1、植物细胞有丝分裂的制片与观察 一、实验目的 1.掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术 2.观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形 态特征 二、实验原理 1.植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝 分裂 2.在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动 态变化 3.染色体可被碱性染料着色，便于观察 4.根据显微镜下观察到的染色体特点可识别 有丝分裂不同时期 三、实验仪器和药品 1.仪器：显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、滴管、刀片、玻璃皿 2.材料：大蒜 3.药品：诺卡氏固定液 1mol/L的HCl作为解 离液、卡宝品红作为染色液 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定：实验前3-
2、4d，将大蒜掰成蒜瓣摆在铺 有四层纱布的托盘里放入温度为25，一定湿度的培养箱中培养，每天换 水两次待根长到12cm将根剪下用吸 水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液（乙醇:冰醋酸=3:1）固定424小时。固定的作用固定的作用：杀死细胞，固定细胞形态，维持染色体的完整性，提 高染色效果 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作（1 1）解离）解离 目目 的：的：使组织中的细胞分离开使组织中的细胞分离开 操作：先用95%的酒精漂洗，在HCL中 60水浴5min左右（c）解离时，细胞已死亡（a）解离充分是实验成功的必备条件 注意：注意：（b）解离过度，细胞结构被破坏 解离液：1mol/L的
3、HCl 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 漂洗液：清水（先置于清水中浸泡2min左右）目的：目的：洗去解离液，便于染色洗去解离液，便于染色 次数：2-3次 注意：若不漂洗 解离过度（HCl作用）影响染色（HCl与碱性染料反应）（1）解离（2 2）漂洗）漂洗 备注备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作（1）解离（2）漂洗（3 3）取材）取材 部位：根尖2-3mm 注意：注意：要去除根尖乳白色根冠（根尖分生区）根尖分生区）成熟区成熟区 伸长区伸长区 分生区分生区 根冠根冠 根尖的结构根尖的
4、结构 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作（1）解离（3）取材（2）漂洗（4 4）染）染色色 操作：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者将根尖均 匀切成三份）,用卡宝品红染色,68分钟后，盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻 压载玻片,随即用一次性筷子进行敲片。目的：使细胞分散开，有利于观察 注意：染色时敲片的力度要适中 染色剂：卡宝品红染液 时间：6-8min（使染色体（质）着色）染色时间过长染色时间过长细胞全被染色，细胞全被染色，无法观察无法观察 染色时间过短染色时间过短染色体颜色过浅，染色体颜色过浅，影响观察影响观察 四、实验流程四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作
5、 解离解离漂洗漂洗取材取材染色染色 3.观察（1）低倍镜观察：找到分生区细胞 特点：细胞呈矩形，排列紧密，有分裂细胞（2）高倍镜观察：在低倍镜的基础上换用高倍镜（3）仔细观察：先找中期，再找其余各时期，注意染色体特点（4）移动观察：慢慢移动装片，完整观察各个时期 四、实验流程四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 解离解离漂洗漂洗取材取材染色染色 3.观察 低倍镜观察低倍镜观察高倍镜观察高倍镜观察仔细观察仔细观察移动观察移动观察 注意：注意：a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在 一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片，观察有丝分裂各个时期。b.显微镜下观察到的都是死细胞，不能
6、看到细胞分裂的动态变化。c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多 操作要点操作要点 1.1.解离解离：培养好的根尖先用95的酒精漂洗再放入1mol /L的HCl中60水浴5min左右 2.2.漂洗漂洗：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解离液2-3 次，最后置于盛有清水的培养皿中 3.3.取材取材：用刀片切取根尖2-3mm处的分生区，并切去乳白 色的根冠 4.4.染色染色：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片将根尖 均匀切成三份）,用卡宝品红染色,68min后，盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载 玻片随即用一次性筷子进行敲片。5.5.观察观察：首先在低倍镜进行观察,再到高倍镜下观察。五、
7、实验结果对比图五、实验结果对比图 间期间期 前期前期 中期中期 后期后期 末期末期 后期与末期后期与末期 的过渡期的过渡期 六、实验结果展示六、实验结果展示 前前期期 中中 期期 后后 期期 末末 期期 六、实验结果展示六、实验结果展示 间期间期 后期后期 中期中期 末期末期 1、盐酸的作用是什么？盐酸起解离的作用，杀死根尖细胞，溶解细胞盐酸起解离的作用，杀死根尖细胞，溶解细胞间质，破坏胞间连丝，使细胞容易发生分离。间质，破坏胞间连丝，使细胞容易发生分离。2、清水漂洗的作用目的是什么？清水漂洗的作用即洗去材料中的解离液清水漂洗的作用即洗去材料中的解离液,便于染色。便于染色。作用是使细胞中的染色体着色。因为染色体很作用是使细胞中的染色体着色。因为染色体很容易被这样的碱性染料染色。容易被这样的碱性染料染色。3、卡宝品红的作用是什么？4、装片制作完成，轻轻按压的作用是什么？使细胞相互分离，在载玻片上平铺成一层，使细胞相互分离，在载玻片上平铺成一层，便于观察。便于观察。七、作业七、作业 1、实验过程中需要注意哪些事项？2、将实验结果以图片的形式呈现在实验报 告中，若实验失败，请分析失败原因。3、根据实验结果，请总结植物有丝分裂各 个时期的特点。请将实验报告发至请将实验报告发至邱添富邮箱（邱添富邮箱（)
