1、药代动力学在新药研究中的应用 ：85327256 ： 1 生物利用度和生物等效性研究 人体生物利用度（bioavailability）是反映制剂中主药吸收进入人体体循环的相对量和速度的药代动力学参数。生物等效性（bioequivalancy）试验是指用生物利用度研究的方法，以药代动力学参数为指标，比较同一种药物的相同或者不同剂型的制剂，在相同的试验条件下，其活性成份吸收程度和速度有无统计学差异的人体试验。一、生物样品测定方法的要求 1特异性特异性 首选色谱法如HPLC、GC、GC-MS或LC-MS等方法 放免与ELISA方法有一定的特异性，灵敏度高，但常有交叉反应。2标准曲线与线性范围标准曲线
2、与线性范围 必须用至少5个浓度建立标准曲线，应使用与待测样品相同生物介质，线性范围要能覆盖全部待测浓度，不得用线性范围外推的方法求算未知样品的浓度。标准曲线不包括零点。3精密度与准确度精密度与准确度 精密度用质控样品的日内和日间相对精密度用质控样品的日内和日间相对标准差标准差（RSD）表示表示，一般一般RSD应小应小于于15，在在LOQ附近附近RSD应小于应小于20。准确度是指用特定方法测得的生物样准确度是指用特定方法测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度品浓度与真实浓度的接近程度，可用可用相对回收率表示相对回收率表示，一般应一般应85115范围内范围内，在在LOQ附近应在附近应在80120范
3、围内范围内。加样浓度加样浓度 (mgL)0.26 9.84 19.68 0.26 9.84 19.68 0.29 9.10 20.49 0.29 9.72 21.54 0.22 10.22 19.03 0.25 9.38 19.56 检出浓度检出浓度 0.24 10.27 21.08 0.30 9.21 18.26 (mgL)0.30 8.66 17.51 0.29 9.37 19.09 0.30 8.47 16.96 0.30 9.62 17.65 X 0.27 9.34 19.01 0.29 9.46 19.22 SD 0.04 0.85 1.80 0.02 0.21 1.50 RSD（%
4、）14.8 9.1 9.5 6.9 2.2 7.8 表表1-3 精密度试验精密度试验 日日 内内 变变 异异 日日 间间 变变 异异 4最低定量限最低定量限 最低定量限是标准曲线上的最低浓度点，又称灵敏度，表示测定样品中符合准确度和精密度要求的最低药物浓度。5样品稳定性样品稳定性 了解待测药物和内标物在不同pH、光照、溶剂、温度条件下稳定性 对于中药或多组分制剂，应注意他们的相互作用 体液中药物的稳定性包括室温、冷藏（2-8）、冻融、冷冻（-20-70）6提取回收率提取回收率 应考察高、中、低三个浓度的提取回收率，其限度一般应高于50。7质控样品质控样品 质控样品系将已知量的待测药物加入到生物
5、介质中配制的样品，用于质量控制。一般配制高、中、低三个浓度的质控样品。8质量控制质量控制 应在生物样品分析方法确证完成之后开始测试未知样品。每个未知样品一般测定一次，必要时可进行复测。每批生物样品测定时应建立新的标准曲线，并随行测定高、中、低三个浓度的质控样品。质控样品测定结果的偏差一般应小于20。二、受试者二、受试者 入选条件：入选条件：一般情况应选择健康男性志愿者一般情况应选择健康男性志愿者。特殊作特殊作用的药品用的药品，则应根据具体情况选择适当受则应根据具体情况选择适当受试志愿者试志愿者，如妇科用药如妇科用药，选择健康女性志选择健康女性志愿者；试验药品可能引起受试者精神或躯愿者；试验药品
6、可能引起受试者精神或躯体依赖性反应时体依赖性反应时，则应选择需要该类药品则应选择需要该类药品治疗的患者治疗的患者。一般情况下一般情况下，受试者应具备如下条件受试者应具备如下条件:男性男性 1840周岁周岁。同一批受试者年龄不宜相差同一批受试者年龄不宜相差10岁岁以上以上。体重：一般要求在标准体重体重：一般要求在标准体重10范围内；或体范围内；或体重指数重指数BMI在在2024范围内范围内。身体状况：无心身体状况：无心、肝肝、肾肾、消化道消化道、神经系统神经系统、精神异常及代谢异常等病史；体格检查示血压精神异常及代谢异常等病史；体格检查示血压、心率心率、心电图心电图、呼吸状况呼吸状况、肝肝、肾功
