1、书书书东南大学学报(医学版)J Southeast Univ(Med Sci Edi)2023，Feb;42(1):1-8 收稿日期2022-10-14修回日期2022-11-09 基金项目国家自然科学基金面上项目(81770162)作者简介韩婷婷(1987 )，女，山西晋中人，主治医师，医学硕士。E-mail:hantingtingnetany163 com 通信作者李俊霞E-mail:lijunxia106126 com 引文格式韩婷婷，孙雪萍，陈辉，等 儿童杜氏肌营养不良及携带者诊治的回顾性分析J 东南大学学报(医学版)，2023，42(1):1-8 论著 儿童杜氏肌营养不良及携带者诊治
2、的回顾性分析韩婷婷1，孙雪萍2，陈辉1，陆超1，李俊霞1(南京医科大学第一附属医院 1 儿科，2 生殖遗传检测中心，江苏 南京210029)摘要目的:探讨杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy，DMD)患儿及携带者的临床特点、基因突变类型、治疗等，为早期诊断该病及进一步有效治疗进行总结。方法:回顾性分析 2010 年 1 月至 2022 年 6月在本院经基因检测确诊的 17 例男性 DMD 患儿及 1 例女性携带者的临床资料。结果:17 例 DMD 患儿平均诊断年龄 5 9 岁(1 个月 12 岁)，1 例女性携带者诊断年龄 6 岁。血清酶谱示谷丙转氨酶、谷草转
3、氨酶、乳酸脱氢酶、-羟丁酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶、肌酸激酶(creatine kinase，CK)水平均升高，以 CK 水平升高最为显著，为正常值的 3 7 102 倍(629 17 456 UL1)。18 例患儿中 83 3%(15/18)存在缺失突变，其中 45 55 外显子缺失占 41%;11 1%(2/18)为重复突变;5 5%(1/18)为内含子剪切突变。13 例进行母亲基因检测验证，3 例母亲未见 DMD 基因突变。1 例患儿左上肢肱二头肌肌肉活检显示，病理改变为肌纤维萎缩、新生发育肌纤维、dystrophin 蛋白局灶区肌膜表达减弱或缺失。4 例肌电图检查均提示肌源性损害，DMD
4、患儿三维运动步态分析提示双下肢部分肌群募集不良，以股直肌、股二头肌为主。1 例 DMD 患儿行脐血间充质干细胞输注，5 d 后 CK 下降 77 0%。结论:对血清肌酶异常、运动功能异常儿童应高度警惕 DMD，尽早行基因检测确诊，家族女性携带者须进行遗传咨询和产前诊断。关键词杜氏肌营养不良;肌酸激酶;基因突变;间充质干细胞;儿童 中图分类号726 85 文献标志码A 文章编号1671-6264(2023)01-0001-08doi:10 3969/j issn 1671-6264 2023 01 001A retrospective analysis of diagnosis and trea
5、tment of children andcarrier with Duchenne muscular dystrophyHAN Tingting1，SUN Xueping2，CHEN Hui1，LU Chao1，LI Junxia1(1 Department of Pediatrics，2 Department of eproductive Genetic Testing Center，First Affiliated Hospital of NanjingMedical University，Nanjing 210029，China)AbstractObjective:To retrosp
6、ectively analyze the clinical characteristic，gene mutation and treatment of 18children with Duchenne muscular dystrophy(DMD)and provide a basic knowledgel for early diagnosis and effectivetreatment Methods:A retrospective analysis was performed on the clinical features of 17 DMD boys and one carri-e
7、r girl who were admitted to the First Affliated Hospital of Nanjing Medical University from January 2010 to June2022 esults:The mean age of diagnosis of DMD was 5 9 years(1 month to 12 years)，the carrier was 6 yearsold Laboratory results showed that alanine aminotransferase(ALT)，aspartate aminotrans
8、ferase(AST)，lactate de-1hydrogenase(LDH)，-hydroxybutyrate dehydrogenase(HBDH)，creatine kinase isoenzyme(CKMB)，creatine ki-nase(CK)were remarkably increased，especially CK was 3 7-102 times the normal level Gene was tested in all 18patients，including 83 3%(15/18)deletion mutations，among which exon 45-
