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肺癌组织中CK5_6、P6...测对非小细胞肺癌的诊断意义_闵艳.pdf

1、肺癌组织中CK5/6、P63、TTF-1和NapsinA检测对非小细胞肺癌的诊断意义闵 艳(徐州市铜山区中医院,江苏 徐州 221116)【摘要】目的:探讨非小细胞肺癌患者检测肺癌组织细胞角蛋白5/6(CK5/6)、P63基因(P63)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)、胃酶样天冬氨酸蛋白酶(Napsin A)对于临床疾病鉴别诊断的价值。方法:选取本院2018年1月至2022年2月收治的88例非小细胞肺癌患者为研究对象,根据临床病理诊断结果划分为鳞癌组25例和腺癌组63例,两组均利用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法进行检测,以病理诊断结果为金标准,统计两组患者相应指标检出率

2、,比较鳞癌组与腺癌组患者各项指标阳性检出情况,比较两组患者不同指标检测与联合检测的灵敏度、特异度差异。结果:免疫组化检测结果显示,TTF-1、Napsin A检出率高于CK5/6、P63,且TTF-1、Napsin A检出率与病理诊断结果比较,差异无统计学意义(P0.05)。鳞癌组患者CK5/6、P63阳性率高于腺癌组,TTF-1、Napsin A阳性率低于腺癌组,组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)。四项指标联合检验鳞癌、腺癌疾病灵敏度、特异度均高于单一指标检测,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:临床可通过CK5/6、P63、TTF-1、Napsin A鉴别检验非小细胞肺癌,具有

3、较高的准确率,能够提供可靠数据支持,倡导运用推广。【关键词】细胞角蛋白5/6P63基因甲状腺转录因子-1胃酶样天冬氨酸蛋白酶非小细胞肺癌肺癌是临床常见恶性肿瘤疾病之一,对患者的身心健康乃至生命安全均会造成损害。临床根据肺癌组织学差异将其分为小细胞肺癌与非小细胞肺癌两类,其中以非小细胞肺癌占比较高,约为80%1。早期肺癌患者症状较为隐匿,因此多数患者发现时,疾病已进展至中晚期,错失最佳治疗时机,对疾病控制与治疗均造成不良影响2。目前,临床诊断肺癌多采取组织活检、光镜检查等方式。近几年,随着医疗技术水平的提高,免疫组化检查广泛应用于多种疾病鉴别诊断中,备受认可。本研究选取本院2018年1月至202

4、2年2月收治的88例非小细胞肺癌患者为研究对象,探讨细胞角蛋白5/6(CK5/6)、P63基因(P63)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)、胃酶样天冬氨酸蛋白酶(Napsin A)联合检测鉴别非小细胞肺癌的应用价值,现报告如下。1资料与方法1.1一般资料选取本院2018年1月至2022年2月收治的88例非小细胞肺癌患者为研究对象,根据临床病理诊断结果划分为鳞癌组25例和腺癌组63例,鳞癌组男性15例,女性10例;年龄3484岁,平均年龄(51.253.22)岁。腺癌组男性41例,女性22例;年龄3484岁,平均年龄(52.023.27)岁。两组一般资料比较,差异无统计学意义(P0.05),具有

5、可比性。纳入标准:经临床病理诊断均确诊为非小细胞肺癌,符合疾病诊疗标准规定。年龄3484岁。同意参与且配合本次诊断研究。排除标准:小细胞肺癌患者。合并其他恶性肿瘤疾病患者。预计生存时间不足3个月患者。临床资料缺失或排斥配合研究者。1.2方法所有患者均采集病理组织样本,实施免疫组化SP法进行检查,指标包括细胞角蛋白5/6(CK5/6)、P63基因(P63)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)、胃酶样天冬氨酸蛋白酶(Napsin A),设备采用罗氏BenchMark XT免疫组化仪全自动染色。选择中性甲醛溶液对组织样本进行固定,制剂浓度为4%,固定后使用石蜡包埋组织。包埋后石蜡标本嵌入切片机中,厚度

