1、儿童保健/论著纯母乳喂养儿迟发型母乳性黄疸与乳汁中 3 种功能性低聚糖水平及婴儿排便频次的相关性分析陈艳1，李檬1，2，张园园1，熊晶晶1，2，刘梅1，黄永坤1，21.昆明医科大学第一附属医院儿科，云南 昆明 650032;2.云南省检验医学重点实验室基金项目:国家自然科学基金项目(81960102);云南省科技厅昆明医科大学应用基础研究联合专项资金项目 2019FE001(061);昆明医科大学第一附属医院博士基金项目(2019BS016)通信作者:黄永坤，Email:hykkmyncnwd 摘要:目的探讨纯母乳喂养母乳乳汁中功能性低聚糖水平与迟发型母乳性黄疸(LBMJ)的相关性，为 LBM
2、J 的病因研究提供理论依据。方法选取昆明医科大学第一附属医院儿科门诊和预防保健科 03 月龄纯母乳喂养足月儿 60 例，根据不同排便频次分为 A、B 及 C 组，即 3 d 以内排便 1 次或排便3 次/d 为 A 组;排便3 次/d 为 B 组;超过 4 d 排便 1 次为 C 组;采用手挤奶方法收集婴儿母亲乳汁，收集后立即存置于80 冰箱内，待用超高效液相色谱质谱仪检测功能性低聚糖的含量。结果行统计学分析。结果纯母乳喂养母乳乳汁中 3 种功能性低聚糖水平在婴儿不同排便频次组比较，差异有统计学意义(H2FL=0.978，P2FL=0.013;H 三糖=13.991，P 三糖=0.001;H
3、四糖=1.505，P 四糖=0.041);不同排便频次组黄疸与非黄疸婴儿比较，差异有统计学意义 2(A)=4.472，P(A)=0.001;2(B)=5.196，P(B)=0.001;2(C)=3.000，P(C)=0.017;不同功能性低聚糖在婴儿黄疸及非黄疸组差异无统计学意义(H2FL=0.459，P2FL=0.646;H 三糖=0.988，P三糖=0.323;H 四糖=0.633，P 四糖=0.527)，但黄疸组中 3 种功能性低聚糖水平较非黄疸组高。结论03 月龄纯母乳喂养LBMJ 婴儿，母乳中低聚糖水平较非 LBMJ 婴儿高，低聚糖水平越高，排便频次越多。关键词:迟发型母乳性黄疸;功
4、能性低聚糖;婴儿;排便频次;母乳喂养中国图书分类号:442.4文献标识码:A文章编号:1001-4411(2023)03-0430-06;doi:10.19829/j.zgfybj.issn.10014411.2023.03.012Study on the correlation among the levels of three functional oligosaccharides inbreast milk，infant defecation frequency and lateonset breast milkjaundice during exclusive breastfeedin
5、gCHEN Yan*，LI Meng，ZHANG Yuanyuan，XIONG Jingjing，LIU Mei，HUANG Yongkun*Department of Pediatrics，The 1st Affiliated Hospital of Kunming Medical University，Kunming，Yunnan 650032，ChinaAbstract:ObjectiveTo analyze the relationship between functional oligosaccharide level and lateonset breastmilk jaundic
6、e(LB-MJ)during exclusive breastfeeding，and to provide theoretical basis for the study of LBMJ etiology.MethodsSixty fullterm infants aged03 months were selected from our hospital.According to different defecation frequency，they were divided into group A，B and C，namely，one defecation within 3 days or
7、 less than 3 defecation per day was group A;Defecation 3 times/day was group B;One defecation over 4days was group C;The mothers milk was collected by hand milking，and immediately stored in a refrigerator at 80.The content offunctional oligosaccharides was determined by ULTA performance liquid chrom
8、atography mass spectrometer.The results were statistically an-alyzed.esults Comparison of the levels of three functional oligosaccharides in breast milk of infants with different defecation frequencygroups showed statistically significant differences in exclusive breastfeeding(H2FL=0.978，P2FL=0.013;
