1、肝功能常规生化检验肝功能常规生化检验 2 3 主要内容主要内容 肝功检测项目肝功检测项目:(肝十二项肝十二项)AST(谷草转氨酶)(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)(谷丙转氨酶)D-BIL(直接胆红素)(直接胆红素)、T-BIL(总胆红素)总胆红素)TP(总蛋白)总蛋白)、ALB(白蛋白)(白蛋白)、GLOB (球蛋白)(球蛋白)ALP(碱性磷酸酶)(碱性磷酸酶)GGT(-谷氨酰基转移酶)谷氨酰基转移酶)CHE(胆碱酯酶)(胆碱酯酶)TBA(总胆汁酸)(总胆汁酸)PALB(前白蛋白)(前白蛋白)4 肝功能检测肝功能检测 肝脏的基本功能肝脏的基本功能 肝脏的代谢功能肝脏的代谢功能 肝脏的生物转
2、化功能肝脏的生物转化功能 肝脏的分泌与排泄功能肝脏的分泌与排泄功能 5 肝脏的代谢功能肝脏的代谢功能 接受来自消化道的各种物质接受来自消化道的各种物质 合成除合成除-球蛋白以外几乎所有的血浆蛋白球蛋白以外几乎所有的血浆蛋白 合成胆汁酸合成胆汁酸 加工和处理体内产生或外界进入的非营养加工和处理体内产生或外界进入的非营养物质物质 肝脏是多种激素在发挥调节作用后降解的肝脏是多种激素在发挥调节作用后降解的 主要部位主要部位 6 肝脏的生物转化功能肝脏的生物转化功能 某些生物活性物质某些生物活性物质 代谢终产物代谢终产物 外界异物外界异物 氧化、还原氧化、还原 水解水解 剩余物质剩余物质 结合结合 葡萄
3、糖醛酸葡萄糖醛酸 硫酸硫酸 氨基酸氨基酸 增加溶解度增加溶解度 排出体外排出体外 甲基化甲基化 乙酰化乙酰化 排出体外排出体外 排出体外排出体外 7 肝脏的分泌与排泄功能肝脏的分泌与排泄功能 胆固醇胆固醇 合成合成 初级胆汁酸初级胆汁酸 胆酸 鹅脱氧胆酸 胆汁胆汁 结合形式 大部分 小肠小肠 回肠末端回肠末端 门静脉 95%重吸收 结合胆汁酸结合胆汁酸 经细菌分解 形成次级胆汁酸 8 9 血清转氨酶的测定血清转氨酶的测定 ALT(谷丙转氨酶)(谷丙转氨酶)各器官中按含量多少依次为:各器官中按含量多少依次为:肝脏、肾脏、心脏、肝脏、肾脏、心脏、骨骼肌骨骼肌等。等。在肝细胞中主要存在于细胞质中在肝
4、细胞中主要存在于细胞质中,只有少量,只有少量在线粒体中,肝细胞中在线粒体中,肝细胞中ALT活性比血清高活性比血清高2850倍倍。AST(谷草转氨酶)(谷草转氨酶)各器官中按含量多少依次为:各器官中按含量多少依次为:心脏、肝脏、骨骼肌、心脏、肝脏、骨骼肌、肾脏肾脏等。等。在肝细胞中约在肝细胞中约80%存在于线粒体中存在于线粒体中,约,约20%存存在于胞质中,血清中在于胞质中,血清中AST和和ALT的活性比值约为的活性比值约为1.15 参考值参考值 AST 37U/L(37)(酶速率法酶速率法)ALT 42U/L(37)(酶速率法酶速率法)AST/ALT 1.15左右 10 11 12 谷丙转氨酶
5、谷丙转氨酶(ALT)(ALT)检测原理检测原理 ALT+L-丙氨酸丙氨酸+-酮戊二酸酮戊二酸 丙酮酸丙酮酸+L-谷氨酸谷氨酸 丙酮酸丙酮酸+NADH L-乳酸乳酸+NAD+在在340nm处检测处检测NADH的吸收峰来推算的吸收峰来推算 血清中血清中ALT的浓度的浓度 LDH 13 谷草转氨酶谷草转氨酶(AST)检测原理检测原理 AST+天门冬氨酸天门冬氨酸 +-酮戊二酸酮戊二酸 草酰乙酸草酰乙酸+L-谷氨酸谷氨酸 草酰乙酸草酰乙酸+NADH L-苹果酸苹果酸+NAD+在在340nm处处检测检测NADH的吸收峰来推算的吸收峰来推算 血清中血清中AST的浓度的浓度 MDH 14 临床意义临床意义
6、1 1、急性病毒性肝炎急性病毒性肝炎 ALT、AST均升高均升高,急性肝炎早期急性肝炎早期,AST/ALT60%26 附注:应空腹采血,避免脂血引起反应液浑浊,应空腹采血,避免脂血引起反应液浑浊,轻度溶血对本法无影响,但是明显溶血可轻度溶血对本法无影响,但是明显溶血可使测定结果偏低。使测定结果偏低。血液标本和标准液应避血液标本和标准液应避免阳光直照,防止胆红素的光氧化。免阳光直照,防止胆红素的光氧化。胆红胆红素对光的敏感度与温度有关,血标本应避素对光的敏感度与温度有关,血标本应避光臵冰箱保存。标本保存冰箱可稳定光臵冰箱保存。标本保存冰箱可稳定3 3天,天,-7070暗处保存可稳定暗处保存可稳定
