1、中药材龙胆草的质量标准检测摘 要目的：本文将以中药材龙胆草为研究对象，制定龙胆草的质量标准检测实验。方法：拟对其进行药材性状，薄层鉴别，水分测定，灰分测定，酸不溶性灰分测定，浸出物的测定，含量检测等质量标准检测方法对龙胆进行检测。结果：此批龙胆草的质量标准检测如以下实验数据所示：龙胆草性状，表面粗糙，颜色为褐色，边缘微微卷曲，有淡淡的清香，根苦；龙胆草的水分测定结果一共为6份，12组，全部达到标准要求为小于15%；灰分检测结果此批龙胆草都没有达到标准要求的不得大于7%，此项不合格；然后酸不溶性灰分测定，在加入稀盐酸的基础上进行检测，实验结果表明，酸不溶性成分依旧大于标准要求的2.0%，因此为不
2、合格项；然后进行浸出物的实验，实验结果显示，浸出物的含量均大于标准要求的20.0%，此项检测为合格项；薄层色谱法的展开剂，我们用了两种不同浓度的展开剂进行对比实验，乙酸乙酯-甲醇-水（10:2:1）的展开剂和乙酸乙酯-甲醇-水（20:2:1）的展开剂，实验结果表明，展开剂的浓度不同就会使RF值的大小有所偏差，龙胆苦苷的含量测定结果只有一项为0.4%，小于了标准要求，其余的为合格项。结论：本实验方法简单，易懂容易操作，重复性大，能够有效的控制龙胆草的质量，为龙胆草质量评价提供参考。关键词：龙胆草;龙胆苦苷; 质量标准Abstract Objective: to establish the qua
3、lity standard test of gentian grass with Chinese medicinal material Gentiana as the research object. Methods: the properties of medicinal materials, thin layer identification, moisture determination, ash determination, acid insoluble ash determination, extract determination, content detection and ot
4、her quality standard detection methods were used to detect gentian. Results: the quality standard of Gentiana tenuifolia was as follows: Gentiana vulgaris, rough surface, brown color, slightly curly edge, light fragrance and bitter root; The results of moisture determination of gentian grass were 6
5、samples, 12 groups, all of which met the standard requirements of less than 15%, and the ash content test results were less than 15%. This batch of gentian grass does not meet the requirements of the standard should not be more than 7%, this is not up to standard; Then the acid insoluble ash was det
6、ermined and detected on the basis of adding dilute hydrochloric acid. The experimental results showed that the acid insoluble composition was still more than 2.0% of the standard, so it was an unqualified item. Then the experiment of leachate was carried out. the experimental results showed that the
7、 content of leachate was more than 20.0% of the standard, and the test was qualified. For the development of thin layer chromatography, we used two different concentrations of developing agents, ethyl acetate-methanol-water (10:2:1) and ethyl acetate-methanol-water (2). The experimental results show
8、 that the RF value will be deviated when the concentration of the developer is different. The content of gentiopicrin is only 0.4%, which is less than the standard requirements, and the rest are qualified items. Conclusion: this experimental method is simple, easy to understand and easy to operate,
