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二甲双胍治疗C11orf6...动脉内膜中层厚度变化的研究_陈丽娟.pdf

1、中国糖尿病杂志2023年1月第31卷第1期Chin J Diabetes,January 2023,Vol.31,No.1 糖尿病分子生物学和遗传学 二甲双胍治疗 C11orf65基因多态性 2型糖尿病患者颈动脉内膜中层厚度变化的研究陈丽娟叶桂云黄远茂廖凯君陈碧华刘銮妹【摘要】目的探讨二甲双胍治疗 C11orf65 基因多态性 T2DM 患者颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的变化。方法选取 2020 年 2 月至 2021 年 8 月于福建医科大学附属南平第一医院内分泌科治疗的新诊断 T2DM 患者 282 例。根据 C11orf65 rs11212617 基因型将二甲双胍单药治疗的 T2DM患

2、者分为 CC(n120)、CA(n120)及 AA 型(n42)共 3 组。收集二甲双胍治疗前后一般资料及相关指标,检测 C11orf65 基因型多态性、HbA1c、CIMT 等。结果282 例患者基因型分布符合Hardy-Weinberg 遗传平衡。二甲双胍治疗后 CC 基因型低于 CA、AA 基因型 (1.430.65)vs(1.640.66)vs(1.650.67)mm,P0.05。多因素线性回归分析结果显示,C11orf65 基因型多态性是二甲双胍治疗前后 CIMT 变化的影响因素。结论T2DM 患者 C11orf65 基因多态性影响二甲双胍调控血糖,与动脉粥样硬化相关。【关键词】糖尿

3、病,2 型;C11orf65;二甲双胍;颈动脉内膜中层厚度;基因多态性doi:10.3969/j.issn.1006-6187.2023.01.006Changes of carotid intimamedia thickness in type 2 diabetic patients with C11orf65 gene polymorphismand treated with Metformin CHEN Lijuan,YE Guiyun,HUANG Yuanmao,et al.Department of Pharmacy,The First Hospital of Nanping,Nan

4、ping Affiliated to Fujian Medical University,Nanping 353000,ChinaCorresponding author:YE Guiyun,Email:【Abstract】ObjectiveTo investigate the changes of carotid intima-media thickness(CIMT)inpatients with type 2 diabetes mellitus(T2DM)and C11orf65 gene polymorphism and treated with Metformin.MethodsA

5、total of 282 T2DM patients with T2DM were enrolled in this study from the First Hospital ofNanping Affiliated to Fujian Medical University from February 2020 to August 2021.All the patients weretreated with Metformin monotherapy and divided into three groups according to their genotypes of C11orf65r

6、s11212617:CC(n120),CA(n120)and AA(n42)group.General data and relevant indicators werecollected before and after Metformin treatment.Glycosylated hemoglobin(HbA1c)and CIMT were measured.ResultsThe genotype distribution was consistent with Hardy-Weinberg genetic balance in all the 282 studysubjects.Af

7、ter Metformin treatment,CIMT were significantly lower in CC genotype group than in CA and AAgenotype (1.430.65)vs(1.640.66)vs(1.650.67)mm,P0.05.Multi-factor linear regressionanalysis showed that C11orf65 genotype polymorphism was an influencing factor for CIMT changes beforeand after Metformin treat

8、ment.ConclusionC11orf65 gene polymorphism may affect the regulation ofblood glucose with Metformin,which may associated with atherosclerosis in T2DM patients.【Key words】Diabetes mellitus,type 2;C11orf65;Metformin;Carotid intima-media thickness;Genepolymorphism二甲双胍在改善血糖方面效果显著,可降低HbA1c1-2。全球 70%的 T2DM

9、 患者选择二甲双胍或联合磺脲类药物作为一线治疗用药3。二甲双胍对约 1/3 的 T2DM 患者无法产生充分的降糖作者单位:353000 南平,福建医科大学附属南平第一医院药剂科(陈丽娟、廖凯君、刘銮妹),检验科(叶桂云、黄远茂),超声科(陈碧华)通信作者:叶桂云,Email: 22中国糖尿病杂志2023年1月第31卷第1期Chin J Diabetes,January 2023,Vol.31,No.1效果,存在个体差异4。C11orf65 基因多态性与二甲双胍降糖效应密切相关,对调控体内血糖稳定和机体代谢紊乱有重要意义1,5-6。T2DM 血糖控制不佳易引起糖脂代谢紊乱,动脉粥样硬化(AS)是

10、常见并发症7。本研究通过探讨二甲双胍治疗C11orf65 基因多态性 T2DM 患者颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的变化,旨在为临床治疗提供依据。对象与方法一、研究对象选取 2020 年 2 月至 2021 年 8 月于福建医科大学附属南平第一医院内分泌科治疗的新诊断T2DM 患者 282 例,均符合 2017 年中国 T2DM 防治指南1诊断标准。排除标准:T1DM 患者;肝肾功能异常患者;合并高血压、心脑血管疾病患者;二甲双胍药物过敏或不良反应患者;服用除二甲双 胍 外 的 其 他 降 糖 药 物 患 者。根 据 C11orf65rs11212617 基因型将二甲双胍单药治疗的 T2DM患

