1、I C S6 7.0 4 0C C SC5 3中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T5 4 4 92 0 2 2 出口植物源性食品中消螨多残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法D e t e r m i n a t i o n o f m e p t y l d i n o c a p r e s i d u e s i n P l a n t-o r i g i n f o o d s t u f f s f o r e x p o r tL C-M S/M S2 0 2 2-0 3-1 4发布2 0 2 2-1 0-0 1实施中华人民共和国海关总署发 布以正式出版文本为准以正式出版文本
2、为准前 言本文件按照G B/T 1.12 0 2 0 标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国深圳海关、中国检验检疫科学研究院、深圳市检验检疫科学研究院。本文件主要起草人:吴凤琪、李荷丽、韩世鹤、沈金灿、洪小柳、侯乐锡、付立赢、李立。S N/T5 4 4 92 0 2 2以正式出版文本为准以正式出版文本为准出口植物源性食品中消螨多残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1 范围本文件规定了出口植物源食品中消螨多的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本文件适用于苹果、黄瓜、生菜、橙、葡萄、西葫芦、草莓、大
3、米中消螨多残留量的测定和确证。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。G B/T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法3 术语与定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 方法提要试样中的消螨多用乙酸乙酯提取后,进行碱水解转化为2,4-二硝基-6-(1-甲基庚基)苯酚(2,4-D NO P),采用L C-M S/M S进行定性定量分析。外标法定量。5 试剂和材料除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为G B/T 6 6 8 2规定的
4、一级水。5.1 乙酸乙酯:色谱纯。5.2 甲醇:色谱纯。5.3 甲醇水溶液(6+4,体积比):分别量取6 0 m L甲醇和4 0 m L纯净水定容至1 0 0 m L。5.4 1%甲酸溶液:量取1 m L甲酸,用甲醇水溶液(5.3)定容至1 0 0 m L。5.5 1%乙醇胺溶液:量取1 m L乙醇胺,用甲醇水溶液(5.3)定容至1 0 0 m L。5.6 消螨多(M e p t y l d i n o c a p):分子式:C1 8H2 4N2O6,C A S号1 3 1-7 2-6;纯度大于或等于9 9.0%;2,4-二硝基-6-(1-甲基庚基)苯酚(M e p t y l d i n o
5、 c a p-P h e n o l):分子式:C1 4H2 0N2O5,C A S号3 6 8 7-2 2-7;纯度大于或等于9 9.0%。5.7 标准储备溶液:准确称取1 0 m g消螨多(2,4-D NO P C)(精确到0.1 m g)于1 0 m L容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,配置成浓度为1 m g/m L的标准储备液,于-1 8 备用,有效期3个月。5.8 消螨多标准工作溶液:吸取适量的上述标准溶液,加至空白样品基质中,配置0.0 1 0 m g/L、0.0 2 0 m g/L、0.0 5 0 m g/L、0.1 0 0 m g/L、0.2 0 0 m g/L消螨多标准工作曲
6、线,按8.1和8.2同步进行前处理。5.9 微孔滤膜:0.2 2 m,有机系。1S N/T5 4 4 92 0 2 2以正式出版文本为准6 仪器与设备 6.1 液相色谱串联质谱仪:配有E S I源;6.2 分析天平:感量分别为0.0 0 0 1 g和0.0 1 g;6.3 均质器;6.4 离心机:转速不低于4 5 0 0 r/m i n;6.5 涡旋混合器;6.6 氮吹仪。7 试样制备与保存7.1 水果蔬菜等含水量高的样品取有代表性样品5 0 0 g,用组织捣碎机将样品加工成浆状,混匀,均分2份后装入洁净的盛样容器内,防止样品受到污染或发生残留物含量的变化,密封并标明标记,于-1 8 以下冷冻
7、保存。7.2 大米等含水量低的样品取有代表性样品5 0 0 g,用粉碎机充分粉碎,混匀,均分2份后装入洁净的盛样容器内,防止样品受到污染或发生残留物含量的变化,密封并标明标记,常温保存。8 测定步骤8.1 提取称取试样1 0.0 g(精确至0.0 1 g),置于5 0 m L离心管中,加入1 0 m L乙酸乙酯、5 g氯化钠、1 5 0 0 0 r/m i n均质2 m i n,4 5 0 0 r/m i n离心5 m i n,静置。8.2 水解、净化取2 m L上清液,3 5 氮吹至近干,加入1 m L 1%乙醇胺溶液(5.5),超声1 5 m i n,4 5 0 0 r/m i n离心5