7、3 3个月。个月。27 总蛋白总蛋白(TP)测定测定 是血清所含各种蛋白质的总和是血清所含各种蛋白质的总和 可一定程度反映肝脏合成和储备功能可一定程度反映肝脏合成和储备功能 测定方法测定方法:(推荐)双缩脲比色法:(推荐)双缩脲比色法 蛋白质中的肽键在碱性条件下与蛋白质中的肽键在碱性条件下与 Cu2+作用生成蓝紫色的化合物。作用生成蓝紫色的化合物。28 测定原理:测定原理:在碱性条件下,蛋白质多肽链中的肽在碱性条件下,蛋白质多肽链中的肽键与铜离子(键与铜离子(Cu2+)络合形成紫红色化合)络合形成紫红色化合物物 参考值参考值;6060 80g/L80g/L 29 临床意义临床意义:生理性波动:
8、生理性波动:由于体液分布原因,长久卧床者比直由于体液分布原因,长久卧床者比直立活动时约低立活动时约低45g/L;新生儿比成人低新生儿比成人低58g/L;60岁以上的老年人比成人低岁以上的老年人比成人低2g/L 增高:增高:血液浓缩血液浓缩:导致导致TP相对增高:如严相对增高:如严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水、休克、重腹泻、呕吐、高热时急剧失水、休克、慢性肾上腺皮质功能减退慢性肾上腺皮质功能减退 血浆蛋白质合成增加:血浆蛋白质合成增加:主要见于主要见于 球蛋白合成增加、多发性骨髓瘤患球蛋白合成增加、多发性骨髓瘤患 者者 30 减低减低:血液稀释血液稀释:导致导致TP浓度相对减低:静浓度相对减低:
9、静脉注射过多低渗溶液或各种原因引起的水、脉注射过多低渗溶液或各种原因引起的水、钠潴留钠潴留 摄入不足或消耗增加:摄入不足或消耗增加:如食物中长如食物中长期缺乏蛋白质、长期消化不良或某些消耗期缺乏蛋白质、长期消化不良或某些消耗性疾病(结核、甲亢、恶性肿瘤等)性疾病(结核、甲亢、恶性肿瘤等)蛋白质丢失:蛋白质丢失:严重烧伤(血浆大量严重烧伤(血浆大量 丢失)、大量失血、肾病综合症时大丢失)、大量失血、肾病综合症时大 量蛋白尿或溃疡性结肠炎(肠道长期量蛋白尿或溃疡性结肠炎(肠道长期 丢失蛋白质)丢失蛋白质)31 白蛋白(白蛋白(ALB)测定)测定 由肝实质合成,是血浆中含量最多的蛋白由肝实质合成,是
10、血浆中含量最多的蛋白质,占质,占TP的的40%60%内源性氨基酸源的营养源,具有缓冲酸碱内源性氨基酸源的营养源,具有缓冲酸碱的能力的能力 血浆中重要的载体(胆红素、胆汁酸盐、血浆中重要的载体(胆红素、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素,金属离子等)前列腺素、类固醇激素,金属离子等)维持血浆胶体渗透压,其在体液中的维持血浆胶体渗透压,其在体液中的 浓度浓度可作为各种膜屏障完好的指标可作为各种膜屏障完好的指标 (分子量较小(分子量较小66400)32 测定方法测定方法:溴钾酚绿法溴钾酚绿法(BCG法法):):溴钾酚绿是一溴钾酚绿是一种阴离子染料,在种阴离子染料,在PH4.2的缓冲液中,的缓冲液中,在非
11、离子去垢剂聚氧乙烯月桂醚存在在非离子去垢剂聚氧乙烯月桂醚存在时,可与白蛋白结合成蓝绿色复合物,时,可与白蛋白结合成蓝绿色复合物,溶液由黄色变成蓝绿色,在溶液由黄色变成蓝绿色,在660nm时比时比色色 参考值:参考值:3550g/L 33 临床意义临床意义:受饮食中蛋白质的摄入量影响,可在一定程度受饮食中蛋白质的摄入量影响,可在一定程度上作为个体营养状态的评价指标上作为个体营养状态的评价指标 增高:增高:严重脱水严重脱水 减低:减低:合成降低:急、慢性肝病合成降低:急、慢性肝病 营养或吸收不良营养或吸收不良 分解或代谢增加:大面积组织损伤或分解或代谢增加:大面积组织损伤或 炎症炎症 消耗性疾病:
