1、 重庆威力保生物技术有限公司BET-72细菌内毒素分析仪器操作规程第 6 页 共 6 页题 目：BET-72细菌内毒素分析仪操作规程 文件编号：生效日期： 2013年12月01日制订部门：质量部制订人：制订日期： 年 月 日审 核：质量部审核人：审核日期： 年 月 日审 核：质量管理负责人审核人：审核日期： 年 月 日批 准：管理者代表批准人：批准日期： 年 月 日颁发部门：质量部总份数： 2执行部门：质量部分 发：质量部、管理者代表控 制 号：文件历史制订/修订日期制订/修订原因原文件编码2013年10月12日新修订-1 主题内容建立BET-72细菌内毒素分析仪器的操作SOP。2 范围本标准
2、适用于BET-72细菌内毒素分析仪器的操作。3 责任质检人员：严格按本标准操作。质检主管：严格按本标准检查。4 内容4.1 仪器组成及开机4.1.1 仪器组成：细菌内毒素测定仪主机、计算机、打印机、EasyBET软件。4.1.2 试验环境要求：安装在没有明显空气流动的洁净的工作间，无菌、无尘、低温。4.1.3 开机打开细菌内毒素测定仪主机的电源开关，打开计算机，启动EasyBET软件。4.2 操作方法4.2.1 软件启动：双击软件图标打开软件，软件首先搜索内毒素测定仪，找到后显示该仪器的型号。如果仪器未联机则不能进行检测操作。4.2.2 用户登录：登录过的用户选好检验员，输入密码，点击确定即可
3、进入；没登录过的用户输入检验员名称，设置好密码点击【添加新检验员】即可进入。4.2.3 进入主画面，待仪器右上角温度显示为370.3时，即可进行试验设置和检测。4.3 标准曲线的可靠性试验4.3.1 标准品系列浓度溶液准备：在进行标准系列的制备时，2至10倍的稀释方法都可以使用，将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水按等比例稀释（如2倍稀释，5倍稀释等，制备成一个至少包含三个标准浓度的标准系列溶液，例如，0.5、 0.25、0.125、 0.06、0.03Eu/ml系列或5、1、0.2、0.04Eu/ml系列），每个标准浓度在检测时最少要做三个平行管，稀释步骤参照凝胶法标准品稀释步骤。4.3.
4、2 检测软件设置：用鼠标点击【新试验】出现【试验设置向导】画面，首先填写鲎试剂批号、内毒素批号、检查用水批号，选中【做新标准曲线】，填写初始浓度、稀释梯度、浓度点数、平行管数，然后用鼠标点击【自动设置标准曲线】，在表格中出现所设置的数据。鼠标点击【阴阳性对照】画面，选中【阴性对照】，填写平行管数。鼠标点击【试管位置选择】，点击【自动选择】后点击【开始检测】，程序设置完毕，该文件存在【检品管理中心】的标准曲线内，该标准曲线以【鲎试剂批号】+【内毒素批号】+【当前时间】作为文件名存盘，也可在画面底列【保存文件名】处改动，自行输入名称，但要事先建好该文件夹。4.3.3 试验检测 4.3.3.1 溶解
5、分状装鲎试剂：根据用量溶解鲎试剂，如使用多支鲎试剂，将溶解的鲎试剂混合在一起，分装到无热原的仪器专用检测管内，每支检测管内0.1ml（要求没有气泡）。4.3.3.2 加样：取稀释好的内毒素系列浓度溶液，根据所设定管数分别加入有鲎试剂的小试管中0.1ml，注意加样前应混合溶液30秒，且每个浓度点加样前应更换加样头。另取细菌内毒素检查用水做阴性对照。4.3.3.3 检测：每个浓度点在加完样后应立即用封口膜封口，放入细菌内毒素测定仪设定位置，仪器自动开始检测。待标准曲线最后一个浓度的OD值超过预设值后，用鼠标点击【手动停止检测】，停止数据采集。点击标准曲线坐标画面，生成并储存标准曲线，计算出相关系数
6、。4.3.3.4 试验报告打印 点击【报告打印预览】，在报告打印预览画面点击【打印】即可。4.4 供试品干扰预试验4.4.1供试品溶液制备：将供试品溶液用细菌内毒素检查用水稀释成所选择的系列浓度，同时制备系列浓度的供试品阳性管和阳性管，供试品阳性管外加内毒素标准品浓度和阳性管标准品浓度相同，标准品浓度为所选用标准曲线的中间浓度。4.4.2检测软件设置：用鼠标点击【新实验】出现试验向导画面，首先填写鲎试剂批号、内毒素批号、检查用水批号，点击【供试品设置】，选择供试品名称，所做供试品管的稀释倍数；填写供试品批号、稀释倍数（所选择的系列浓度最小稀释倍数）、平行管数。选中【回收率管】 ，填写外加内毒素
