1、神经干动作电位及局麻药的作用一、实验目的:1、了解神经干动作电位的记录方法。2、掌握神经干动作电位的传导速度及不应期的测定方法和原理。3、观察局麻药对神经干动作电位的影响。二、实验对象:蟾蜍三、实验方法:1、制备坐骨神经标本(1)处死蟾蜍(断头毁脑法)(2)剪除躯干上部及内脏(3)剥除下肢皮肤(4)游离坐骨神经和胫神经、腓神经(5)将游离的神经干置于任氏液中浸泡10分钟2、神经标本在屏蔽盒中的放置将游离好的神经干置于屏蔽盒的电极上,神经干粗端(中枢端)置于刺激电极一侧,细端(外周端)置于记录电极一侧。3、屏蔽盒的连接和电脑的使用首先将输出刺激信号的电极夹连于屏蔽盒的两个刺激电极接线柱上,然后依
2、照屏蔽盒上的指示,将记录信号的I通道和II通道的电极夹分别于屏蔽盒上的I通道和II通道接线柱相连,最后将I通道和II通道上的接地电极夹共同连接在屏蔽盒的接地接线柱上。开启电脑,选择桌面Medlab实验软件,在“实验”的下级选项中选择“生理学实验”,然后在“生理学实验”中依次选择:(1)“神经干动作电位传导速度的测定”,观察双相动作电位波形,读取传导速度。(2)“神经干动作电位不应期测定”,观察、读取不应期。(3)“神经干动作电位传导速度的测定”,放置局麻药,观察局麻药的作用。四、实验结果:1、波形2、传导速度3、不应期4、局麻药的作用五、实验讨论:1. 神经干动作电位记录原理:神经干动作电位记
3、录的是细胞膜外两点间的电位差,呈双相电位,可反映动作电位的产生和传导,是细胞外记录法。(1)刺激前,膜外A、B两点均处于静息状态, 两点间电位差为0。(2)对A点输入刺激,A点处细胞膜发生去极化,由外正内负状态变为呈内正外负状态,而B点未兴奋,仍为外正内负,A、B两点间产生电位差,形成曲线上升支。(3)随着神经冲动的传导,两点间产生电位差逐渐减小,当B点也兴奋时,B点也由外正内负状态变为呈内正外负,膜外正电荷从未兴奋段移向兴奋段,至膜内都为正电荷,膜外两点电位差又恢复为0毫伏,形成曲线下降支。(4)随着冲动继续向前传导,A点已恢复到静息状态,为外正内负,B点仍为兴奋状态,为外负内正。A、B两点
4、再次出现电位差,但方向相反。(5)当B点也恢复到静息状态,膜外A、B两点电位差再次为0。 2、不应期的测定原理可兴奋组织在接受一次刺激后极短时间内,钠离子通道失活后仍未复活,此时再给予新的刺激,不能产生新的动作电位,这一时期称不应期,故而缩短时间间隔至第二个波形与第一个波形刚刚融合,测得的这个时间为不应期。 不应期的长短与膜上Na+通道的状态有关, Na+通道恢复的快,不应期短,它反应膜的兴奋性能力。3、局麻药的作用原理 局麻药作用于神经细胞膜上Na+通道的内侧,抑制Na+内流,阻止了动作电位的产生和传导。原因:局麻药作用于Na+通道的内侧受体结合后,引起Na+通道的失活状态闸门关闭,阻滞Na+内流,从而产生局麻作用。六、实验结论:1、动作电位是组织兴奋的标志2、组织在兴奋后有一个短暂的不应期3、局麻药可以阻断动作电位的传导