11、者分为 CC、CA 及 AA 型共 3 组。本研究经医院伦理委员会审核批准,所有研究对象均签署知情同意书。二、研究方法1.一般资料收集:收集性别、年龄、BP 等,计算 BMI。口服盐酸二甲双胍缓释片 0.5 g/次,1 次/d。2.CIMT 超声检查:嘱受检者头部放松,取仰卧位,颈部略转向对侧,充分暴露受检颈部,由 2名超声科医师采用二维法将探头置于受检者颈根部,沿颈总动脉血管走向行颈部动脉纵切扫查(GE Logic E9 型多普勒超声诊断仪),测量血管内膜中层最厚处,重复 3 次取平均值。3.血样收集检测与 DNA 提取:采集空腹和餐后 2 h 静脉血 3 ml,置于 EDTA-K2 抗凝管

12、,4000 r、5 min 分离血清,采用贝克曼 AU5821 生化分析仪、GOD 法检测 FPG、2 hPG、TG、TC,乳酸氧化酶法检测乳酸(Lac),选择抑制法检测 HDL-C,表面活性剂清除法检测 LDL-C,免疫比浊法检测载脂蛋白 A1(APOA1)、APOB。1 份 EDTA-K2 抗凝血混匀后,应用美国伯乐 VARIANT型高效液 相 色 谱 仪 及 配 套 试 剂 检 测 HbA1c,另 1 份EDTA-K2 抗凝血离心分离血浆及血细胞,采用胍盐法从外周血白细胞中分离出基因组 DNA(试剂盒由北京华夏时代基因科技发展有限公司提供),置于-20冰箱中备用。4.引物、PCR 扩增及

13、基因分型:引物、PCR 扩增及基因分型采用聚合酶链扩增反应-限制性长度片段多态性技术分析 C11orf65rs11212617CA 位点 基 因 型。上 游 引 物 5-TCCGAGTTTG-GCCCTAGCGTCG-3,下游引物 5-GACCATG-GACAGCCACACTGAA-3。实时荧光定量 PCR分析仪扩增。预变性 95、10 min,变性 95、30 s,退火 58、30 s,延伸 72、30 s,共 30 个循环,最后72、10 min 结束反应。PCR 产物由限制性内切酶 TaqI 进行酶切,212 bp 扩增子酶切后得到 186bp、26 bp 片段,是位点 rs112126

14、17 的 CC 基因型,AA 基因型保持 212 bp,如扩增子经酶切后得到212 bp、186 bp、26 bp 共 3 个片段,是杂合基因型CA,根据条带长短与数量确定患者基因型。随机抽样采用直接测序验证,基因分型成功率98.9。三、统计学处理采用 SPSS 17.0 软件进行统计学分析。正态分布计量资料以 xs 表示,两组间比较采用配对样本 t 检验,多组间比较采用单因素方差分析。计数资料以 n(%)表示,采用 2检验。Hardy-Weinberg检验遗传平衡符合度。多因素线性回归分析二甲双胍治疗前后 CIMT 变化的影响因素。以 P0.05为差异有统计学意义。结果一、各组 C11orf

15、65 基因型多态性频率分布C11orf65 rs11212617 分型检测显示,C、A 等位基因频率为 63.83%、36.17%,符合 Hardy-Weinberg 遗传平衡,群体代表性较好。(表 1)23中国糖尿病杂志2023年1月第31卷第1期Chin J Diabetes,January 2023,Vol.31,No.1表 1各组 C11orf65 基因型多态性频率分布(%)Tab 1Frequency distribution of C11orf65 genotype polymorphism in each group(%)基因型GenotypeCCCAAA例数n12012042基

16、因频率Gene frequency42.5542.5514.90等位基因AlleleCA等位基因频率Allele frequency63.8336.17HardyWeinbergP0.663二、各组一般资料及相关指标比较CC 基 因 型 治 疗 后 FPG、2 hPG、HbA1c、APOB/A1 及 CIMT 低于治疗前(P0.05)。(表 2)表 2各组一般资料及相关指标比较 xs,n(%)Tab 2Comparison of general information and relevant indicators among the three groups xs,n(%)基因型GenotypeCCCAAA例数(男/女)n(M/F)120(74/46)120(79/41)42(24/18)年龄(岁)Age(Years)60.6912.1363.3711.3463.5212.96吸烟史Smoking35(29.17)32(26.67)13(30.95)SBP(mmHg)125.7814.86126.9715.13126.3114.98DBP(mmHg)77.389.0479.029.7

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