1、课 题 名 称 呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析 目 录中文摘要I英文摘要II前言1正文21 材料与方法21.1 研究对象21. 2 研究方法21.2.1 采集临床样本21.2.2 分离鉴定与药敏试验21.2.3实验数据处理32结果32.1呼吸道感染病原菌分类情况32.2呼吸道感染病原菌分布情况33 药敏情况43.1呼吸道感染常见细菌体外药敏分析43.2常见革兰阴性菌体外药敏分析结果43.3 革兰阳性菌药敏结果54讨论55结论7参考文献8致谢11综述12 摘 要目的：了解呼吸道感染患者的病原菌分布及其耐药性,为流行病学防治和临床用药提供指导。方法：收集南华大学附属第一医学院检验科 2017 年
2、 3月1日-2017 年 3月31日来自住院部呼吸道感染患者500份痰液标本,进行细菌接种与分离培养, 用CRYS-TAL 微生物全自动鉴定仪作菌种的鉴定及药敏检查,随机选取100份阳性标本检测结果进行分析。结果：100株病原菌中, G- 菌感染,为70%(70/100)、G+ 菌占16%(16/100)、真菌占14%(14/100)；G-菌检出率依次为铜绿假单胞菌（24/100）、鲍曼不动杆菌(16/100)、肺炎克雷伯氏菌(11/100)、嗜麦芽窄食单胞菌(10/100)、大肠埃希氏菌(9/100)，G+菌检出率依次为金黄色葡萄球菌(10/100)、肺炎链球菌（6/100）；药敏试验证实G
3、-菌中大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌对美洛培南敏感（100%），铜绿假单胞菌主要对复方新诺明敏感（91.6%），嗜麦芽窄食单胞菌主要对米诺环素敏感（90%），而对美洛培南完全耐药（100%）；G+菌对万古霉素、利奈唑胺均敏感（100%），而金黄色葡萄球菌还对米诺环素敏感（100%）。结论：呼吸道感染以G- 菌为主，其次为G+菌与真菌，不同的呼吸道感染病原菌均存在不同程度传统药物的耐药，但未出现明显新的耐药菌流行。关键词：痰标本；呼吸道感染；细菌鉴定；药敏试验 ABSTRACTObjective: To provide the guidance to epidemic preventio
4、n and clinical drug application of bacteria through exploring the distribution and the drug sensitivity of bacteria isolated from respiratory infection patients. Methods Collected from the First Affiliated Hospital of Nanhua University, March 1, 2017 March 31, 2011 March 31, 2010 Department of respi
5、ratory tract infection from the patient 500 cases of sputum specimens, bacterial inoculation and isolation and culture, with CRYS-TAL microbial automatic identification The identification of the bacteria and the sensitivity test were carried out. 100 positive samples were randomly selected for analy
6、sis Results：100 of the pathogens were G-bacteria infection, 70% (70/100), G + bacteria accounted for 16% (16/100), fungi accounted for 14% (14/100); G-bacteria detection rate of copper green (24/100), Acinetobacter baumannii (16/100), Klebsiella pneumoniae (11/100), Stenotrophomonas maltophilia (10/
7、100), Escherichia coli (9/100). The detection rate of G + bacteria was Staphylococcus aureus (10/100) and Streptococcus pneumoniae (6/100). The susceptibility test showed that Escherichia coli, Acinetobacter baumannii (100%), Pseudomonas aeruginosa is mainly sensitive to compound neomorphine (91.6%)
8、, Stenotrophomonas maltophilia is mainly sensitive to minocycline (90 (100%); G + bacteria were sensitive to vancomycin and linezolid (100%), while Staphylococcus aureus was also susceptible to minocycline (100%), Conclusion：Respiratory tract infection to G-bacteria-based, followed by G + bacteria a
