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2023年G试验临床推广(教学课件).ppt

1、北京金山川科技开展北京金山川科技开展 天津市一瑞生物工程天津市一瑞生物工程 G G试验检测及内毒素检测的临床意义试验检测及内毒素检测的临床意义 Part III 临床评价临床评价 Part I G G试验试验-深部真菌感染检测深部真菌感染检测 内毒素检测内毒素检测革兰阴性菌检测革兰阴性菌检测 Part II 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染IFI的定义的定义 定义定义:指致病性真菌侵犯皮指致病性真菌侵犯皮 下组织、黏膜、肌肉下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病,的真菌感染性疾病,危害性较大。危害性较大。条件致病性真菌条件致病性真菌 1.念珠菌属念珠菌属-念珠菌念珠

2、菌血症血症 2.曲霉菌属曲霉菌属-侵袭性侵袭性肺曲霉菌病肺曲霉菌病IPA)3.其他其他 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 侵袭性真菌感染的特点侵袭性真菌感染的特点 1.不产生内毒不产生内毒 素和外毒素素和外毒素 4.早期病症无特异性,早期病症无特异性,往往被原发病掩盖,病往往被原发病掩盖,病程长,发现较晚,死亡程长,发现较晚,死亡率高率高 2.致病力一般致病力一般 较弱,机体免较弱,机体免 疫低下时发生疫低下时发生 3.感染菌种变化,感染菌种变化,白色念珠菌感染下白色念珠菌感染下降,曲霉菌感染增降,曲霉菌感染增长趋势上升明显长趋势上升明显 MB-80系统

3、简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 1.1.长期使用广谱抗生素长期使用广谱抗生素 2.2.抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗 5.AIDS感染、基础类疾病感染、基础类疾病 侵袭性真菌病侵袭性真菌病IFD的诱因的诱因 4.骨髓和实体器官移植骨髓和实体器官移植 3.插管等侵袭性治疗插管等侵袭性治疗 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 6.使用激素治疗的病人使用激素治疗的病人 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染IFIIFI现状现状 IFIIFI诊断困难及漏诊情况严重诊断困难及漏诊情况严重 IFI发生率不断增加发生率不断增加 I

4、FI感染病死率居高不下感染病死率居高不下 1 2 3 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 严重真菌感染迅速上升势头严重真菌感染迅速上升势头 危重病人的存活期危重病人的存活期延长延长 延长了真菌感染延长了真菌感染的的 高高 危危 期期 使此类患者业已增加使此类患者业已增加的人数进一步扩大的人数进一步扩大 医学和相关科学的进步医学和相关科学的进步 是日益严重的威胁是日益严重的威胁!国内深部真菌感染不容无视 18182828282875750 0101020203030404050506060707080801981-19861981-19861986-1991

5、1986-19911991-19961991-19961996-20011996-2001 引自北京协和医院王爱霞主任课件引自北京协和医院王爱霞主任课件 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 20年内院内年内院内149例真菌感染的变化例真菌感染的变化 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染IFIIFI现状现状 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 IFIIFI诊断困难及漏诊情况严重诊断困难及漏诊情况严重 IFI发生率不断增加发生率不断增加 IFI感染病死率很高感染病死率很高 1 2 3 美国四大医疗中心做的关于美国四大医疗中心做的关

6、于IFIIFI的一项回忆性研究的一项回忆性研究 2424363641411515202025253030353540404545延迟1天延迟1天延迟2天延迟2天延迟3天及以上延迟3天及以上Garey KW et al.Clin Infect Dis 2022,43:2531.死亡率死亡率(%)(%)延迟治延迟治疗时间疗时间d 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染IFIIFI现状现状 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 IFIIFI诊断困难及漏诊情况严重诊断困难及漏诊情况严重 IFI发生率不断增加发生率不断增加 IFI感染病死率很高感染病死率很高 1 2 3 尸检研