6、设定为4 m,连续切片。将组织切片置入专用恒温烤箱内实施烤片,温度设定为68,连续烤全科论著057片60 min。使用二甲苯、梯度乙醇将包埋用石蜡脱至水化,再以过氧化氢溶液覆盖样本表面,制剂浓度为3%,室温下孵育10 min,对样本中的过氧化物酶类物质予以杀灭。随后将样本置入枸橼酸修复液内,制剂浓度为0.01 mmol/L,pH值控制在6.3左右,加热修复液至沸腾,在沸腾的修复液内浸泡样本20 min,完成对组织中抗原的修复。修复后在样本上分别滴入CK5/6、P63、TTF-1、Napsin A的一抗工作液,将样本放入恒温箱内,温度设定为4,连续孵育一晚。孵育第2 d在样本中滴入生物素标记物(

7、兔抗山羊IgG二抗工作液),将样本再次置入恒温箱内,温度设定为37,连续孵育30 min即可。随后滴入辣根酶标记链霉卵白素工作液,置入恒温箱内,温度设定为37,连续孵育30 min。使用DAB显色法,使用流水冲洗样本,再滴入苏木精进行染色,脱水至透明状态后在表面放置盖玻片。1.3观察指标CK5/6、Napsin A阳性表达为胞质阳性,P63、TTF-1阳性表达为胞核阳性。以病理诊断结果为金标准,统计非小细胞肺癌患者CK5/6、P63、TTF-1、Napsin A指标检出率,比较鳞癌组与腺癌组患者各项指标阳性检出情况及两组患者不同指标检测与联合检测灵敏度、特异度差异。1.4统计学方法采用SPSS

8、 21.0统计学软件进行数据分析,计数资料以率(%)表示,采用2检验。P0.05为差异具有统计学意义。2结果2.1病理诊断与各项指标诊断检出率比较免疫组化检测结果显示,TTF-1、Napsin A指标诊断检出率高于CK5/6、P63,且TTF-1、Napsin A诊断检出率与病理诊断检出率比较,差异无统计学意义(P0.05),见表1。表1病理诊断与各项指标诊断检出率比较n(%)检测方法n检出率病理诊断8888(100.00)CK5/68828(31.82)P638829(32.95)TTF-18864(72.73)Napsin A8864(72.73)2.2两组患者各项指标阳性检出情况比较鳞癌

9、组患者CK5/6、P63阳性率高于腺癌组,TTF-1、Napsin A阳性率低于腺癌组,组间比较,差异具有统计学意义(P0.05),见表2。表2两组患者各项指标阳性检出情况比较n(%)组别nCK5/6P63TTF-1Napsin A鳞癌组2524(96.00)23(92.00)1(4.00)2(8.00)腺癌组633(4.76)5(7.94)62(98.41)61(96.83)注:与腺癌组比较,P0.05。2.3肺鳞癌患者单一指标与联合检测灵敏度、特异度比较四项指标联合检测肺鳞癌患者灵敏度、特异度均明显高于单一指标检测,差异具有统计学意义(P0.05),见表3。表3肺鳞癌患者单一指标与联合检测

10、灵敏度、特异度比较n(%)检测方法n灵敏度特异度CK5/62596.0092.00P632592.0092.00TTF-1254.000.00Napsin A258.008.00联合检测25100.0096.00注:与单一指标检测比较,P0.05。2.4肺腺癌患者单一指标与联合检测灵敏度、特异度比较四项指标联合检测肺腺癌患者灵敏度、特异度均高于单一指标,且单一指标检测中TTF-1、Napsin A灵敏度、特异度较高,差异具有统计学意义(P0.05),见表4。表4肺腺癌患者单一指标与联合检测灵敏度、特异度比较n(%)检测方法n灵敏度特异度CK5/6636.354.76P636314.2911.1

11、1TTF-16398.4196.83Napsin A6396.8395.34联合检测63100.0098.41注:与单一指标检测比较,P0.05。3讨论非小细胞肺癌在所有肺癌患者中占比超过80%,主要包括鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌等多种类型。该类肺癌的生长速度相对较慢,且扩散和浸润通常发生在晚期阶段,但也由于其生长速度较慢,患病早期阶段的临床症状不明显或不典型,导致超过3/4的患者在确诊时已经到了中期或晚期阶段,此时其5年内的生存率相对较低3,4。因此,非小细胞肺癌越早确诊越有利于治疗,越有利于延长患者生存周期,这也就全科论著058给临床诊断工作提出了更高的挑战。但在实际诊断过程中,部分非小细