7、能和血象无肾功能和血象无异常异常。试验前两周内未服用任何其它药物试验前两周内未服用任何其它药物。签署知情同意书。签署知情同意书。受试者例数为受试者例数为1824例例 绝对生物利用度试验选用经批准上市的绝对生物利用度试验选用经批准上市的相同药物静脉注射剂作为参比制剂相同药物静脉注射剂作为参比制剂。相对生物利用度试验选用经批准上市的相对生物利用度试验选用经批准上市的相同药物相同剂型的主导产品作为参比相同药物相同剂型的主导产品作为参比制剂制剂 对受试者的要求对受试者的要求 受试者于试验前受试者于试验前1日和试验期内均勿饮用酒日和试验期内均勿饮用酒类和咖啡类饮料；试验前禁食过夜类和咖啡类饮料；试验前禁
8、食过夜10小时小时。于次日早晨空腹服用受试制剂或参比制剂于次日早晨空腹服用受试制剂或参比制剂，用用150200ml温开水送服；服药温开水送服；服药2小时小时后方可再饮水后方可再饮水，4小时后进统一餐小时后进统一餐。受试者服药后应避免剧烈运动，亦不得长受试者服药后应避免剧烈运动，亦不得长时间卧床时间卧床 对乙酰氨基酚咀嚼片生物利用度研究自愿受试者知情同意书对乙酰氨基酚咀嚼片生物利用度研究自愿受试者知情同意书 我自愿参加对乙酰氨基酚咀嚼片人体生物利用度和生物等效性我自愿参加对乙酰氨基酚咀嚼片人体生物利用度和生物等效性研究研究。经过华中科技大学同济医学院临床药理研究所医生对本项研经过华中科技大学同济
9、医学院临床药理研究所医生对本项研究所作的充分说明究所作的充分说明，我已经了解到我已经了解到，本项研究是经国家药品监督管本项研究是经国家药品监督管理局批准理局批准，为证实对乙酰氨基酚咀嚼片在人体吸收程度合格性而进为证实对乙酰氨基酚咀嚼片在人体吸收程度合格性而进行的工作；我已经认识到该研究的行的工作；我已经认识到该研究的意义意义、目的目的、药物作用药物作用、可能出可能出现的不良反应以及有效的预防办法现的不良反应以及有效的预防办法。试验期间我将按医生要求用药试验期间我将按医生要求用药，不用任何其它药物；按要求进餐不用任何其它药物；按要求进餐，不吸烟不吸烟、不饮酒不饮酒，适度活动；按适度活动；按规定时
10、间接受血样采集和必要的观察规定时间接受血样采集和必要的观察。临床临床药理研究所将进行必要药理研究所将进行必要的监护并提供自愿受试者营养费的监护并提供自愿受试者营养费，以保证工作顺利进行以保证工作顺利进行。鉴于此鉴于此，我自愿参加对乙酰氨基酚咀嚼片人体生物利用度和生物等效性研究我自愿参加对乙酰氨基酚咀嚼片人体生物利用度和生物等效性研究，并按照试验要求与医务人员密切配合完成此项研究并按照试验要求与医务人员密切配合完成此项研究。自愿受试者（签名）自愿受试者（签名）年年 月月 日日 华中科技大学同济医学院临床药理研究所华中科技大学同济医学院临床药理研究所 临床药理所医生（签名）临床药理所医生（签名）_
11、 年年 月月 日日 三、设计方法三、设计方法 一个受试制剂与一个参比制剂比较的情况一个受试制剂与一个参比制剂比较的情况下下，采用两制剂双周期交叉试验设计采用两制剂双周期交叉试验设计，以以减少不同试验周期和个体差异对试验结果减少不同试验周期和个体差异对试验结果的影响的影响。受试者按随机原则分成两组受试者按随机原则分成两组。一组受试者一组受试者先服用受试制剂先服用受试制剂，后服用参比制剂；另一后服用参比制剂；另一组受试者先服用参比制剂组受试者先服用参比制剂，后服用受试制后服用受试制剂剂。通常应间隔通常应间隔1周或周或2周周。半衰期长的药半衰期长的药物物，需有更长的间隔时间需有更长的间隔时间。四、生