9、and has great reproducibility. It can effectively control the quality of gentian grass and provide reference for the quality evaluation of gentian grass.Key words: gentian grass；gentiopicrin；quality standardIII一 绪 论1.1龙胆草简介龙胆草其原名为龙胆，别名还有：胆草，草龙胆，山龙胆。拉丁文名：Gentiana scabra Bunge. 通过调查研究显示，龙胆草属于龙胆科、龙胆属多年
10、生草本，龙胆草系20世纪70年代四川省发掘的民间草药，广泛分布于我国云南、贵州、四川、广西、湖北等省区，河南和陕西也有少量分布，还有川西南、滇北山区海拔 11002500m的山原、草坡及疏林地带，四川省米易县是主产地之一全草入药，具有清热除湿，解毒泻火，止咳的功效，主要治疗肺热咳嗽，湿热黄疸和小便不利等症状1，2。龙胆草为常用的中药材，在历代的本草均有详细记载。目前以龙胆为原料的中药品种比较难能准确统计，估计大概已有 500 个。2005年版中国药典收载含龙胆的成药处方有龙胆泻肝丸、清热解毒口服液、黄连羊肝丸等6首，因此为检索词在Google上进一步引申检索可知全国有超过 580个厂(次) 生
11、产这些品种。从古至今，龙胆这一中药品种在治病救人，可见在维护人们的健康方面的作用显得十分的重要了。龙胆的现代研究，产品的开发离不开本草文献，需对龙胆的应用传承进行系统梳理，无疑能成为龙胆及其中成药的现代化，标准化研究提供理论依据1。1.1.2龙胆草分布地区四川、贵州、云南三省。主产凉山州各县。1.1.3龙胆草的生态环境生于海拔26003500m的山坡阴处灌丛下。1.1.4采收加工秋末冬初采收，除去泥沙，干燥。1.1.5龙胆草的主要成分本品含龙胆苦苷和当药苦苷等成分。1.1.6炮制方法除去泥沙，杂质，淋润，切段，干燥。1.2中药材龙胆草质量标准研究的目的与意义中医药是中华民族优秀的文化历史，也是
12、中国现代文明的重要组成部分之一，并且为中华民族的繁衍，健康都做出了不可否定的贡献1。中药是我国甚至在国际上具有竞争力的产业之一，以中国传统医药理论指导采集、炮制、制剂，说明作用机理，并且能指导临床使用的药物，统称为中药1。言而总之，中药就是指在中医理论指导下，能用于预防、医治、诊断疾病并具备病愈与保健功效的物质1。并且中药材这个行业是拥有独立知识产权的产业，由于目前中药品种，质量存在着严重的问题，许多中药缺乏科学的检测标准，严重的影响和阻碍了中医，中药的发展1，2。龙胆草做为我们常见的一种保肝药物，与人们的生活密切相关。龙胆草中最主要有效成分为龙胆苦苷，但由于不同产地不同采期的龙胆其龙胆苦苷含
13、量差异十分明显，优良不等2。内在品质不一样，并且疗效也会不同，这一问题就会造成龙胆草的入药剂量难以把握，给患者带来不良的反应2。近几年，常常有由于服用不良的中成药，导致患者肾衰竭的新闻，使传统中医药备受到人们的质疑，因此制定中药相关质量标准就显得更加刻不容缓了2。1.3龙胆草的化学研究进展现状目前经过学者们的长期研究，国内外的学者们已经从龙胆中分离出，得到多种裂环烯醚菇普类成分、多糖类成分、生物碱类成分等3。龙胆草除用于龙胆草浸膏片等药物以外，也被添加入化妆品，饲料等中1。李小斌，徐磊等采用高效液相色谱、梯度洗脱及灵敏度更高的VWD，检测建立龙胆草提取物中5种黄酮物质的测定方法，并对其精确度、
14、回收率等进行评价4。比较不同来源龙胆草提取物对其5种黄酮物质含量的影响。赵露，孟琦等用Xevo TQMS三重四级杆质谱(美国Waters公司) ，ACQUITY UPLC超高效液相色谱仪(美国waters公司) 来检测龙胆苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷、熊果酸、齐墩果酸 5 种主要成分的含量，对表型性状与品质指标间的相关性进行分析，探讨根据表型性状进行单株选择或特征类型筛选的可能性5。苏艳芳，刘建生等采用硅胶柱层析反复分离，光谱方法测定其结构龙胆草黄酮类成分的研究从龙胆草中分得7个黄酮类化合物，根据其理化性质和光谱数据分别鉴定为芦丁 ()、槲皮素 -3-O-葡萄糖苷 ()、圣草素 ()、槲皮素3,
15、4二甲醚 ()、槲皮素 ()、5，8二羟基 7, 3, 4三甲氧基黄酮 ()和山柰酚 ()6。由此可见龙胆草具有非常有价值的研究前景。1.3.1龙胆苦苷的研究现在龙胆苦苷的检测方法有薄层色谱法、高效液相色谱法、紫外一可见分光光度法和高效毛细管电泳法1。药典中采用的是高效液相法作为龙胆苦苷的检测方法，其值不得低于百分之一1。本次实验就是参照四川中药材地方标准和药典来对龙胆苦苷标准品进行检测。其中龙胆苦苷的提取溶剂，最好是以甲醇为主，其次为水、乙醇。但是由于甲醇有毒，在进行大规模的生产中，最好选用乙醇最为良好的选择溶剂。具有较大比表面积和较小孔的非极性树脂对龙胆苦普具有很好的吸附性能，其中是以水为
16、溶媒，也可以将龙胆草中的主要活性成分龙胆苦苷有效的煎制出来，并且也具有较高的煎出率，尤其是在偏酸性条件下进行，煎出率更高7,8。由于龙胆苦苷极易被酶解，龙胆草中也存在降解龙胆苦苷的酶，在室温，或当有水存在时，这类酶的活性会较着增高，可以加快龙胆苦苷向龙胆碱或别的的成份转化。若是以水为溶媒提取龙胆苦苷，宜采用热提方式而不宜采用冷浸方式，破坏药材中酶的活性，从而避免有效成分的破坏与分解，因此龙胆草的加工最好是在采集后尽快洗净，用暴晒，烘烤等方法进行快速干燥，从而防止酶遭到损坏，龙胆药材加工饮片的时候,最好是直接将其切段，并且不宜再浸洗，以避免龙胆草中的有效成分被浸出或者酶解掉，造成龙胆药材的质量下降和用药不稳定等情况的出现7,8。1.3.2龙胆草的