1、Company LOGO 兽药残留分析技术兽药残留分析技术 与残留检测实验室建设与残留检测实验室建设 Company LOGO 第一部分第一部分 兽药残留及其危害兽药残留及其危害 兽药兽药 典型的兽药是指用于预防和治疗畜禽疾病的药物。随着集约化养殖生产的开展，一些化学的、生物的药用成分被开发成具有某些功效的动物保健品或饲料添加剂，也属于兽药的范畴。兽药的主要用于防病治病、促进生长、提高生产性能、改善动物性食品的品质等。兽药在动物性食品中的残留兽药在动物性食品中的残留 兽药的原形化合物及其代谢物在动物的细胞、组织、器官或可食性产品（如奶、蛋）中的蓄积、贮存，称为食品动物的兽药残留。（狭义）化学物
2、残留：除兽药外还包括通过食物链进入动物体内的农药（如杀虫剂、除草剂等）和环境污染物(如重金属、霉菌毒素等)。（广义）兽药在生态环境中的残留兽药在生态环境中的残留 在生产中大量使用的抗菌药物、抗寄生虫药物及各种促生长制剂等药物都会以原形或以有活性的代谢产物形式随动物粪便、尿液或其他排泄物进入环境。这些物质在环境土壤、微生物、水生生物、植物等蓄积或贮存。兽药残留的产生兽药残留的产生 外因外因 兽药和添加剂的使用 -防治动物疫病 -使用药物添加剂 环境污染物 内因内因 兽药的体内过程 -消除规律 兽药残留的产生兽药残留的产生 兽药残留产生的主要原因兽药残留产生的主要原因 不遵守休药期的规定 标签外用
3、药 -剂量、剂型、给药途径、疗程、适应症、动物 非法使用违禁药物 污染 -饲料加工、贮藏、运输 兽药残留的危害兽药残留的危害 急性毒性作用急性毒性作用（瘦肉精）慢性毒性作用慢性毒性作用（氯霉素、氨基糖苷类）特殊毒性作用特殊毒性作用（三致作用、激素样作用、过敏反应）-雌激素类（己烯雌酚）、同化激素（苯丙酸诺龙）-喹恶啉类（卡巴氧）-硝基呋喃类（呋喃西林、呋喃它酮）-砷制剂-苯并咪唑类-杀虫剂（666）-氯羟吡啶、SM2等-甲醛、苯酚等 兽药残留的危害兽药残留的危害 对人类肠道微生物的影响对人类肠道微生物的影响 -破坏或抑制人体胃肠菌群中敏感菌的生长 -导致条件性病原菌的大量繁殖或体外病原菌侵入肠
4、道 -改变肠道菌群的代谢活性，使菌群改变药物和食物固有活性和毒性的的生物转化能力发生变化 -引起细菌耐药性的产生，导致人类感染性疾病治疗的失败 Company LOGO 第二部分第二部分 兽药残留分析技术兽药残留分析技术 兽药残留分析技术的特点兽药残留分析技术的特点 待测物质浓度低 样品基质复杂，干扰物质多 兽药残留代谢产物多样或不明 动物种类多样，对药物代谢存在差异 残留标示物的选择残留标示物的选择 用药后体内存在多个残留成分，则需要监控总残留物。总残留物在体内的各组分比例相对稳定，选择总残留物中1种或2种组分作为“参照物”，称为“残留标示物”。通过测定残留标示物的含量表示样品残留量和MRL
5、s。选择残留标示物的原则 -消除慢、含量高、稳定、毒性大 兽药残留分析方法的要求兽药残留分析方法的要求 快速 高通量 定量 准确度和精确度 确证 法定要求 质控要求 兽药残留分析方法的要求兽药残留分析方法的要求 ELISA LC/MS/MS 准确度准确度 定量定量 精确度精确度 法定要求法定要求 确证确证 质控要求质控要求 高通量高通量 快速快速 LC or GC 分析方法的总体思路分析方法的总体思路 高水平(Level)方法 -确证和定量被分析物质 中等水平(Level)方法 -定量但不需要确证被分析物质 低水平(Level)方法 -筛选 分析方法的总体思路分析方法的总体思路 采用快速、大量