9、Htrisaccharide=13.991，Ptrisaccharide=0.001;Htetrose=1.505，Ptetrose=0.041);The difference between jaundice and nonjaundice infants in different def-ecation frequency group was statistically significant 2(A)=4.472，P(A)=0.001;2(B)=5.196，P(B)=0.001;2(C)=3.000，P(C)=0.017;Different functional oligosacchar
10、ides showed no statistical difference between the jaundice groupand the nonjaundice group(H2FL=0.459，P2FL=0.646;Htrisaccharide=0.988，Ptrisaccharide=0.323;Htetrose=0.633，Ptet-rose=0.527)，but the levels of three functional oligosaccharides in the jaundice group were higher than those in the non jaundi
11、cegroup.ConclusionIn LBMJ infants aged 03 months，the level of oligosaccharide in breast milk was higher than that in nonLBMJ in-fants.The higher the level of oligosaccharide，the more frequent the defecation.Keywords:Lateonset breast milk jaundice;Functional oligosaccharide;Infant;Defecation frequenc
12、y;Breast feeding随着目前母乳喂养优点的大力普及，母乳性黄疸的发生率逐年增加。母乳性黄疸是指纯母乳喂养的婴儿在生后 13 个月内黄疸持续不退或退而复现的一种黄疸12，多于生后 68 d 出现黄疸，1014 d 达高峰，可持续 23 周，甚至 23 个月才消退。母乳性黄疸婴儿除黄疸外，一般情况良好，试停母乳喂养35 d，黄疸明显消退，目前有文献报道其发生率达20%以上，一般分为早发型和迟发型3。早发型多与母乳喂养不足及胎粪排出延迟有关，晚发型多与感染034中国妇幼保健2023 年 2 月第 38 卷第 3 期Maternal and Child Health Care of Chi
13、na.February 2023，Vol.38，No.3有关，但其确切病因及发病机制尚不完全清楚，本文通过检测与分析纯母乳喂养母乳乳汁中三种功能性低聚糖水平与婴儿排便频次及 LBMJ 的关系，探讨母乳功能性低聚糖与 LBMJ 的关系。1资料与方法1.1资料来源选择2020 年8 月2021 年8 月在昆明医科大学第一附属医院儿科门诊和预防保健科就诊的 0.53 月龄健康足月纯母乳喂养婴儿和配对纯母乳喂养的母亲 60 例为研究对象。采用手挤奶方法收集 0.53 月龄婴儿母亲成熟乳，每位对象收集不少于 5 ml 的清洁母乳，收集后立即存置于80 冰箱内保存待测。根据婴儿的排便频次不同将乳汁和婴儿匹
14、配分为 3 组:即 3 d 以内(含 3 d)排便 1 次或排便每日少于 3 次(含 3 次)者为 A 组;排便每天多于 3 次者为 B 组;4 d 以上或需辅助才排便者为 C组。排除标准:感染性腹泻、肛管直肠异常疾病、药物所致便秘及家族性胃肠道遗传病史等;近 2 周大便次数、颜色及性状明显改变的婴儿。其中，黄疸婴儿纳入标准:符合LBMJ婴儿的诊断标准3;采样前未使用过光疗、肝酶诱导剂、蒙脱石散及微生态制剂等治疗。排除标准:新生儿溶血、感染、缺氧、肝功能障碍及胆道闭锁，先天性遗传代谢疾病等其他原因所致的病理性黄疸;吃奶、睡眠、尿便颜色、体质量增长等一般情况异常的婴儿。本研究符合医学伦理学要求，
15、且经医院伦理委员会审查，婴儿的家长均签署知情同意书。1.2方法1.2.1主要仪器与试剂 ACQUITY UPLC 氨基色谱柱(2.1 mm100 mm，1.7 m)美国 Waters 公司;1290系列超高效液相色谱串联三重四极杆质谱仪美国Agilent 公司;高速低温离心机 Centrifuge 5804 ep-pendorf 公司。标准品:13，14 半乳三糖(三糖)、13，14，13 半乳四糖(四糖)购自上海甄准生物科技有限公司;2岩藻糖半乳糖(2FL)雀巢公司赠送的产品恩可儿(NANCAE)含2FL 500 mg。1.2.2母乳功能性低聚糖的提取将冰冻标本置于常温解冻后取母乳样品 50
16、0 l，加入等体积的超纯水，在 6 000 r/min、4 离心机离心 10 min，去除上层脂肪，取下清液，加入 1.2 ml 的乙腈，涡旋混匀，超声 5 min，10 000 r/min、4 离心 10 min 后取上清液，此离心过程重复操作 2 次，上清液通过 0.22 m的针式过滤器滤入色谱瓶上机检测。见表 1。1.2.3色谱质谱条件1.2.3.1色谱条件ACQUITY UPLC 氨基色谱柱(2.1 mm100 mm，1.7m);柱温 50;进样体积1 l，流速 0.2 ml/min;流动相 A 为水，流动相 B 为乙腈;采用等度洗脱，获得最优流动相条件:90%A;10%B。1.2.3.2质谱条件电喷雾离子源;正离子扫描;定量检测方式:采用多反应监测(MM)模式;离子源温度 150，脱溶剂温度 500，脱溶剂气流量1 000 L/h，碰撞气流速 10 l/min。表 13 种母乳低聚糖子离子扫描结果HMOs母离子(m/z)子离子(m/z)碰撞能量/V锥孔电压/V毛细管电压/V三糖527.112 722.966 9，365.086 836823.07四糖689.121 223.0