1、肿瘤防治研究2023年第50卷第1期 Cancer Res Prev Treat,2023,Vol.50,No.175doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2023.22.0642肝癌无创早期诊断的研究进展卢慧1，谢正元2Research Progress in Noninvasive Early Diagnosis of Hepatocellular CarcinomaLU Hui1,XIE Zhengyuan21.Medical College of Nanchang University,Nanchang 330006,China;2.Department of Ga
2、stroenterology,The Second Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,ChinaCorresponding Author:XIE Zhengyuan,E-mail:Abstract:Liver cancer is a common tumor that seriously threatens human life and health.Given that the early onset of liver cancer is insidious and lacks specific sympto
3、ms,hence it is difficult to screen through routine examination.Thus,clinical diagnosis of liver cancer is mostly in the advanced stage.However,advanced liver cancer has few treatment options,poor prognosis and high relapse rate,thereby causing a high mortality rate.Therefore,early diagnosis of liver
4、 cancer is particularly important.Currently,non-invasive screening of liver cancer widely used in clinical setups lacks sufficient sensitivity and specificity,hence,a more reliable diagnostic method needs to be found urgently.This article reviews the research progress of noninvasive early diagnosis
5、of liver cancer to provide a reference for raising the early diagnosis rate of liver cancer.Key words:Liver cancer;Early diagnosis;Noninvasive diagnosis;Biomarkers;Imaging techniquesFunding:National Natural Science Foundation of China(No.81860119);Key Project of Natural Science Foundation of Jiangxi
6、 Province(No.20212ACB206017);Key Science and Technology R&D Project of Jiangxi Province(No.20203BBG73044);Science and Technology Research Project of Education Department of Jiangxi Province(No.GJJ200193)Competing interests:The authors declare that they have no competing interests.摘 要：肝癌是一种严重威胁人类生命健康
7、的常见肿瘤，由于肝癌早期起病隐匿，缺乏特异症状，且常规检查难以筛查出早期肝癌，临床上肝癌的诊断多处于晚期。晚期肝癌可选择的治疗手段少、预后差、复发率高，导致肝癌病死率高，因此早期诊断尤为重要。目前广泛应用于临床的肝癌无创筛查缺少足够的灵敏度及特异度，迫切需要寻找更可靠的诊断方法。本文就肝癌无创早期诊断的研究进展进行综述，为提高肝癌早期诊断率提供参考。关键词：肝癌；早期诊断；无创诊断；生物标志物；成像技术中图分类号：R735.7 开放科学(资源服务)标识码(OSID)：收稿日期：2022-06-10；修回日期：2022-07-21基金项目：国家自然科学基金项目（81860119）；江西省自然科学
8、基金重点项目（20212ACB206017）；江西省科技重点研发项目（20203BBG73044）；江西省教育厅科学技术研究项目（GJJ200193）作者单位：1.330006 南昌，南昌大学江西医学院；2.330006 南昌，南昌大学第二附属医院消化内科通信作者：谢正元（1976-），男，博士，主任医师，主要从事肝脏疾病临床诊治与基础研究，E-mail:作者简介：卢慧（1997-），女，硕士在读，主要从事肝脏疾病临床诊治与基础研究综 述0 引言 据2020年全球癌症报告显示，肝癌是中国第五大常见恶性肿瘤，我国新发病例数与死亡病例数约占全球50%，其中肝细胞癌（HCC）占我国原发性肝癌的90%