6、检测样品采用快速、大量检测样品 的筛选分析方法，能鉴别的筛选分析方法，能鉴别 含有残留物的阳性样品含有残留物的阳性样品 采用充分可靠的分析方法，采用充分可靠的分析方法，残留量的值不具有确证性，残留量的值不具有确证性，但具相应的准确度和有效性但具相应的准确度和有效性 采用经过确认的分析方法对采用经过确认的分析方法对 残留物进行鉴别和测定，残残留物进行鉴别和测定，残 留量的值必须是有效和肯定的留量的值必须是有效和肯定的 酶联免疫法酶联免疫法 液相色谱法液相色谱法 气相色谱法气相色谱法 液质联用法液质联用法 气质联用法气质联用法 三级三级 二级二级 一级一级“筛选”到“确证”的方法体系筛选”到“确证
7、”的方法体系 定性定量定性定量 饲料产品饲料产品 尿样尿样 动物组织动物组织 三级方法三级方法 二级方法二级方法 一级方法一级方法 定性为主定性为主 定量为主定量为主 定性为辅定性为辅 GC/MS LC/MS LC/MS/MS GC/MS/MS GC HPLC 兽药残留分析技术兽药残留分析技术 用于残留分析的样本制备技术 样品的前处理技术 残留检测方法的选择 样本的范围样本的范围 可食性组织及产品 -肝、肾、肌肉、脂肪、皮肤、血液 -奶、蛋 -其他加工食品 其他 -毛发、尿、粪便等 样本的收集样本的收集 取样方法 -代表性原则、随机采样 -各种标准规定 活体检测 -一般采集毛发、血液、尿液和粪
8、便 屠宰场取样 -药物的靶组织 -其他高浓度的样本：肝、肾、胆汁、注射部位 -排泄物：尿液 样本的贮存样本的贮存 容器材料 -一般为玻璃或塑料 预处理 -匀化、缩分、过筛、离心、过滤、防腐、抑制降解等 贮存温度要求 样品前处理技术样品前处理技术 提取方法 -组织捣碎法 -振荡法 净化方法 -液液萃取 -液固萃取 浓缩与富集 -旋转蒸发器浓缩 -气流吹蒸法：氮气、空气 样品的前处理技术样品的前处理技术提取提取 提取 化合物特性 基质组成 提取剂选择 沉淀剂选择 设计顺序 效率试验 配比试验 干扰试验 影响净化 样品的前处理技术样品的前处理技术净化净化 净化 液液萃取 SPE纯化 相似相溶 小柱选
9、择 浓缩富集 效率试验 配比试验 上样 洗涤 洗脱 残留检测方法简介残留检测方法简介 快速筛选方法 -酶免疫测定(EIA)-ELISA -放射免疫测定法(RIA)-金标试纸条(Dip stick)-生物传感器 -微生物抑制测定法：抗菌药 -TLC 残留检测方法简介残留检测方法简介 化学定量方法 -气相色谱法（GC）-高效液相色谱法（HPLC）-原子荧光(AF)-原子吸收(AA)残留检测方法简介残留检测方法简介 仪器确证方法 -HPLC-PDA -GC-MS -GC-MS-MS -HPLC-MS -LC-MS-MS 9.435 峰 1242.0383.7 398.2AU0.0000.0050.0
10、100.0150.0200.0250.0300.0350.0400.0450.0500.055纳米220.00240.00260.00280.00300.00320.00340.00360.00380.0019.256 峰 1268.0392.2AU0.0000.0050.0100.0150.0200.0250.0300.0350.0400.0450.0500.0550.0600.0650.070纳米220.00240.00260.00280.00300.00320.00340.00360.00380.0015.525 峰 1271.6378.9AU0.000.020.040.06纳米220.
