1、夏氏骨伤科 骨伤科外用中药驳骨黄水毒理学研究 目的：为确保临床用药的平安，对外用中药驳骨黄水进行毒理学研究。方法：按新药的有关要求作如下试验，小鼠腹腔注射急性毒性试验，家兔急性皮肤刺激性试验，豚鼠皮肤过敏性试验。结果：该药物小鼠腹腔注射半数致死量（LD50）为9.25 ml/kg；对兔正常皮肤和破损皮肤未见有刺激反响；对豚鼠皮肤无致敏作用。结论：驳骨黄水动物外用是可平安的，腹腔注射有一定的毒性，为临床应用提供了参考。 关键词 骨伤科；驳骨黄水；毒理学 中图分类号 R99文献标识码A 文章编号1673-7210（2022）11（c）-0053 Toxicological study of the
2、 traditional Chinese medicine for external application Boguhuangshui in tramotology and orthopedics LIN Chi1, CHEN Kang-yuan1, ZHOU Jun-de1, QIN Dong-yun2， ZHOU Jiu-yao3 (1. Zhanjiang Second Hospital of Traditional Chinese Medicine,Guangdong Province, Zhanjiang524013, China; 2. Department of Pharmac
3、ology, Guangdong Medicial College, Zhanjiang524023, China; 3. Pharmaceutical College，Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou510405, China) Abstract Objective: To study the toxicology of the traditional Chinese medicines for external application Boguhuangshui and to assure the safty of ne
4、w drug in clinical application. Methods: The following tests were done according to the requirement of developing new drugs, The intraperitoneal injection toxicology on kunming mice; the skin irritating tests on rabbits; the skin allergic tests on guinea pigs. Results: The LD50 was 9.25 ml/kg. It ha
5、d no irritating and allergic effects on skins. Conclusion: The external application of Boguhuangshui is safe. It has certain toxic action for intraperitoneal injection.All these research are useful forclinical application. Key words Tramotology and orthopedics; Boguhuangshui; Toxicology 骨折是常见的外伤性疾病，
6、随着社会的开展，其发生率越来越高。祖国医学运用中药治疗骨折有着悠久的历史1，中药局部外用治疗骨折更是常用的方法之一。在局部外用治疗过程中，药物的局部平安性影响了患者的依从性，进一步影响疗效。但综观国内外对中医治疗骨折的研究，多注重疗效及机制2-4，而对药物的平安性重视不够。驳骨黄水是广东省湛江市第二中医院针对骨折的病理特点，根据民间验方研制开发的外用医院制剂。在湛江市第二中医院临床应用了二十多年，观察了数千例患者，取得了满意疗效。为了进一步的开发应用，本文按照新药的有关要求，对该药进行了毒理学研究。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1试药驳骨黄水（湛江市第二中医院提供，每毫升含生药0.6 g