12、物样品采集时间点的确定四、生物样品采集时间点的确定 通常应有预试验通常应有预试验，为合理设计采样点提供依据为合理设计采样点提供依据。应用血药浓度测定法时应用血药浓度测定法时，服药前应先取空白血样服药前应先取空白血样。一般在药时曲线峰前部分至少取一般在药时曲线峰前部分至少取4个点个点，峰后部峰后部分取分取6个或个或6个以上点个以上点。总采样点不少于总采样点不少于11个个。采样持续到受试药原形或其活性物采样持续到受试药原形或其活性物35个半衰期个半衰期时时，或持续采样至血药浓度为或持续采样至血药浓度为Cmax的的110120以后以后。五、生物等效性评价五、生物等效性评价 对受试制剂与参比制剂的生物
13、等效性评价，应从对受试制剂与参比制剂的生物等效性评价，应从药物吸收程度和吸收速度两方面进行。药代动力药物吸收程度和吸收速度两方面进行。药代动力学参数学参数AUC和和Cmax，经对数转换后进行交叉试经对数转换后进行交叉试验的方差分析与双单侧验的方差分析与双单侧t检验处理。检验处理。若受试制剂若受试制剂AUC的的90可信限落在参比制剂可信限落在参比制剂80125范围内，范围内，Cmax的的90可信限落在可信限落在70143范围内，范围内，Tmax经非参数法检验无差异，经非参数法检验无差异，可以认定受试制剂与参比制剂生物等效。可以认定受试制剂与参比制剂生物等效。2 临床前药代动力学研究 1研究目的：
14、研究目的：了解新药在体内动态变化规律，阐明ADME过程。为药理毒理研究中的安全性与有效性提供依据。2、检测方法：、检测方法：建立检测方法要求同上！放射性核素标记药物，用前要进行纯度检查，放化纯度95%标准曲线与线性范围：要指明药物的化学纯度 要制备药物在不同生物介质中的标准曲线。在所测浓度范围内，药物自生物样品的回收率不低于70。3.试验材料与方法试验材料与方法 1）实验药品）实验药品 应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。使用的受试药物应与药效学或毒理学研究使用的一致。对照品应是标明含量的纯品 2）实验动物实验动物 一般采用成年和健康的动物。常用动物有小鼠、大鼠、兔、豚
15、鼠和狗等。首选动物：应与药效学或毒理学研究一致。尽量在清醒状态下实验，动力学研究最好从同一动物多次采样。创新药应选用两种或两种以上的动物，其中一种为啮齿类动物；另一种为非啮齿类动物。其他类型的药物，可选用一种动物（建议首选非啮齿类动物，如犬或兔等）。口服用药不宜选用兔子等食草类动物。3）给药途径给药途径 所用的给药途径和方式，应尽可能与临床用药一致。4）试验剂量试验剂量 药代动力学研究至少应设三个剂量组，其中一个剂量应相当于药效学试验有效剂量，高剂量一般接近于最大耐受量(MTD)，以了解药物在体内的动力学过程是线性动力学还是非线性动力学。4 实验设计实验设计 1）血药浓度时间曲线：取样点的设计
16、应兼顾到吸收相、分布相和消除相.根据研究样品的特性，取样点通常可安排913个点不等，即吸收相应取23个点，达峰浓度处取23点，分布相取23点，消除相取34个点 整个采样时间应持续到35个半衰期或到Cmax的1/101/20。在非连续取样的动物试验中，每个时间点至少应有5只动物的数据;如经同一动物多次采样，每个时间点至少应有3只动物的数据。口服给药，一般在给药前应禁食12小时以上。特布他林浓度特布他林浓度-时间曲线图时间曲线图 2）组织分布试验）组织分布试验 一般选用小鼠或大鼠，选定一个有效剂量给药后，分别在吸收相、分布相和消除相各选一个时间点取样测定。测定心、肝、肾、脾、肺、脑、胃、肠、子宫或睾丸、脂肪和肌肉等重要组织中的浓度，以了解药物在体内的主要分布组织，特别是效应靶器官和毒性靶器官的分布。若某组织的药物浓度较高，应进一步研究消除的情况。每个时间点至少应有5个动物的数椐。同位素标记物的组织分布试验，尽可能提供给药后不同时相的整体放射自显影图像。3）排泄试验 一般选用小鼠或大鼠进行排泄试验。选定一个有效剂量，给药后按一定的时间间隔分段收集尿液、粪便和大鼠的胆汁，记录每一时间间隔内的尿
