1、1Cs65.100G25中华人民共和国国家标准GB23200.110-2018食品安全国家标准植物源性食品中氯吡脲残留量的测定液相色谱-质谱联用法National food safety standard-Determination of forchlorfenuron in foods of plant origin-Liquid chromatography tandem mass spectrometry2018-06-21发布201812-21实施中华人民共和国国家卫生健康委员会中华人民共和国农业农村部发布国家市场监督管理总局GB23200.110-20184.5.4滤膜：0.224m
2、.有机系.5仪器和设备5.1液相色谱-质谱联用仪：配备电喷雾离子源(ESI).5.2分析天平.感量0.01g和0.0001g.5.3离心机，转速不低于8000r/min.5.4涡旋振荡器。6试样的制备蔬菜、水果和食用菌样品按相关标准取一定量，取样部位按GB2763的规定执行。对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆。匀浆放人聚乙烯容器中。取谷类样品500g,粉碎后使其全部可
3、通过4254m的标准网筛，放人聚乙烯瓶或袋中。取油料作物、茶叶、坚果和香辛料样品各500g,粉碎后充分混匀，放人聚乙烯瓶或袋中。植物油类搅拌均匀。试样于一18及以下温度条件下保存。7分析步骤7.1提取7.1.1蔬菜、水果、食用菌、植物油称取10g(精确到0.01g)试样于50mL的离心管中，加人10mL乙腈，涡旋振荡提取3min;蔬菜、水果、食用菌向离心管中加人4g无水硫酸镁和1g氯化钠，植物油向离心管中加入5g氯化钠，涡旋1min;然后4000r/min离心5min,取1.5mL上清液待净化。7.1.2谷物、油料、坚果称取5g(精确到0.01g)试样于50mL的离心管中，加入10mL水，涡旋
4、30s使试样完全润湿；然后加人10mL乙腈，涡旋振荡提取3min:向离心管中加人5g氯化钠，涡旋1min;4000r/min离心5min,取1.5mL上清液待净化。7.1.3茶叶、香辛料称取2g(精确到0.01g)试样于50mL的离心管中，加入10mL水、涡旋30s使试样完全润湿：然后加人10mL乙腈，涡旋振荡提取3min:向离心管中加人5g氯化钠，涡旋1min;4000r/min离心5min,取1.5mL上清液待净化。7.2净化7.2.1蔬菜、水果、食用菌、植物油将1.5mL蔬菜（色素含量高的蔬菜如韭菜除外）或水果样品上清液放人装有50 mg PSA和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中：将
5、1.5mL色素含量高的蔬菜样品上清液放人装有40 mg PSA、15mgGCB和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中；将1.5mL食用菌或植物油样品上清液放入装有50mgCa和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中；涡旋30s,5000r/min离心5min,取上清液过有机系滤膜，供HPLC-MS/MS检测.7.2.2谷物、油料、坚果将1.5mL上清液放人装有50mgC1和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中：祸旋30s,5000r/2GB 23200.110-2018min离心5min,取上清液过有机系滤膜，供HPLC-MS/MS检测。7.2.3茶叶、香辛料将1.5mL上清液放入装有50mg
6、PSA、20mg GCB和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中；涡旋30s.5000r/min离心5min,取上清液过有机系滤膜，供HPLC-MS/MS检测。7.3仪器参考条件7.3.1液相色谱参考条件a)色谱柱：C柱，100mm2.1mm(内径).1.7um或相应类型色谱柱；b)柱温：45；c)流动相：A为乙腈，B为0.2%甲酸溶液；d)进样量：5L;e)流速：0.3 mL/min;)流动相及梯度洗脱条件：见表1。表1流动相及梯度洗脱条件(VA+VB)时间流动相VA流动相VBmin0109090101.5102.590902.610510907.3.2质谱参考条件a)离子源类型：ESI;b)
7、毛细管电压：3kV;c)锥孔气：氮气，50L/h;d)离子源温度：120；e)干燥气：氮气，流速600 L/h,温度350；f)碰撞气：氩气，0.16 mL/min;g)扫描方式：正离子扫描；h)检测方式：多反应监测(MRM),监测条件见表2。表2多反应监测(MRM)的条件定性离子对定量离子对锥孔电压碰撞能量化合物名称m/zm/zVV248.0/129.016氯吡脲248.0/129.020248.0/93.0347.4标准工作曲线准确吸取适量氯吡脲标准工作溶液(4.4.2)，用空白基质提取液稀释，配制成质量浓度为0.002mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、1mg/
8、L系列基质标准溶液，供液相色谱-质谱联用仪测定。以测得峰面积为纵坐标、对应的标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，求出回归方程和相关系数。7.5定性及定量7.5.1保留时间被测试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准溶液该组分色谱峰的保留时间相比较，相对3GB 23200.110-2018误差应在士2.5%之内。7.5.2定量离子、定性离子及子离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定量和定性离子应出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当
9、的标准溶液相比，其允许偏差不超过表3规定的范围，则可判断样品中存在氯吡脲。表3定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差单位为百分率相对离子丰度502050(含)1020(含)10允许相对偏差20士25士30土507.6测定PUBLIS将基质标准溶液和待测溶液分别注人液相色谱质谱联用仪中，以保留时间和定性离子定性，样品中氯吡脲质量浓度应在标准工作曲线质量浓度范围内，超过标准工作曲线最高点的则应稀释后再进行分析。采用外标法定量，7.7空白试验除不加试样外，按照7.17.6的规定进行平行操作。8结果计算试样中氯吡脲残留量用质量分数w计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)计算。AXpX(1)A
10、,Xm式中：试样中氯吡脲残留量，单位为毫克每千克(mg/kg);A样品溶液中氯吡脲峰面积；p标准溶液中氯吡脲质量浓度，单位为毫克每升(mg/L.);V样品溶液定容体积，单位为毫升(mL);A农药标准溶液中氯吡脲峰面积；一之m试样的质量，单位为克(g)。计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算术平均值表示保留2位有效数字。当结果大于1mg/kg时，保留位有效数字9精密度9.1在重复性条件下，2次独立测定结果的绝对差值不超过重复性限(r),重复性限(r)的数据为：a)含量为0.01mg/kg时，重复性限(r)为0.0030b)含量为0.05mg/kg时，重复性限(r)为0.012；c)含量为0.5mg/kg时，重复性限(r)为0.11。9.2在再现性条件下，2次独立测定结果的绝对差值不超过再现性限(R),再现性限(R)的数据为：a)含量为0.01mg/kg时，再现性限(R)为0.0044；b)含量为0.05mg/kg时，再现性限(R)为0.015；c)含量为0.5mg/kg时，再现性限(R)为0.16。10其他本方法定量限为0.01mg/kg.4