1、血液分析仪散点图和直方图解读血液分析仪散点图和直方图解读 希森美康医用电子(上海)有限公司 学术应用部 目录 检测原理 散点图和直方图解读 案例分析及问题解答 目录 检测原理 散点图和直方图解读 案例分析及问题解答 检测原理 4 核酸荧光 染色术 DIFF 鞘流直流 阻抗法 RBC PLT SLS-血红蛋白法 HGB 基本原理:流式细胞术/DNA/RNA荧光染色 DIFF通道 分色镜 FSCFSC 前向散射光:细胞大小前向散射光:细胞大小 SSCSSC 侧向散射光:内部复杂侧向散射光:内部复杂程度程度 SFLSFL 侧向荧光:核酸含量和侧向荧光:核酸含量和种类种类 侧向散色光 侧向荧光 前向散
2、色光 表面形态扫描显微镜 试剂 反应后 试剂 反应前 淋巴 单核 中性粒细胞 嗜酸细胞 试剂的作用,细胞纹理结构丧失、细胞膜损伤 WDF试剂 反应前 WDF试剂 反应后 淋巴细胞 单核细胞 中性粒细胞 嗜酸粒细胞 内部形态透射电子显微镜 内部构造;淋巴细胞单核细胞中性粒细胞嗜酸性粒细胞 Lymphocyte Monocyte Neutrophil Eosinophil 通道 试剂反应 发表在 2011年自动化学会 血细胞通过电阻值发生变化脉冲被检测 当血细胞通过检测部小孔时,电阻信号 信号的大小与通过的细胞体积呈正比 电阻变化的次数细胞数 感应区域(感应电阻变化的区域)时 间 电阻值 直流电
3、红细胞 血小板 基本原理:电阻法 时 间 电阻值 原理:鞘流法 RBC/PLT通道 鞘液 试剂喷头 小孔 回收管 计数粒子较多,重复性好 正确测定体积信息 电阻法的优点 原理:鞘流法 RBC/PLT通道 原理:SLS-血红蛋白法 HGB通道 血红蛋白(四聚体)亲水基 疏水基 (月桂基硫酸钠)SLS的疏水基作用于 珠蛋白(第2阶段)SLS的亲水基与Fe3+结合(第4阶段)珠蛋白 亚铁血红素 珠蛋白的 结构改变 (变性)亚铁血红素的铁(Fe2+)被氧化(Fe2+Fe3+)(第3阶段)目录 检测原理 散点图和直方图解读 案例分析及问题解答 WBC总数 CBCCBC模式模式:FSC(FSC(前向散射光
4、前向散射光)反映细胞大小反映细胞大小 CBC+DIFF:CBC+DIFF:Ssc(Ssc(侧向散射光侧向散射光)反映细胞内容物复杂程度反映细胞内容物复杂程度 Sfl(Sfl(侧向荧光侧向荧光)反映细胞核酸含量反映细胞核酸含量 WBC=NEUT#+LYMPH#+MONO#+EO#+BASO#聚集聚集的血的血小板小板 4DL4DL 完全溶解红细胞血小板完全溶解红细胞血小板 在白细胞膜上打孔在白细胞膜上打孔 4DS4DS 对核酸染色对核酸染色 纵坐标:侧向荧光(纵坐标:侧向荧光(SFLSFL)反映核酸含量反映核酸含量 横坐标:侧向散射光(横坐标:侧向散射光(SSCSSC)反映细胞内容物复杂程度反映细
5、胞内容物复杂程度 白细胞分类:DIFF通道 IG%#/OTHER%#(研究)异型淋巴细胞异型淋巴细胞 幼稚粒细胞幼稚粒细胞 幼稚粒细胞幼稚粒细胞 异型淋巴异型淋巴 嗜酸嗜酸 中性中性 单核单核 淋巴淋巴 嗜碱嗜碱 WBCWBC报警报警信息信息 意意义义 判定判定项目项目 判定方法判定方法/判定式判定式 W WB BC C WBC Abn WBC Abn ScattergramScattergram 白白细细胞散射胞散射图图异常异常 从从DIFFDIFF散射散射图上来判断图上来判断 Neutropenia Neutropenia Neutrophilia Neutrophilia Lymphop
6、enia Lymphopenia Lymphocytosis Lymphocytosis Monocytosis Monocytosis Eosinophilia Eosinophilia Basophilia Basophilia Leukocytopenia Leukocytopenia Leukocytosis Leukocytosis 中性粒中性粒细细胞减少胞减少 中性粒中性粒细细胞增多胞增多 淋巴淋巴细细胞减少胞减少 淋巴淋巴细细胞增多胞增多 单单核核细细胞增多胞增多 嗜酸嗜酸细细胞增多胞增多 嗜碱嗜碱细细胞增多胞增多 白白细细胞减少胞减少 白白细细胞增多胞增多 NEUT#,NEUT