8、m i n。取0.5 m L上清液,用1%甲酸溶液(5.4)调p H值至中性(经p H计测量)、用甲醇水溶液(5.3)定容至1 m L,4 5 0 0 r/m i n离心5 m i n,过0.2 2 m滤膜(5.9),上机。8.3 测定8.3.1 液相色谱/质谱条件8.3.1.1 色谱柱:C 1 8,1 5 0 mm2.1 mm(内径),3.5 m,或性能相当者。8.3.1.2 柱温:室温。8.3.1.3 进样量:5 L。8.3.1.4 流动相:水(0.1%甲酸):甲醇=19。8.3.1.5 流速:0.3 m L/m i n。8.3.1.6 质谱条件:参见附录A。2S N/T5 4 4 92
9、0 2 2以正式出版文本为准8.3.2 液相色谱 质谱/质谱测定8.3.2.1 定性测定按照液相色谱 质谱/质谱条件测定样品和基质标准工作溶液,如果检测的质量色谱峰保留时间和标准品保留时间相差不超过2.5%,定性离子对的相对丰度(是用相对于最强离子丰度的强度百分比表示)与浓度相对于基质标准工作溶液的相对丰度一致,相对丰度允许偏差不超过表1规定的范围,则可判断样品中存在相应的被测物。表1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%5 02 05 01 02 01 0允许的相对偏差/%2 02 53 05 08.3.2.2 定量测定根据试样中被测物含量情况,选取响应值相近的基质标准工作液
10、一起进行色谱分析。基质标准工作液和待测液中2,4-D NO P的响应值应在仪器的线性响应范围内。在上述色谱条件下2,4-D NO P的参考保留时间为5.4 5 m i n。采用峰面积进行定量,监测离子对和定量离子对见表2。表2 2,4-D N O P的监测离子对和定量离子对化合物中英文名称参考保留时间/m i n母离子/(m/z)子离子/(m/z)碰撞能量(C E)/e V2,4-二硝基-6-(1-甲基庚基)苯酚2,4-D NO P5.4 52 9 5.31 3 4.2*-2 52 9 5.31 9 3.1-3 5 *表示定量离子对。8.3.2.3 空白试验除不加试样外,均按上述操作步骤进行。
11、8.4 结果计算和表述按数据处理软件处理或式(1)计算试样中消螨多的残留量:Xi=ciVm1 0 0 01 0 0 0(1)式中:Xi 试样中待测组分的含量,单位为微克每千克(g/k g);Ci 从基质标准曲线上得到的样液中分析物的含量,单位为微克每升(g/L);V 样品定容体积,单位为毫升(m L);m 最终样液代表的试样量,单位为克(g);注:计算结果应扣除空白值,测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留两位有效数字。3S N/T5 4 4 92 0 2 2以正式出版文本为准8.5 定量限、回收率8.5.1 定量限本方法对蔬菜、水果等中消螨多残留量的定量限均为0.0 1 0 m g/k g
12、。8.6.2 回收率植物源食品中消螨多回收率见表3。表3 植物源食品中消螨多回收率化合物基质添加水平/(m g/k g)回收范围/%相对标准偏差/%消螨多大米0.0 17 5.49 0.27.10.0 27 8.78 3.120.17 3.78 4.74.8生菜0.0 17 1.49 0.19.70.0 27 1.58 6.16.80.17 3.28 2.85.2黄瓜0.0 17 3.68 0.490.0 27 7.89 7.57.20.17 2.18 49.8橙0.0 17 7.09 0.41 1.40.0 27 2.08 5.66.70.17 6.78 5.23.7葡萄0.0 16 5.3
13、8 9.79.30.0 28 6.59 1.54.20.17 5.49 0.66.50.59 5.41 0 6.52.119 5.81 1 5.77.5西红柿0.0 17 7.19 2.06.60.0 27 6.59 7.78.70.18 5.58 9.72.2草莓0.17 3.28 8.56.418 8.59 4.82.731 0 4.01 1 4.334S N/T5 4 4 92 0 2 2以正式出版文本为准附 录 A(资料性)参考质谱条件1)参考质谱条件如下:a)极性:负;b)离子源温度:3 5 0;c)气体流速:7 L/m i n;d)雾化器压力:2 4 1 K p a;e)毛细管电压
14、:4 KV;f)鞘气温度:3 5 0;g)鞘气流速:1 0 L/m i n;h)扫描模式:MRM;i)其他质谱参数见表2。1)非商业性声明:此处列出的质谱条件仅供参考,不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试不同厂家的仪器。5S N/T5 4 4 92 0 2 2以正式出版文本为准附 录 B(资料性)标准溶液多反应监测(MRM)色谱图图B.1 2,4-D N O P 标准溶液多反应监测(MRM)色谱图(1 0 0 g/L)6S N/T5 4 4 92 0 2 2以正式出版文本为准以正式出版文本为准22029445 T/NS中华人民共和国出入境检验检疫行 业 标 准出口植物源性食品中消螨多残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法S N/T 5 4 4 92 0 2 2*中国海关出版社有限公司出版发行北京市朝阳区东四环南路甲1号(1 0 0 0 2 3)编辑部:(0 1 0)6 5 1 9 4 2 4 2-7 5 3 0网址 w ww.c u s t o m s k b.c o m/b o o k中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本8 8 01 2 3 0 1/1 6 印张0.7 5 字数1 7千字2 0 2 2年9月第一版 2 0 2 2年9月第一次印刷印数 15 0 0*书号:1 5 5 1 7 58 4 2 定价1 6.0 0元以正式出版文本为准