9、55 deletion accounted for 41%，11.1%(2/18)duplicate mutations，and 5 5%(1/18)intron splicing mutations 13 cases were verified by mater-nal genetic testing，and 3 cases had no DMD gene mutation One patient underwent muscle biopsy of the bicepsbrachialis of the left upper limb，and the pathological change
10、s were muscle fiber atrophy，newly developed musclefiber，and reduced or absent expression of dystrophin protein of focal myofilament Four electromyography tests sug-gested myogenic damage Three dimensional gait analysis of DMD child suggested poor recruitment of some musclegroups in both lower limbs，
11、mainly rectus femoris and biceps femoris CK in one case declined by 77 0%5 daysafter umbilical cord blood mesenchymal stem cell therapy Conclusion:For children with abnormal serum muscleenzymes and motor function，DMD should be diagnosed by genetic testing as early as possible with vigilance Ge-netic
12、 counseling and prenatal diagnosis are needed in the family with female carriers Key wordsDuchenne muscular dystrophy;creatine kinase;gene mutation;mesenchymal stem cell;children杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy，DMD)是由 DMD 基因突变导致抗肌萎缩蛋白(dystro-phin)结构、功能发生改变，临床以缓慢进行性加重对称性肌无力、肌萎缩、血清肌酸激酶(creatine kin
13、ase，CK)增高、小腿腓肠肌假性肥大为特征的 X 连锁隐性遗传性肌肉病1。通常男性起病，女性携带，存活男婴发病率为 1/5 000，起病于儿童早期，一般 12 岁左右丧失自主行走能力，20 岁左右因呼吸、循环衰竭死亡2。儿童 DMD 起病隐匿，临床表现各异，容易误诊为其他疾病。现对本院儿科 17 例 DMD 男性患儿及 1 例女性携带者的临床表现、确诊年龄、肌酶谱、肌电图、肌活检病理、基因检测结果及治疗等进行回顾性分析，为DMD 早期诊断及治疗措施探索提供理论基础。1对象与方法1 1研究对象回顾性分析 2010 年 1 月至 2022 年 6 月在南京医科大学第一附属医院经基因检测确诊的 1
14、7 例 DMD患者及 1 例携带者的临床资料，包括患儿性别、诊断年龄、起病时临床症状、血清酶谱水平、DMD 基因检测结果、心脏超声、肌电图及肌肉活检病理结果、治疗措施等。该研究经医院伦理委员会审核及批准，所有检查和治疗均经过患儿家长的知情同意并签署知情同意书。1 2DMD 基因检测方法采集静脉血 2 ml，EDTA 抗凝，采用多重连接探针扩增法(multiplex ligation probe amplification，MLPA)对先证者及相关亲属行 DMD 基因79 个外显子缺失和重复突变检测。部分 MLPA 为阴性先证者进行 DMD 全基因检测;部分病例采用全外显子测序加 MLPA 验证
15、。2结果2 1一般资料17 例男性 DMD 患儿，平均诊断年龄 5 9 岁(1 个月 12 岁)。其中 1 岁以内确诊 2 例，1 3 岁确诊 4例，4 6 岁确诊 7 例，7 岁以上者确诊 4 例;1 例女性DMD 携带者诊断年龄为 6 岁。2 2临床表现DMD 患儿起病隐匿，9 例因运动发育迟缓就诊，2例因健康体检发现肝功能异常、CK 水平升高就诊，6例因新生儿肺炎、反复呼吸道感染、儿童语言发育异常就诊，均因转氨酶、肌酶异常进而确诊。1 岁以内组主要表现为生后即出现 CK 水平升高进而诊断;1 3 岁组中有 3 例因反复发生呼吸道感染、1 例因语言发育异常就诊过程中发现肌酶水平明显升高而经
16、进一步检查确诊;4 6 岁组中有 3 例因常规体检发现转氨酶、肌酶异常就诊，4 例因运动能力低下就诊，其中 3 例就诊时体格检查发现腓肠肌肥大;7 岁以上组均因行走运动障碍就诊，其中 1 例 12 岁患儿体格检查发现腓肠肌肥大。女性携带者常规体检发现转氨酶、肌酶异常就诊，体格检查无特殊。2 3辅助检查DMD 患儿血清酶谱显示谷丙转氨酶(alanine ami-notransferase，ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotrans-ferase，AST)、乳 酸 脱 氢 酶(lactate dehydrogenase，LDH)、羟丁酸脱氢酶(-hydroxybutyrate dehydrogen-ase，HBDH)、CK、肌 酸 激 酶 同 工 酶(creatine kinaseisoenzyme，CKMB)水平均升高。其中 ALT 水平升高一般为正常值的 1 3 12 84 倍(65 4 642 3 UL1);AST 水平为正常值的 0 96 20 倍(38 57 2东南大学学报(医学版)2023 年 2 月，42(1)800.2 UL1);CK 水平升高最显著，为