11、00240.00260.00280.00300.00320.00340.00360.00380.0022.438 峰 1247.9266.8338.4AU0.000.020.040.060.08纳米220.00240.00260.00280.00300.00320.00340.00360.00380.00样品处理样品处理技术进展技术进展 SPE的应用与自动化 膜分离技术 免疫亲和色谱(IAC)凝胶渗透色谱（GPC）分子印迹技术 其他技术（自动索氏提取法、超声波辅助提取、超临界流体萃取、强化溶剂萃取、微波辅助萃取、加速溶剂萃取法）色谱色谱分析技术进展分析技术进展 超高效液相色谱系统(UPLC)色
12、谱色谱分析技术进展分析技术进展 高效毛细管电泳色谱系统(HPCE)色谱色谱分析技术进展分析技术进展 高精密度串联质谱GC-MS/MS、LC-MS/MS 色谱色谱分析技术进展分析技术进展 高精密度串联质谱GC-MS/MS 色谱色谱分析技术进展分析技术进展 高精密度串联质谱LC-MS/MS 色谱色谱分析技术进展分析技术进展 高分辨质谱系统(Q-TOF、Q-Exactive)检测技术发展趋势分析检测技术发展趋势分析 检测方法检测方法 筛选方法筛选方法 确证方法确证方法 快速简便快速简便 价格便宜价格便宜 现场应用现场应用 注重时效性注重时效性 仪器更新快仪器更新快 多组分分析多组分分析 灵敏度高灵敏
13、度高 提高准确性提高准确性 限制我国残留检测发展的问题限制我国残留检测发展的问题 问题：标准依赖性强，但标准滞后。问题：标准依赖性强，但标准滞后。标准制修订程序化、效应化标准制修订程序化、效应化 导致：标准实施效果较差。导致：标准实施效果较差。标准出台后很快又被淘汰标准出台后很快又被淘汰 现有标准限制了检测技术发展现有标准限制了检测技术发展 限制我国残留检测发展的问题限制我国残留检测发展的问题 问题：照搬国外的残留监控内容。问题：照搬国外的残留监控内容。检测方法缺乏验证检测方法缺乏验证 缺乏药理研究，没有“中国特色”的缺乏药理研究，没有“中国特色”的MRL 导致：残留检测基础较差。导致：残留检
14、测基础较差。对不同药物的残留关注程度不一对不同药物的残留关注程度不一 警惕残留检测发展的误区警惕残留检测发展的误区 误区一：“两极”分化误区一：“两极”分化 检测方法检测方法 筛选方法筛选方法 确证方法确证方法 成本上升成本上升 一物多用一物多用 注重首创注重首创 忽略了筛选忽略了筛选 方法的初衷方法的初衷 仪器追新型仪器追新型 盲目多残留盲目多残留 水平看指标水平看指标 过犹不及过犹不及 不切实际不切实际 没有联系没有联系 警惕残留检测发展的误区警惕残留检测发展的误区 误区二：习惯“参考”误区二：习惯“参考”方法可行方法可行 数据可信数据可信 国外文献资料国外文献资料 国内文献资料国内文献资
15、料 实验条件重现实验条件重现 国外文献资料国外文献资料 国内文献资料国内文献资料 实验数据参考实验数据参考 撰稿发表撰稿发表 内容相似内容相似 知其然，而知其然，而 不知所以然不知所以然 难以提升难以提升 自身水平自身水平 警惕残留检测发展的误区警惕残留检测发展的误区 误区三：只认“原形”误区三：只认“原形”药物药物 消消 化化 吸吸 收收 分分 布布 转转 运运 动物体内动物体内 药物原形药物原形 氧氧 化化 还还 原原 水水 解解 结结 合合 结构变化结构变化 代谢物代谢物 缺乏药代动缺乏药代动 力学研究，力学研究，盲目检测盲目检测 正确引导残留检测发展方向正确引导残留检测发展方向 积极研
16、究药物代谢和残留消除规律积极研究药物代谢和残留消除规律 药理学药理学 药效研究药效研究 药代研究药代研究 药物对机体的实际作用药物对机体的实际作用 机体内药物的生物转化机体内药物的生物转化 药物的生物利用度药物的生物利用度 药物的标示残留物药物的标示残留物 药物剂型研究药物剂型研究 消除规律研究消除规律研究 确定监控的靶点确定监控的靶点 制定休药期制定休药期 危险性评估危险性评估 正确引导残留检测发展方向正确引导残留检测发展方向 重视饲料投入品的调查和监测重视饲料投入品的调查和监测 饲料药物添加剂饲料药物添加剂 国外引进国外引进 人用药品人用药品 企业自创企业自创 禁用化合物清单禁用化合物清单 允许添加的药物允许添加的药物 要求检测违禁药要求检测违禁药 标签不明示药名标签不明示药名 要求出具合格报告要求出具合格报告 出现干扰物质出现干扰物质 有特征组分有特征组分 未知组分分析未知组分分析 新添加物新添加物 Company LOGO 第三部分第三部分 残留检测实验室建设残留检测实验室建设 残留实验室的功能残留实验室的功能 动物性食品中兽药残留检测 饲料产品中违禁药物(危害物质)检测 残留
