1、DB23/T2353-2019将表而消毒后的外植体切割,两端各剪去2mm,保持茎段长度1.5cm一2.5cm,接种至诱导分化培养基中。5诱导分化与增殖5.1培养条件培养室的温度控制在253,相对空气湿度控制在70%一80%,光照强度为27mo1m-2s-136mo1m-2s-1,光照时间为12h/d。5.2诱导分化先将培养瓶的封口膜轻轻取下,放在一边,将培养瓶口倾斜在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒。将枪式镊子在酒精灯上灼烧消毒并冷却后,将切割好的外植体放入不定芽分化诱导培养基中,每个培养瓶放3个外植体,接种后盖上封口膜,并标注日期。培养20d25d,培养条件同5.1。5.3增殖培养外植体经诱导分化培
2、养生成愈伤组织及不定芽,将其转接至增殖培养基中,继代培养30d35d,培养条件同5.1。6生根培养选取培养瓶中长度1.5cm3.0cm生长健壮的不定芽接种至生根培养基中,培养20d30d,培养条件同5.1。7炼苗与移栽7.1炼苗7.1.1炼苗标准当组培苗基部长出3条以上,长度达1.0cm3.0cm的根系,即可进行炼苗处理。7.1.2炼苗方法将组培苗转移到1光温室中,自然散射光下炼苗,温度控制在20一25,空气相对湿度在70%一80%,每天中午在培养点周围時晒雾水。3d后揭去封口膜,2d一4d后即可移栽。7.2移栽取出组培苗,用清水洗去苗基部的培:,移至装有细沙、蛭石和珍珠岩(混合比例为1:1:1)的混合基质的育苗盘中。育苗盘规格为35cm人50cn,育苗盘四壁高度不应低于7cm,育苗基质放入育苗容器并浇透水后,厚度不应小于5cm,水渗干后再覆-层士。温室应保持70%一80%的空气湿度,温度应在185,据土壤湿度给予植株适度的浇水处理,育苗管理按照LY/T1882进行。8技术档案应建立技术档案,内容主要包括材料来源、外植体类型、培养基类型、植物生长海节剂类型浓度、诱导率、污染率、增殖系数、生根率以及移栽成活率。2