7、%NEUT#,NEUT%NEUT#,NEUT%NEUT#,NEUT%LYMPH#,LYMPH%LYMPH#,LYMPH%LYMPH#,LYMPH%LYMPH#,LYMPH%MONO#,MONO%MONO#,MONO%EO#,EO%EO#,EO%BASO#,BASO%BASO#,BASO%WBC#WBC#WBC#WBC#NEUT#1.00 x10NEUT#11.00 x10NEUT#11.00 x109 9/L,(or/L,(or 设设定定的的%)LYMPH#0.80 x10LYMPH#4.00 x10LYMPH#4.00 x109 9/L,(or/L,(or 设设定的定的%)MONO#1.00
8、 x10MONO#1.00 x109 9/L,(or/L,(or 设设定定的的%)EO#0.70 x10EO#0.70 x109 9/L,(or/L,(or 设设定定的的%)BASO#0.20 x10BASO#0.20 x109 9/L,(or/L,(or 设设定的定的%)WBC#2.50 x10WBC#18.00 x10WBC#18.00 x109 9/L/L Blasts?Blasts?Immature Gran?Immature Gran?Left Shift?Left Shift?Abn Lympho?Abn Lympho?NRBC?NRBC?Atypical Atypical Lym
9、pho?Lympho?原始原始细细胞胞 未成熟粒未成熟粒细细胞胞 核左移核左移 异常淋巴异常淋巴细细胞胞 有核有核红细红细胞胞 异型淋巴异型淋巴细细胞胞 散射散射图图 散射图散射图 散射图散射图 散射图散射图 散射图散射图 散射图散射图 从从DIFFDIFF散射散射图上来判断图上来判断 从从DIFFDIFF散射图上来判断散射图上来判断 从从DIFFDIFF散射图上来判断散射图上来判断 从从DIFFDIFF散射图上来判断散射图上来判断 从从DIFFDIFF散射图上来判断散射图上来判断 从从DIFFDIFF散射图上来判断散射图上来判断 更多的信息:报警原理 异型淋巴细胞异型淋巴细胞 原始细胞原始细
10、胞 单核细胞单核细胞 淋巴细胞淋巴细胞 有核红有核红细胞细胞 嗜碱性嗜碱性粒细胞粒细胞 幼稚粒细胞幼稚粒细胞 杆状核粒细胞杆状核粒细胞 中性粒细中性粒细胞胞 嗜酸性粒嗜酸性粒细胞细胞 影细胞影细胞 血小板聚集血小板聚集 侧向散射光侧向散射光(SSC)侧向荧光侧向荧光(SFL)DIFFDIFF散点图散点图 原始细胞 原始细胞原始细胞 未成熟粒细胞 幼稚粒细胞幼稚粒细胞 核左移 杆核杆核 异型淋巴细胞 注意:注意:当成熟白细胞能较好的分类,当成熟白细胞能较好的分类,一般一般OTHEROTHER区域为异型淋巴区域为异型淋巴细胞细胞 当结果出现不分类的情况,当结果出现不分类的情况,一般一般OTHERO
11、THER区域主要是原始区域主要是原始细胞细胞 异型淋巴细异型淋巴细胞胞 异常淋巴细胞 注意:异常淋巴主注意:异常淋巴主要是指幼稚淋巴,要是指幼稚淋巴,白血病时出现的病白血病时出现的病理淋巴细胞等理淋巴细胞等 异常淋巴异常淋巴 有核红细胞 有核红细胞有核红细胞 RBC/PLT通道 双鞘流阻抗法双鞘流阻抗法 浮动界标浮动界标 RDW-SD 假设峰值高度为假设峰值高度为100%,在在20%频率水平上的分频率水平上的分布宽度即为布宽度即为RDW-SD。单位用单位用fL 表示。表示。RDW-CV 点点L1和和L2在总分布区域在总分布区域中的出现频率为中的出现频率为68.26%,使用下列方程计算使用下列方