7、究发现:尸检研究发现:北京协和医院北京协和医院19531953-19931993年间年间34473447例尸检,发现深部真菌感染例尸检,发现深部真菌感染8585例,其中生前明确真菌感染诊断者仅例,其中生前明确真菌感染诊断者仅5 5例,占例,占5.95.9,漏诊率漏诊率高达高达94.194.1。诊断困难的主要原因:-临床表现不典型,易被根底疾病所掩盖 -确诊常需侵入性手段获得组织标本,侵入性操作常因患者 的病情所限难以实施-真菌检测工程开展相对缺乏或滞后 IFIIFI诊断困难及漏诊情况严重诊断困难及漏诊情况严重 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 方方 法法

8、 特特 点点 传传 统统 检检 查查 直接培养真菌法直接培养真菌法 耗时长耗时长,阳性率低,结果是定阳性率低,结果是定性的,有些标本采集困难。可性的,有些标本采集困难。可以区分菌种。以区分菌种。辅助方法:临床表现,免疫学,病辅助方法:临床表现,免疫学,病理学,影像学检查等理学,影像学检查等 观察期不确定,费时费力,特观察期不确定,费时费力,特征性不明显并对医师的专业水征性不明显并对医师的专业水平要求高平要求高 非传统非传统 检查检查 1.G1.G试验:试验:通过检测通过检测(1(1-3)3)-D D-葡葡聚糖的含量,判断是否有真菌感染聚糖的含量,判断是否有真菌感染 耗时短,灵敏度高,特异性强,

9、耗时短,灵敏度高,特异性强,定量检测可判断感染严重程度定量检测可判断感染严重程度 2.GM2.GM试验:试验:曲霉属半乳甘露聚糖抗曲霉属半乳甘露聚糖抗原检测。判断是否曲霉属真菌感染原检测。判断是否曲霉属真菌感染 3.PCR3.PCR技术:技术:真菌的抗原、抗体及代真菌的抗原、抗体及代谢产物的血清学检查和真菌核酸检谢产物的血清学检查和真菌核酸检测测 侵袭性真菌感染的临床检测方法比照侵袭性真菌感染的临床检测方法比照 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 G G 试试 验验 1 1-3 3-D D-葡聚糖可特异性激活鲎葡聚糖可特异性激活鲎LimulusLimulu

10、s变形细胞裂解物中的变形细胞裂解物中的G G因子,因子,引起裂解物凝固,故称引起裂解物凝固,故称G G试验。试验。MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验(1-3)-D-Glucan LAL-RM(反应物反应物)G因子因子 活化活化G因子因子 凝固酶原凝固酶原 凝固酶凝固酶 凝固蛋白原凝固蛋白原 凝固蛋白(凝胶)凝固蛋白(凝胶)试验反应机理图:试验反应机理图:1,6 葡聚糖葡聚糖 磷脂双分子层 几丁质 麦角固醇 1,3葡聚糖 合成酶 甘露糖蛋白 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 1,31,3-D D-葡聚糖广泛存在于真菌细

11、胞壁葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁中,占真菌壁成分中,占真菌壁成分50%50%以上。以上。是真菌细胞壁上的特有成分是真菌细胞壁上的特有成分 用于侵袭性真菌感染的早期诊断用于侵袭性真菌感染的早期诊断 1-3-D-葡聚糖本质及特点葡聚糖本质及特点 (1(1-3)3)-D D-葡聚糖特性葡聚糖特性 1.2.3.对热极为稳对热极为稳定,高压定,高压121并并不能使其灭活。不能使其灭活。在念珠菌和曲霉在念珠菌和曲霉菌细胞壁中含量菌细胞壁中含量较多,对较多,对G试验灵试验灵敏敏。当真菌进入当真菌进入人体血液或深部人体血液或深部组织后,经吞噬组织后,经吞噬细胞的吞噬、消细胞的吞噬、消化等处理后,化等处理后,(1

