between DBC2 and MSI2.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 1.The interaction between DBC2 and MSI2.Y284:critical for Cul3/DBC2 interaction解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 2.DBC2 induces MSI2 ubiquitination and degradation in breast cancer cells.R
13、OC1/Cul3 co-expression enhanced MSI2 degradationMG132:proteasome inhibitor解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 2.DBC2 induces MSI2 ubiquitination and degradation in breast cancer cells.CHX:蛋白翻译阻断剂解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 3.Endogenous DBC2 regulates MSI2 ubiquitination a
14、nd stability in breast cancer cells.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 4.DBC2 regulates the effect of MSI2 on breast cancer cell survival.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 4.DBC2 regulates the effect of MSI2 on breast cancer cell survival.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分
15、析Figure 5.DBC2 inhibits MSI2-dependent clonogenic growth and cell migration.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figure 6.Inverse correlation between DBC2 and MSI2 protein levels in breast cancer cell lines,normal breast tissues and breast cancer tissues.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析Figu
16、re 6.Inverse correlation between DBC2 and MSI2 protein levels in breast cancer cell lines,normal breast tissues and breast cancer tissues.解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂1文 献 案 例 分 析逻辑思路：ADBC2/MSI2 相互作用Fig.1BFig.2CFig.3DFig.4DBC2 诱导 MSI2 泛素化DBC2 调控 MSI2 泛素化和稳定性DBC2 调控MSI2介导的细胞表型（周期/凋亡）EFig.5DBC2 调控MSI2介导
17、的细胞表型（克隆形成/增殖）DFig.6临床样本中，DBC2/MSI2 表达相反解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂2研究模式总结酶/底物相互作用1相互作用的机制（位点/domain）2酶/底物介导的效应(细胞学/动物)3临床样本验证/预后证据4yeast two hybridIP/CoIPGST-pull downsite mutationtruncation assaydomain swap增殖/克隆形成周期/凋亡转移/侵袭/血管新生表达水平（RNA/蛋白）预后（OS/PFS)解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂3相关技术介绍yeast two hybrid 原理解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂3相关技术介绍IP 原理解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂3相关技术介绍GST-pulldown 原理解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 解 螺 旋 课 堂3相关技术介绍domain swap 原理关键结构域关键结构域结合蛋白解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂 THANKS2017-1-8解螺旋课堂 解螺旋课堂 解螺旋课堂