1、DB21/T3553-2021软枣猕猴桃组培育苗技术规程1范围本文件规定了软枣猕猴桃(Actinidia arguta(Sicb.&Zucc)Planch.ex Miq.)组培育苗外植体的获得和处理、初代培养、继代培养、试管苗移植的技术要求。本文件适用于软枣猕猴桃组培种苗的繁育。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T8321.10农药合理使用准则（十）DB21/T3436软枣猕猴桃苗木3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3
2、.1接种inoculate是指在超净工作：上将处理好的外植体插入到准备好的培养基中。4外植体的获得和处理4.1外植体的获得选择尤病虫害、无病毒侵染、生长健壮的半木质化新梢，剪去叶片，保留部分叶柄，保存内塑料袋里备用。4.2外植体的清洗与切段将获得的外植体，用洗涤剂或洗衣粉浸泡、洗刷，剪成3cm5cm长的单段，芽上留1cm,自来水冲洗干净备用。4.3外植体的消毒与接种将外植体茎段先放入75%的乙醇溶液中浸泡10s30s后，用无菌水冲洗2次3次，再放入2%次氯酸钠溶液中消毒10min20min后，用无菌水冲洗5次8次。然后进行接种，每瓶1个切段，切段一半插入培养基内，芽露出培养基。DB21/T35
3、53-20215瓶内培养5.1初代培养5.1.1初代培养基可用DKW等培养基。植物激素选用细胞分裂素(6-BA),使用浓度范围1mgL3mgL。5.1.2培养条件培养温度为242，光照强度30001x100001x,光照时间12h/d16h/d。待组培苗高度达到3cm以上，可以将小苗切断进行继代培养。5.2继代培养5.2.1继代培养基可用DKW等培养基。植物激素选用吲哚丁酸(IBA)0.1mgL1.0mgL、细胞分裂素(6-BA)1.0mgL12.0mgL。5.2.2继代培养条件培养温度为242，光照强度为30001x50001x,光照时间12h/d16h/d。待苗高生长至6cm以上，再进行继
4、代繁殖，每瓶接种5个10个外植体。5.3生根培养5.3.1生根培养基可用半量DKW等培养基。培养基中大量元素和微量元素减半，铁盐和有机物全量。植物激素选用吲哚丁酸(IBA)0.1mgL1.0mgL。5.3.2生根培养条件培养温度为24：三2，光照强度30001x50001x,光照时间10h/d12h/d。待小苗生根后，高度达到6cm以上，进行移楨。6试管苗移栽6.1基质炼苗基质为草炭土：河沙：珍珠岩比例为1：2：1，pH有5.56.5，基质厚度8cm10cm。6.2炼苗移植前，将培养瓶放置在温室内，自然散射光下，封口炼苗2d3d,然二再开口炼苗2d3d,温度控制在1528左右，空气湿度在70%80%。6.3移栽将炼苗后的小苗取出，用清水洗净根部粘附的培养基，然后移栽于苗床基质中，株行距5cm8cm,用40%多菌灵可湿性粉剂500倍液喷淋，温度保特在1530。2