7、浓度、供试品稀释组数、稀释梯度，点击自动设置，在表格中出现所设置数据，例如【稀释倍数】为10；【供试品稀释梯度】为2；【供试品稀释组数】为4。那表格显示供试品10，20，40，80四个稀释倍数下回收率管及供试品管的试验设置。如测定单一浓度的试验，【供试品稀释组数】填写【1】。鼠标点击【阴阳性对照】画面，选中【阴性对照】，填写平行管数，选中【阳性对照】，填写平行管数。鼠标点击【试管位置选择】，点击【自动选择】后点击【开始检测】，程序设置完毕。文件存在所选的【供试品名称】目录下，以【供试品批号+当前时间】为该试验文件名。标准曲线试验可以和供试品试验一同进行，在软件设置时，进入新试验画面后，首先按照
8、标准曲线试验设置，再进入供试品设置。4.4.3 试验检测：根据用量溶解鲎试剂，如使用多只鲎试剂将溶解的鲎试剂混合在一起，分装到无热原的仪器专用检测管内，每只检测管内0.1ml （要求没有气泡）。取稀释好的供试品系列浓度溶液、供试品阳性系列溶液、阳性标准品溶液，根据所设定平行管数分别加入有鲎试剂的小试管中0.2ml（没有气泡），注意加样前应混合溶液30秒，且每个浓度点加样前应更换加样头。另取细菌内毒素检查用水做阴性对照，每个浓度点在加完样后应立即用封口膜封口，放入分析仪设定位置，仪器自动开始检测。试验完成后，用鼠标点击【手动停止检测】，停止数据采集。在【标准曲线】处选择标准曲线后，计算机自动计算
9、出结果。4.4.4试验报告打印：鼠标点击【报告打印预览】，在报告打印预览画面点击【打印】即可。4.5 供试品检查测定4.5.1供试品溶液制备：根据干扰预试验结果，将供试品稀释到无干扰浓度，同时制备该浓度的供试品阳性溶液和阳性标准品溶液，供试品阳性溶液外加内毒素标准品浓度和阳性标准品浓度相同，标准品浓度为所选用标准曲线的中间浓度。4.5.2检测软件设置：点击【新试验】出现试验向导画面，首先填写鲎试剂批号、内毒素批号、检查用水批号，点击【供试品设置】，选择供试品名称，所做供试品管的稀释倍数；填写供试品批号、稀释倍数平行管数。选中【回收率管】 ，填写外加内毒素浓度、供试品稀释组数、【供试品稀释组数】
10、填写“1”。，点击自动设置，在表格中出现所设置数据。如果有两个或两个以上批号供试品同时检测，在第一个批号设置完成后，更改供试品批号，点击自动设置，重复以上步骤至所有批号供试品设置完成。如果有两个或两个以上不同供试品同时检测，在第一个批号设置完成后，更改供试品名称、批号、稀释倍数，点击自动设置，重复以上步骤至所有供试品设置完成。鼠标点击【阴阳性对照】画面，选中【阴性对照】，填写平行管数，选中【阳性对照】，填写平行管数。鼠标点击【试管位置选择】， 点击【自动选择】后点击【开始检测】，程序设置完毕。文件存在最后设置的【供试品名称】目录下，以【供试品批号+当前时间】为该试验文件名。4.5.3试验检测4
11、.5.3.1 溶解分装鲎试剂：根据用量溶解鲎试剂，将溶解的鲎试剂混合在一起，分装到无热原的仪器专用检测管内，每只检测管内0.1ml（没有气泡）。4.5.3.2 加样：取稀释好的供试品溶液、供试品阳性溶液、阳性标准品溶液，根据所设定平行管数分别加入有鲎试剂的小试管中0.1ml或0.2ml（没有气泡），注意加样前应混合溶液30秒，且每个浓度加样前应更换加样头。另取细菌内毒素检查用水做阴性对照。4.5.3.3 检测：每个供试品在加完样后应立即用封口膜封口，放入细菌内毒素测定仪设定位置，仪器自动开始检测。试验完成后，点击【手动停止检测】，停止数据采集。在【标准曲线】处选择标准曲线后，计算机自动计算出结
12、果。4.5.4 试验报告打印：用鼠标点击【报告打印预览】，在报告打印预览画面点击【打印】即可。4.6 多任务同时工作：EasyBET检测软件内毒素分析仪检测孔位足够时，可以同时进行多个试验。在一个试验完成设置后，可以重新开始另一个试验的设置。在试验运行过程中,还可以打开以前的试验数据进行分析查看。4.7 仪器参数设置：在主画面中点击右上角的仪器温度显示图片，进入仪器设置画面，根据所检测的供试品的颜色决定选择检测波长，如果为无色透明的供试品选择450nm，如果供试品带有黄色可以选择660nm，消除供试品颜色对检测的干扰。4.8 观察分析反应曲线：在试验的过程中和试验结束后数据分析时可以观察每一个试管的反应曲线，该软件提供了多种曲线显示分析方法，其中反应速率法可以区别出供试品中是否有葡聚糖。另外，根据使用的不同鲎试剂，要适当调整显示幅度、零化期时间、预设OD值，以适应该种鲎试剂的反应特性。4.9 实验完成时，请认真填写仪器使用记录本。医疗器械生产质量管理体系文件管理标准