12、胞肺癌的病理组织在光学显微镜下难以准确分辨其形态,此时就需要采用免疫组化技术来提升诊断的准确性5。我国医学界对于免疫组化技术的应用范围正在逐渐扩大,其中,单一抗体诊断已经无法满足临床需求,所以多种抗体联合诊断受到越来越多研究者的关注,其临床应用价值远超单一抗体诊断。非小细胞肺癌患者的病理组织、免疫分型的复杂程度相对较高,如单纯选择一个抗体进行检测诊断,则其所具有的特异性、准确性等均会严重下降6,7。为有效提升抗体对肺癌病变的特异性和准确性,就需要通过一套抗体组合完成诊断,且这种多抗体的联合诊断指标均需满足检测简便的基本条件,以提升临床诊断效率。其中,CK5/6、P63、TTF-1、Napsin

13、 A检测在非小细胞肺癌的诊断中具有重要的临床价值,且可利用免疫组化SP法同时获取。TTF-1属于甲状腺、肺部、脑组织等早期发育阶段中具有特异性的转录因子类物质,本质为细胞核蛋白的一种。在人体肺部的发育阶段,非细胞的分化和成长均与这一指标有着密切关联。生物学研究指出,TTF-1主要是由甲状腺滤泡、肺泡的上皮组织细胞分泌,因此对肺部癌症的病灶组织进行活检时可以提取出8。Napsin A具有胃酶样特征,该物质的分子量接近38 kDa,是单链蛋白的一种,主要由肺部的型上皮细胞合成和分泌,对于上皮细胞癌、腺癌等类型肺癌均具有一定的诊断价值,且在腺癌类病症诊断时敏感性、特异性均相对较高。另外,部分特殊肺癌

14、患者诊断时,其病理组织中的TTF-1检测为阴性,但该指标的检查结果呈阳性,此时便可作为肺癌的诊断依据,也是现代病理指标活检中首选标志物之一9。CK5/6的分子量均相对较高,通常是在皮肤基底细胞、棘层细胞中表达。而在发生非小细胞肺癌后,CK5/6则会在鳞状细胞癌、大细胞癌等病变群体中大量表达,且鳞癌中的角化性鳞癌患者CK5/6的阳性率接近100%。P63在人体组织中具有选择性表达的特点,宫颈、尿道、肺部等多种组织的临床上皮细胞中均可表达。现代研究指出该基因对于肺部鳞癌病灶的发展、增殖等均发挥着特别的作用,阳性率超过90%。总而言之,临床可通过CK5/6、P63、TTF-1、Napsin A检测鉴

15、别诊断非小细胞肺癌,联合检测具有较高的准确率,能够提供可靠数据支持,倡导运用推广。【参考文献】1 陈显文,罗爱华,曾洲红CK5/6、P63、TTF-1和Napsin A在腺癌及鳞状细胞癌鉴别诊断中的应用J中国医药科学,2021,11(10):191-1942 赵声春,贾其磊,章培,等免疫组化在肺小活检中对肺癌组织学分型的鉴别诊断意义J现代肿瘤医学,2018,26(12):1848-18513 徐晓艳,杜华,宝鲁日,等非小细胞肺癌活检标本中CK7、TTF-1、Napsin A、CK5/6及p63的表达及其意义J诊断病理学杂志,2015,22(11):688-6914 叶绿,梅傲男,尹黎舟,等肺癌

16、活检标本的免疫组化检测在非小细胞肺癌鉴别诊断中应用价值分析J医药前沿,2019,9(1):125-1265 张新东,马静,王祥阁,等CK5/6、DSG3、P40、TTF-1、CK7、Napsin A在非小细胞肺癌组织中的表达及意义J中国基层医药,2020,27(2):218-2216 张爱丽,孙宇,徐少艳,等免疫组化在肺小活检中对鳞状细胞癌和腺癌的鉴别诊断意义J诊断病理学杂志,2016,23(1):70-737 余何,李镭,刘丹,等TTF-1、Napsin A、P63和CK5/6在肺癌组织的表达与分型诊断的价值J四川大学学报(医学版),2017,48(3):336-3418 魏杰,王志国,梁鑫,等P63、Napsin A、CK7、TTF-1联合SCC-Ag检测对于肺腺癌与鳞癌的鉴别诊断效能分析J标记免疫分析与临床,2018,25(9):1313-13179 杨翠林,自宝莉,李萍,等肺腺癌免疫组化标记物的临床应用及其与基因突变关系的研究进展J临床肺科杂志,2021,26(7):1100-1104全科论著059

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