7、）；2，4-二硝基氯苯（CP级，北京市兴津化工厂，1%的致敏浓度和0.1%的激发浓度）。 1.1.2实验动物昆明种小鼠（体重1822 g，雌雄各半，广东医学院实验动物中心提供）；成年白色家兔（6只，体重2.02.5 kg，雌性，广东医学院实验动物中心提供）；健康成年白色豚鼠（体重250300 g，雌雄各半，南方医科大学实验动物中心提供）。 1.2实验方法 1.2.1急性毒理学研究根据预试验结果，取昆明种小鼠70只（雌雄各半），雄性体重为（19.21.1） g，雌性体重为：（19.10.8） g，禁食6 h。随机分为7组，每组10只，按11.560，10.660，9.826， 9.060，8.3
8、52，7.702，7.099 ml/kg的剂量分别一次性腹腔注射给药，观察7 d，记录毒性反响和死亡情况。 1.2.2皮肤的刺激性试验 1.2.2.1成年家兔正常皮肤的刺激性试验成年家兔3只，每只家兔去毛区随机分为给药区和对照区，给药区涂抹驳骨黄水0.5 ml，对照区涂抹蒸馏水0.5 ml。用保鲜薄膜覆盖，纱布包扎固定，6 h后去除覆盖物，于去除局部受试物后1 h观察涂药部位有无红斑、水肿等情况，每日涂药和观察1次，连续7 d。 1.2.2.2成年家兔破损皮肤的刺激性试验成年家兔3只，家兔背部脊柱两侧去毛区用针头划出“#形擦伤，不伤真皮，以有轻度渗血为度，痕间距约0.5 cm。其余操作方法同“
9、1.2.2.1项下正常皮肤的刺激性试验。 1.2.2.3评分标准每只动物实验结果按表1进行刺激反响评分，计算平均值，按表2进行刺激强度评价。 表1 皮肤刺激反响评分表 表2 皮肤刺激性评价标准 试验最后1 d，观察结束后处死动物，切下局部皮肤，福尔马林固定，HE染色，镜下检查，观察炎症细胞浸润情况和其他病理改变。 1.2.3皮肤过敏性试验30只豚鼠随机分3组，分别为阴性对照组、驳骨黄水组、阳性对照组。实验前24 h，将豚鼠背部脊柱两侧去毛，左右两侧去毛面积为3 cm3 cm。 致敏接触：阳性对照组取1 2，4-二硝基氯苯的丙酮溶液0.1 ml涂在豚鼠背部左侧去毛区皮肤上，用保鲜薄膜覆盖，纱布包
10、扎固定，6 h后去除覆盖物，并用酒精棉球拭去2，4-二硝基氯苯。7 d和14 d以同样方法重复一次，共计3次。阴性对照组和驳骨黄水组分别用0.9%氯化钠注射液0.1 ml或驳骨黄水0.1 ml，按同样步骤作致敏接触。 激发接触：于末次给药致敏后14 d，驳骨黄水组将驳骨黄水0.1 ml涂在动物背部右侧去毛区，用保鲜薄膜覆盖，纱布包扎固定，6 h后去除覆盖物，于0，24，48，72 h观察皮肤过敏反响，同时密切观察豚鼠是否出现哮喘、站立不稳或休克等严重全身过敏反响。阴性对照组用0.9%氯化钠注射液0.1 ml，阳性对照组用0.1% 2，4-二硝基氯苯的丙酮溶液0.1 ml，涂于右侧去毛区，作激发
11、接触。按表3评分，计算皮肤反响平均值和致敏发生率，致敏发生率的计算是将出现红斑、水肿、全身过敏反响（不管严重程度）的例数除以受试动物总数。 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 表3 皮肤过敏反响评分表 最高总分值为8分，致敏发生率=出现红斑和（或）水肿和（或）全身过敏反响动物数/受试动物数100%，按表4评价标准判断其致敏性。 表4 皮肤致敏性评价标准 2结果 2.1急性毒理学研究 本制剂是外用给药，为研究其急性毒理学，故进行急性腹腔注射毒性试验。结果显示，小鼠腹腔注射大剂量驳骨黄水后多直接进入抑制状态，注射小剂量驳骨黄水局部先出现兴奋不安，两三分钟后转入抑制、昏迷；
12、最后有的小鼠死亡，死亡小鼠解剖，肉眼及镜下心、肝、脾、肺、肾脏器无异常。存活小鼠一般都在3 h内苏醒。经计算，小鼠腹腔注射驳骨黄水的半数致死量（LD50）为9.25 ml/kg，折算为人的等效剂量是1.03 ml/kg。 2.2皮肤的刺激性试验 每日涂驳骨黄水1次并封包6 h，于去除受试物后1 h观察皮肤刺激反响情况，连续7 d。3只兔正常皮肤和3只兔的破损皮肤，皮肤的刺激反响评分最高总积分值均为0，见表5和表6。按照皮肤刺激评价标准，驳骨黄水属无刺激性物质；在镜下观察也均未见有炎症细胞浸润和其他病理改变。 表5 驳骨黄水家兔正常皮肤刺激性试验评分（分） 与蒸馏水组比较xP0.2 表6 驳骨黄水家兔破损皮肤刺激性试验评分（分） 与蒸馏水组比较xP0.2 2.3皮肤过敏性试验 给予驳骨黄水全部受试动物，在观察的72 h内均未出现皮肤过敏反响，致敏发生率为0，属无致敏性物质；阳性对照药2，4-二硝基氯苯在激发接触后即出现明显的过敏反响，致敏发生率为100%，属极度致敏性物质，见表7。 表7 驳骨黄水组豚鼠皮肤过敏反响程度评分（分） 与2，4-二硝基氯苯组比较，xP 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文