9、1。由于肝癌早期诊断不足，绝大多数患者确诊时已到中晚期，超过60%的患者在晚期发生转移后被确诊，导致总体5年生存率70%3。据统计，2020年亚洲地区中国的肝癌死亡率（17.2/10万）最高，日本的肝癌死亡率（4.8/10万）显著低于全球平均水平4，可能得益于日本对肝癌早诊早治的重视。日本早在2002年开始由政府资助对40岁以上人群进行HBV和HCV感染筛查，并对HCV和HBV感染者进行定期肝癌筛查，故而肝癌早期诊断率在60%以上5。为达成“健康中国2030”规划纲要中总体癌症5年生存率提高15%的目标，我国肝癌早筛早诊工作任重道远。目前，肝脏超声（US）和血清甲胎蛋白肿瘤防治研究2023年第
10、50卷第1期 Cancer Res Prev Treat,2023,Vol.50,No.176（AFP）检测在肝癌的早期筛查中达到普遍应用，但效果并不满意。肝脏超声敏感度为51%87%，特异性为80%100%，易受观察者主观影响，且对病灶大小要求高6。AFP作为肝癌的特异性肿瘤标志物，在妊娠状态、生殖细胞肿瘤和良性肝病的患者中亦可升高，缺乏足够的敏感度7。随着液体活检技术和成像技术的发展，研究者不断钻研以寻求肝癌早期无创诊断的突破点，现就肝癌无创早期诊断的研究进展作一综述。1 肝癌的血清标志物1.1 AFP异质体AFP是临床上应用最广泛的肝癌标志物，AFP存在3种糖链异质体，其中AFP异质体（
11、alpha fetoprotein heterogeneity,AFP-L3）主要来源于肝癌细胞，并且AFP-L3与AFP的比值（AFP-L3%）是肝癌早期诊断的高特异性标志物。相关专家共识8提出针对低AFP水平人群，AFP-L3可以对肝癌进行预测及早期诊断，并把AFP-L3%10%界定为肝癌诊断的阳性截断值。Zhou等9荟萃分析显示AFP-L3%对诊断早期HCC具有高特异性（92%），但敏感度低（34%），应更加重视AFP-L3%诊断早期HCC的高特异性优势，这是未来AFP-L3%临床应用发展的主要方向。该研究基于检测AFP-L3%的不同方法进行了亚组分析，结果表明微总量分析系统（TAS）是
12、提高检测灵敏度的最佳方法，可能为HCC的诊断提供更有利的结果。周何琪等10研究表明单一标志物难以获得最优的诊断效能，对AFP阴性的肝癌人群联合检测AFP-L3%与血清异常凝血酶原（PIVKA-）具有较理想的敏感度，有效减少肝癌的漏诊率，为肝癌的诊断提供了新策略。1.2 脱-羧基凝血酶原脱-羧基凝血酶原（des-gamma carboxy pro-thrombin,DCP），又称为维生素K缺乏诱导的凝血酶原-（PIVKA-），是一种在肝癌中产生的异常蛋白质。肝细胞中的凝血酶原由氨基酸残基构成，凝血酶原前体经过维生素K依赖性-谷氨酰羧化酶羧化氨基酸残基合成凝血酶原。肝癌细胞缺乏羧化酶，不能羧化所有
13、的氨基酸残基，产生DCP，在肝癌患者中DCP大多异常地升高11。有研究12-13支持DCP和AFP联合在HCC中具有更好的诊断效果，高水平的DCP在预测肿瘤大小、门静脉栓塞和血管侵犯方面比AFP更有利。基于性别、年龄、AFP-L3、AFP、DCP，研究者构建了GALAD评分，多个国家研究发现GALAD评分在慢性乙型和丙型肝炎以及肝硬化患者中具有识别早期肝癌的优异性能，并被指南推荐认可14-16。1.3 磷脂酰肌醇聚糖-3磷脂酰肌醇聚糖-3（glypican-3,GPC-3）是一种细胞表面硫酸肝素蛋白多糖。相关研究在HCC细胞和组织中发现高度表达的GPC-3，通过调控Wnt信号转导通路来控制HC
14、C细胞增殖，从而影响肿瘤的生长和转移17。一项荟萃分析18评估了GPC-3在HCC和肝硬化病例之间鉴别诊断的准确性，结果显示血清GPC-3在HCC和肝硬化中的诊断效能虽然不如AFP，但GPC-3和AFP二者联合有着比单一GPC-3或AFP更好的诊断效能，建议GPC-3与其他标志物联合检测。基于GPC-3在HCC细胞的膜表达，GPC-3可被用作治疗干预的靶标。迄今为止，开发了各种针对GPC-3的免疫治疗方案，包括使用人源化抗GPC3细胞毒抗体、免疫毒素疗法和基因疗法，因此GPC-3具有广阔的临床应用前景19。1.4-L-岩藻糖苷酶-L-岩藻糖苷酶（-L-fucosidase,AFU）是一种溶酶体
15、酶，自Deugnier等首次报告AFU在肝癌患者血清中升高，AFU作为早期诊断肝癌的指标被人们逐渐认识20。Liu等21首次对乙肝表面抗原和丙肝抗体阴性的肝癌患者（NBNC-HCC）的血清生物标志物进行大规模回顾性分析，评估了5种血清生物标志物（AFP、AFU、GPC-3、-谷氨酰转移酶同工酶和肝细胞生长因子）在HCC诊断中的潜力，结果显示AFP/AFU组合具有较好的诊断效能，可用于从健康对照中识别NBNC-HCC，并且从高危患者中及早识别肝炎相关HCC。1.5 微小核糖核酸微小核糖核酸（miRNA）是一类单链非编码小RNA，可调控特定的靶基因表达水平，参与机体新陈代谢、凋亡、肿瘤发生等过程。
16、一项横断面研究22证实miRNA 21-5p和miRNA 155-5p在肝癌中表现为上调，是肝癌的致癌因子，miRNA 29c-3p则表现为下调，具有抑癌作用，表明miR-NAs参与肿瘤发生发展并发挥抑癌基因或癌基因的作用。Wang等23发现HCC中miR-122、miR-148a和miR-1246的血清外泌体水平显着高于肝硬化和正常者，与慢性肝炎患者差异不大，因此仍需要进一步研究区分肝癌和慢性肝炎的标志物。近年大多数研究不再集中在单个miRNAs上，一些新兴组合模型成为研究的热点，包括用于HCC诊断的多种miRNAs组合或者与其他传统肿瘤标志物结合肿瘤防治研究2023年第50卷第1期 Cancer Res Prev Treat,2023,Vol.50,No.177的诊断模型。吕金明等24分析比较了肿瘤标志物AFP、癌胚抗原（CEA）及血清miR-122水平在乙肝、肝硬化、早期肝癌患者中的变化。与AFP、CEA单独检测相比，血清miR-122联合AFP、CEA检测对早期肝癌的诊断效能明显提高，说明miR-122可作为早期肝癌的诊断指标。Zhou等建立了由7种miRNA（miR-122、