12、严重感染、恶性肿瘤等消耗性疾病:严重感染、恶性肿瘤等 异常丢失:肾病综合症、慢性肾炎异常丢失:肾病综合症、慢性肾炎 分布异常:门静脉高压腹水分布异常:门静脉高压腹水 34 球蛋白及其与白蛋白的比球蛋白及其与白蛋白的比例例 球蛋白增高:球蛋白增高:多见于炎症、免疫系统疾病多见于炎症、免疫系统疾病 和肿瘤和肿瘤 细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性 感染,如结核、麻风病、血吸虫感染,如结核、麻风病、血吸虫 病、病毒性肝炎等病、病毒性肝炎等 自身免疫性疾病:系统性红斑狼自身免疫性疾病:系统性红斑狼 疮、风湿、类风湿等疮、风湿、类风湿等 多发性骨髓瘤和淋巴瘤多发性骨髓瘤和淋巴瘤
13、 35 球蛋白降低:球蛋白降低:见于血液稀释、严重营见于血液稀释、严重营养不良、胃肠道疾病养不良、胃肠道疾病 白蛋白与球蛋白比值白蛋白与球蛋白比值(A/G)参考值:参考值:12:1 临床上常用来衡量肝脏疾病的临床上常用来衡量肝脏疾病的严重程度严重程度 比值倒臵比值倒臵:A/G1时,是时,是慢性慢性 肝炎或肝硬化的特征之一肝炎或肝硬化的特征之一 36 前白蛋白(前白蛋白(P-ALB)测定)测定 由肝细胞合成,在电泳分离中(由肝细胞合成,在电泳分离中(PH8.6)移速)移速比白蛋白快,半寿期很短,仅比白蛋白快,半寿期很短,仅12小时。除可作小时。除可作为组织修补的材料为组织修补的材料,还是一种运载
14、蛋白,可以还是一种运载蛋白,可以和和T3、T4结合,还可以和视黄醇结合而具有结合,还可以和视黄醇结合而具有运载维生素运载维生素A A的作用。的作用。37 检测原理:检测原理:血清中的血清中的PA与抗与抗PA抗体在液抗体在液相中反应成抗原抗体复合物,使反应液呈相中反应成抗原抗体复合物,使反应液呈现浊度。当一定量抗体存在时,浊度与血现浊度。当一定量抗体存在时,浊度与血清中清中PA(抗原)的含量成正比,利用散射(抗原)的含量成正比,利用散射比浊或透射比浊技术,与同样处理的比浊或透射比浊技术,与同样处理的PA标标准比较,求得样品中准比较,求得样品中PA 含量。含量。参考值:散射比浊法:散射比浊法:22
15、 40 mg/dL 38 临床意义临床意义:诊断和监测营养不良:诊断和监测营养不良:血清血清P P-ALBALB在无感在无感染的情况下,是染的情况下,是儿童营养不良的灵敏指标。儿童营养不良的灵敏指标。诊断肝病:在肝炎早期,诊断肝病:在肝炎早期,其浓度下降往其浓度下降往往早于其他血清蛋白成分的改变。往早于其他血清蛋白成分的改变。有研究表明,有研究表明,动态随访测定血清动态随访测定血清P P-ALBALB对重型肝炎预后有较大的对重型肝炎预后有较大的参考价值。参考价值。P P-ALBALB明显上升,往往预后良好,明显上升,往往预后良好,P P-ALBALB持久下降,预后险恶。持久下降,预后险恶。是一
16、种负性急性时相反应蛋白,急性时是一种负性急性时相反应蛋白,急性时相反应时下降。相反应时下降。有研究表明,有研究表明,P P-ALBALB可以作为癌症的筛可以作为癌症的筛 选指标。选指标。39 附注:血清蛋白质的浓度用血清蛋白质的浓度用“g/L”表示,因为血清表示,因为血清中各种蛋白质的相对分子质量不同,所以中各种蛋白质的相对分子质量不同,所以不能用不能用mol/L 表示。表示。本法属浊度反应,试剂有任何可见的混浊,本法属浊度反应,试剂有任何可见的混浊,应弃去不用,否则对结果有较大影响。应弃去不用,否则对结果有较大影响。血清标本如不能及时测定,应臵血清标本如不能及时测定,应臵28 冰箱冰箱保存,可稳定保存,可稳定2天。天。40 碱性磷酸酶(碱性磷酸酶(ALP)的测定)的测定 一组在一组在pH 910.5的碱性环境中能催化有的碱性环境中能催化有机磷酸酯水解的酶。血清机磷酸酯水解的酶。血清ALP主要来源主要来源于于肝脏、骨骼肝脏、骨骼,少部分来自小肠和妊娠,少部分来自小肠和妊娠期胎盘组织。肝细胞产生的期胎盘组织。肝细胞产生的ALP一般从一般从胆道排入小肠。胆道排入小肠。41 测定方法测定方法