12、程计算 RDW-CV=(L2-L1)/(L2+L1)红细胞报警红细胞报警信息信息 意意义义 判定判定项目项目 判定方法判定方法/判定式判定式 R R B B C C RBC Abn Distribution RBC Abn Distribution Dimorphic Population Dimorphic Population 红细红细胞直方胞直方图图异常异常 双形性双形性细细胞群胞群 RL,RU,MP,DW Flag RL,RU,MP,DW Flag MP(MP(直方直方图图的双峰性的双峰性)对分析参数进行代数计算和数量比较对分析参数进行代数计算和数量比较 在高和低点有间距并成在高和低点
13、有间距并成“峰形峰形”分布分布 Anisocytosis Anisocytosis Microcytosis Microcytosis Macrocytosis Macrocytosis Hypochromia Hypochromia Anemia Anemia Erythrocytosis Erythrocytosis 红细红细胞大小不同胞大小不同 小球性小球性红细红细胞胞 大球性大球性红细红细胞胞 低色素低色素 贫贫血血 红细红细胞增多胞增多 RDWRDW-SD,RDWSD,RDW-CV CV MCV MCV MCV MCV MCHC MCHC HGB HGB RBCRBC RDWRDW-
14、SD65fL or RDWSD65fL or RDW-CV20%CV20%MCV70fL MCV110fL MCV110fL MCHC290g/L MCHC290g/L HGB100g/L HGB6.50 x10RBC6.50 x101212/L/L RBC Agglutination?RBC Agglutination?Turbidity/HGB Turbidity/HGB Interference?Interference?Iron Deficiency?Iron Deficiency?红细红细胞抗凝胞抗凝 浑浊浑浊/HGB/HGB 受干受干扰扰 1 1 缺缺铁铁性性贫贫血血 1 1 MC
15、HC,MCH,RBC,RU(%)MCHC,MCH,RBC,RU(%)MCHC MCHC 1 1 MCV,MCHC,RDWMCV,MCHC,RDW-CVCV 1 1 对分析参数进行代数计算和数量比较对分析参数进行代数计算和数量比较 MCHC 365g/L MCHC 10%or RU(%)5%or RDW-SD 无法无法计算计算 or 多峰多峰 or RU 50 x109/L 双峰双峰 触发规则:触发规则:红细胞直方图不止出现一个峰红细胞直方图不止出现一个峰 RBC 100 200 250 fl 100%5%RL RU 100 200 250 fl 100%20%RL RU S L 红细胞聚集红细
16、胞聚集?触发规则:触发规则:MCHC 40.0g/dL&MCH 40pg&RBC 40.0g/dL&MCH 40pg&RU%4%缺铁缺铁?触发规则:触发规则:MCHC 31.0g/dL&MCHC 31.0g/dL&MCV 75fl&RDWMCV 15,0%CV 15,0%PLTPLT报警报警信息信息 意意义义 判定判定项目项目 判定方法判定方法/判定式判定式 P PL LT T P LT Abn P LT Abn Distribution Distribution 血小板直方血小板直方图图异异常常 PDW,PL(%),PU(%),PLT,PDW,PL(%),PU(%),PLT,P P-LCR,MPV,PULCR,MPV,PU 对分析参数进行代数计算和数对分析参数进行代数计算和数量比较量比较 Thrombocytopenia Thrombocytopenia Thrombocytosis Thrombocytosis 血小板减少血小板减少 血小板增加血小板增加 PLT PLT PLTPLT PLT 60 x10PLT 600 x10PLT 600 x109 9/L/L PLT Clump