12、-3)-D-葡聚糖可葡聚糖可从胞壁中释放出从胞壁中释放出来,从而使血液来,从而使血液及其它体液中含及其它体液中含量增高。当真菌量增高。当真菌在体内含量减少在体内含量减少时,机体免疫系时,机体免疫系统可将其去除。统可将其去除。在浅部真菌在浅部真菌感染中,感染中,(1-3)-D-葡聚糖未被释葡聚糖未被释放出来,故其在放出来,故其在体液中的量不增体液中的量不增高。高。MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 G G试验检测的特点试验检测的特点 可检测多种致病真菌感染:可检测多种致病真菌感染:念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,毛

13、孢子菌等毛孢子菌等 MB-80系统简介系统简介 侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染 G 试试 验验 G试验检测一般先于临床病症平均四天试验检测一般先于临床病症平均四天 BG值升高平均早于发热值升高平均早于发热5 d,早于呼吸道病症平均早于呼吸道病症平均107 d,早于早于HRCT检查平均检查平均93 d。高高 蕾,蕾,周周 新新.(1,3)一一 D葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的诊葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的诊断意义断意义J.中国感染与化疗杂志中国感染与化疗杂志,2022,3(2),123-125.对于念珠菌血症对于念珠菌血症,G,G试验检测是首选检查试验检测是首选检查 J.Clin.Microbi

14、ol.2022.46:1009J.Clin.Microbiol.2022.46:10091013.1013.侵袭性真菌感染的诊断标准侵袭性真菌感染的诊断标准 EORTC/MSG2022修订版修订版 宿主因素宿主因素 临床特征临床特征 病原学病原学 真菌镜检真菌镜检 真菌培养真菌培养 组织病理学检查组织病理学检查 血清学检查方法间接证据血清学检查方法间接证据 G-test临床诊断临床诊断 Clinical Infectious Diseases 2022;46Clinical Infectious Diseases 2022;46 微生物学标准微生物学标准:1痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌痰或支

15、气管肺泡灌洗液培养呈霉菌 2鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查,或培养呈霉鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查,或培养呈霉菌阳性;菌阳性;3痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发现霉菌或隐球菌;发现霉菌或隐球菌;4支气管肺泡灌洗液、脑脊液或支气管肺泡灌洗液、脑脊液或2份以上的血液样品份以上的血液样品呈曲霉菌抗原半乳甘露聚糖检测、呈曲霉菌抗原半乳甘露聚糖检测、GM试验阳性;试验阳性;5血液中血液中(1,3)-D葡聚糖检测葡聚糖检测G试验阳性;试验阳性;6血中隐球菌抗原阳性;血中隐球菌抗原阳性;7无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌;无菌体液中经直接镜检或

16、细胞学检查发现真菌;8未留置尿管的情况下,连续未留置尿管的情况下,连续2份尿样培养均呈酵母份尿样培养均呈酵母菌阳性或尿检见念珠菌管型;菌阳性或尿检见念珠菌管型;9血培养呈酵母菌阳性;血培养呈酵母菌阳性;10肺部异常,与下呼吸道感染相关的标本中血液、肺部异常,与下呼吸道感染相关的标本中血液、痰液和支气管肺泡灌洗液等屡次培养无任何致病细菌。痰液和支气管肺泡灌洗液等屡次培养无任何致病细菌。宿主宿主 因素因素 临床临床 表现表现+组织组织 病理病理+微生微生 物学物学+Ascioglu et al 2002 Clin Infect Dis 34 7-14 拟诊拟诊 临床诊断临床诊断 确诊确诊 侵袭性真菌感染的诊断标准侵袭性真菌感染的诊断标准:0 0 3636 3737 3838 3939 4040 41 体温体温 (C)C)实验室检查指导临床诊断与治疗实验室检查指导临床诊断与治疗 组织培养组织培养 +组织学检查组织学检查 +G G、GMGM试验试验 +PCRPCR +治疗策略治疗策略 疾病疑似疾病疑似 程度程度 -7 7 0 0 7 7 1414 2121 2828 3535 4242 494

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