9、nd fungi, different respiratory tract infection pathogens are different degrees of traditional drug resistance, but no significant new drug-resistant bacteria epidemic. Key words: Sputum specimens; Respiratory tract infection; Bacterial identification Drug allergy testingIV前 言呼吸道感染是临床常见疾病，发病机制频繁，是严重
10、威胁人类健康的疾病之一，有研究显示成人死亡中呼吸道感染患者约占 3%-5% 1-2。呼吸道感染病人死亡率居高不下的原因有细菌耐药性的升高，病原体不能及时明确、老龄化、免疫力低下疾病增加等。虽然根据患者临床特点如发热、咳脓痰、白细胞及中性粒细胞升高、肺部影像学等可辅助诊治呼吸道感染，但均不能明确查出呼吸道感染具有的体病原体和明确呼吸道感染病原体种类、及时精准治疗从而达到死亡率降低，降低抗生素耐药率等。随着我国人口老龄化比例分布逐渐上升、有创操作明显增加、广泛的抗生素和免疫抑制剂应用和分布，呼吸道感染病原体的分布及耐药情况也发生了明显的变化，且不同地区其病原体分布及耐药情况也不尽相同。确诊呼吸道感
11、染病原体分布及耐药情况，对于指导临床医师选择正确的用药方案及防止耐药菌形成有重要的意义。我国目前主要的诊断呼吸道感染病原菌手段还是痰培养，结合细菌的药敏检测，是临床医师选用有效抗菌药物的重要依据和指标3。临床医生对呼吸道感染性疾病患者在药物治疗前，应参考痰液标本的细菌分离培养及药敏检测结果，制定出有效的治疗方案；同样，检验工作人员应定期对送过来的标本检验结果进行完整的统计分析，为临床诊断合理选取抗菌药物提供可靠依据4-6。本研究通过收集南华大学附属第一医学院检验科 2017 年 3月1日-2017 年 3月31日来自住院部呼吸道感染患者痰液标本,对阳性标本进行细菌分离培养鉴定及药物敏感性分析,
12、了解呼吸道感染患者的病原菌分布及其耐药性,为医院流行病学防治和临床用药提供指导。1 材料与方法1.1标本来源 收集2017 年3月1日4月1日南华大学附属第一医院呼吸道感染的住院患者痰标本,共计500份。要求检验人员和采集人员密切的配合,确保标本的无污染和及时送检，重复送检标本不纳入统计范围。1.2 研究方法1.2.1 痰液样本采集收集患者清晨第一口痰，患者在晨起刷牙、漱口（清水漱口3-4次）后，用力咳出气管深处呼吸道分泌物置于无菌痰盒中，勿混入鼻咽分泌物、唾液、漱口水等无关的液体，采集后在室温 2 小时内送检。1.2.2 细菌分离鉴定呼吸道痰液标本均在无菌操作下接种于以下培养基中；然后在放入
13、35 CO2培养箱中进行过夜培养：血琼脂平板（主要用于链球菌及其他苛养菌的分离、培养及溶血活性的检测）、巧克力平板（主要用于奈瑟菌属和嗜杆菌等需氧菌的分离和培养）、麦康凯平板（主要用于革兰阴性菌的分离和培养）、沙保罗平板（主要用于真菌的分离和培养），挑取阳性菌落用于细菌的进一步分离培养鉴定。标准菌：铜绿假单胞菌（ATCC27853），鲍曼不动杆菌（ATCC19606）肺炎克雷伯氏菌（ATCC?），嗜麦芽窄食单胞菌（ATCC?）、大肠埃希氏菌（ATCC25922），G+菌检出率依次为金黄色葡萄球菌（ATCC25923）、肺炎链球菌（ATCC?）。菌种的鉴定主要采用 BD 公司 CRYS-TAL
14、微生物全自动鉴定仪。1.2.3 细菌药敏分析药敏分析药敏试验使用是法国梅里埃公司药敏卡进行药敏鉴定及分析。革兰阴性杆菌药敏卡的抗生素主要包括；环丙沙星、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、头孢呋辛、美洛培南、庆大霉素、米诺环素、头孢曲松、氨苄西林、复方新诺明和氨曲南，革兰阳性菌药敏卡包括的抗生素主要包括；青霉素、万古霉素、利奈唑胺、加替沙星、四环素、克林霉素、氧氟沙星、环丙沙星、米诺环素、庆大霉素和红霉素。172 结果2.1 呼吸道感染病原菌分类情况在收集的500份痰液标本中,经过接种培养和分离鉴定，共检测出100株病原菌, 主要为革兰氏阴性菌为主。分布情况是革兰阴性菌70株,占病原菌的70%。革兰
15、阳性菌16株 ,占病原菌的 16%，真菌最少，为14株，占病原菌的14%。见表1。表1 100株病原菌的分类情况 病原菌 总数 百分比%革兰阴性菌 70 70革兰阳性菌 16 16真 菌 14 14合 计 100 1002.2呼吸道感染病原菌分布情况呼吸科痰标本中，革兰阴性菌中检出较多的为铜绿假单胞菌24株(24%)、其他依次为鲍曼不动杆菌 16株(16%)、肺炎克雷伯菌11株(11%)、嗜麦芽窄食单胞菌10株(10%)、大肠埃希菌 9株(9%)。革兰阳性菌主要为金黄色葡萄球菌10株（10%）、肺炎链球菌6株（6%）居多。真菌主要为白色假丝酵母菌8株（8%），热带假丝酵母菌3株（3%），光滑球拟假丝酵母菌原菌3株（3%）。见表2。 表2 100株病原菌分布情况细